羟脯氨酸检测试剂盒使用说明
本草养颜膏对衰老皮肤羟脯氨酸含量的影响
１３ 仪器 ．
紫外 分光 光度 计 ， 口 日本 岛津 牌 ， 进 型号 为
Ｕ － ４ １Ｃ 电子精密天平 ， Ｖ ２０ Ｐ ； 长沙湘平科技 发展有 限公 司生 产 ， 号为 Ｅ－ＯＯ ； 型 Ｓ ＩＯＥ 以上 实 验 仪 器 均 由 甘 肃 中 医 学 院 科
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的 影 响 ， 且 与对 照 组 进 行 比较 。 并
１ ２ 实验动物 ．
昆明种 Ｓ Ｆ级 １ Ｐ Ｏ月龄小 鼠 ６ ０只， 雌雄各
苯丙氨酸检测试剂盒（细菌抑制法）说明书
苯丙氨酸检测试剂盒（细菌抑制法）说明书【产品名称】通用名称：英文名称：【包装规格】【预期用途】【检验原理】【主要组成成分】【储存条件及有效期】【适用机型】【样本要求】【检验方法】【参考值（参考范围）】【检验结果的解释】【检验方法的局限性】【产品性能指标】【注意事项】【参考文献】【生产企业】【医疗器械生产企业许可证编号】【医疗器械注册证书编号】【产品标准编号】【说明书批准及修改日期】【产品名称】通用名：苯丙氨酸检测试剂盒（细菌抑制法） 英文名称： Phenylalanine Kit （BIA ）【包装规格】96人份/盒【预期用途】用于检测采集在S&S 903# 滤纸上的新生儿血样品中苯丙氨酸的含量。
适用于新生儿苯丙酮尿症（PKU ）的筛查，仅用于体外检测。
苯丙酮尿症（简称PKU ）是一种较常见的常染色体隐性遗传性氨基酸代谢病，发病率约1/10,000。
本病可因苯丙氨酸羟化酶缺乏引起，也可因辅酶因子BH 4缺陷引起。
这些缺陷致使苯丙氨酸不能被转化为酪氨酸，导致大量的苯丙氨酸及其代谢产物在体内堆积，引起中枢神经系统损害。
其临床主要表现为：发育迟缓，毛发、皮肤及虹膜变浅，癫痫，进行性智力低下等。
由于本病的早期发现早期治疗，对患儿的生长发育、智力发育不受影响，因此被我国列为新生儿疾病筛查项目之一。
检测方法还有荧光法、酶法等。
【检验原理】枯草杆菌在含有抑制剂的培养基中生长受到抑制，而当外界提供苯丙氨酸环境时，抑制作用解除，枯草杆菌即可恢复生长且细菌生长环的直径与苯丙氨酸的含量呈正比。
所以在制备好的培养基上，放上滤纸干血片，血中的苯丙氨酸会扩散到周围培养基中，被抑制的枯草杆菌即可恢复生长。
用被检样品的菌环直径与标准品的菌环直径相比，得出样品中苯丙氨酸的含量。
【主要组成成分】苯丙氨酸筛查试剂盒（细菌抑制法）组成表名称96人份/盒 包装琼脂糖粉 （琼脂粉、葡萄糖粉） 1.5g/瓶 无色透明玻璃瓶营养液（氨基酸、磷酸盐缓冲液等） 10ml/瓶 青霉素酶（青霉素酶、生理盐水） 0.3ml/瓶 抑制剂（β-2-噻吩丙氨酸） 1.0ml/瓶 菌株孢子悬液（枯草杆菌） 0.2ml/瓶 一次性培养皿（透明聚苯乙烯） 1块无色透明塑料袋 标准血片 2;4;8;20mg/dl(全血、苯丙氨酸) 1份 质控血片C1、C2(全血、苯丙氨酸) 1份 说明书1份注*：标准品或质控品的浓度若有改变，将在试剂盒内放通知单，同时电话通知。
血清唾液酸与羟脯氨酸联合检测在恶性肿瘤诊断中的临床价值
血清唾液酸与羟脯氨酸联合检测在恶性肿瘤诊断中的临床价值余辉艳;白雪梅;于培红;张家淮【摘要】目的探讨血清唾液酸与羟脯氨酸联合检测在恶性肿瘤诊断中的临床价值.方法选取共296例标本,其中肿瘤患者142例、非肿瘤类疾病患者55例、健康人99例,比色法检测血清唾液酸与羟脯氨酸浓度.比较在不同疾病下该指标的检测结果,统计分析各组间结果差异,探讨其对肿瘤的诊断价值.结果肿瘤组唾液酸与羟脯氨酸浓度明显高于非肿瘤疾病组和健康组,且差异具有统计学意义(P＜0.05).结论测定血清中唾液酸与羟脯氨酸浓度,有利于临床上恶性肿瘤的辅助诊断.【期刊名称】《标记免疫分析与临床》【年(卷),期】2016(023)001【总页数】3页(P26-28)【关键词】血清唾液酸与羟脯氨酸浓度;恶性肿瘤诊断;临床应用价值【作者】余辉艳;白雪梅;于培红;张家淮【作者单位】首都医科大学右安门临床检验中心,北京100069;首都医科大学右安门临床检验中心,北京100069;首都医科大学右安门临床检验中心,北京100069;首都医科大学右安门临床检验中心,北京100069【正文语种】中文当恶性肿瘤细胞发生增殖、转移、浸润时，细胞粘附性降低，血清中唾液酸（sialic acid，SA）含量会升高，测定唾液酸含量对恶性肿瘤的辅助诊断有重要作用［1-2］；肿瘤浸润或转移可破坏胶原蛋白、弹性蛋白和骨组织，其特异性组成成分羟脯氨酸（hydroxyproline，Hyp）在血清中会出现显著升高［3-4］。
本文对 142例恶性肿瘤患者、55例非肿瘤类疾病患者及99例健康体检者进行血清唾液酸与羟脯氨酸浓度检测，通过对肿瘤组、非肿瘤疾病组及健康组灵敏度、特异性及一致性分析，探讨血清唾液酸与羟脯氨酸浓度联合检测对恶性肿瘤临床辅助诊断的应用价值。
1 样本共计296例样本，其中男性173例，女性123例。
年龄分布为：18～39岁102例；40～59岁82例；60岁以上112例。
苯丙氨酸定量检测试剂盒（荧光法）说明书
苯丙氨酸定量检测试剂盒（荧光法）说明书【产品名称】通用名称：英文名称：【包装规格】【预期用途】【检验原理】【主要组成成分】【储存条件及有效期】【适用机型】【样本要求】【检验方法】【参考值（参考范围）】【检验结果的解释】【检验方法的局限性】【产品性能指标】【注意事项】【参考文献】【生产企业】【医疗器械生产企业许可证编号】【医疗器械注册证书编号】【产品标准编号】【说明书批准及修改日期】【产品名称产品名称】】通用名称：苯丙氨酸定量检测试剂盒（荧光法） 英文名称：Phenylalanine Kit （FA ） 【包装规格包装规格】】96人份/盒 480人份/盒 【预期用途预期用途】】用于定量检测采集在S&S 903# 滤纸上的新生儿全血样品中苯丙氨酸的浓度。
适用于新生儿苯丙酮尿症（PKU ）的筛查，仅用于体外检测。
苯丙酮尿症（简称PKU ）是一种较常见的常染色体隐性遗传性氨基酸代谢病，发病率约1/10,000。
本病可因苯丙氨酸羟化酶缺乏引起，也可因辅酶因子BH 4缺陷引起。
这些缺陷致使苯丙氨酸不能被转化为酪氨酸，导致大量的苯丙氨酸及其代谢产物在体内堆积，引起中枢神经系统损害。
其临床主要表现为：发育迟缓，毛发、皮肤及虹膜变浅，癫痫，进行性智力低下等。
由于本病的早期发现早期治疗，对患儿的生长发育、智力发育不受影响，因此被我国列为新生儿疾病筛查项目之一。
检测方法还有细菌抑制法、酶法等。
【检验原理检验原理】】在含有琥珀酸缓冲液、二肽溶液和茚三酮溶液的混合液中，茚三酮可以和苯丙氨酸反应，产生一种荧光物质，其中二肽可提高此荧光反应，琥珀酸缓冲液控制PH 5.8±0.1，可保证理想的荧光值和最大的特异性，加入铜溶液后可以使荧光化合物更加稳定并终止反应。
使用荧光读数仪（激发光390nm ，发射光486nm ）测定荧光物质的强弱，即可反映苯丙氨酸的浓度。
【主要组成成分主要组成成分】】名称96人份/盒 480人份/盒 包装琥珀酸缓冲液 （琥珀酸）5ml /瓶 25ml /瓶无色透明玻璃瓶 或白色塑料瓶二肽溶液 （L-leucyl-L-alanine ） 1 ml /瓶 5ml /瓶 茚三酮溶液（茚三酮）2 ml /瓶 10m l/瓶 铜溶液（碳酸钠、酒石酸钾纳、硫酸铜） 25ml /瓶 125m l/瓶96孔微孔板（透明） 1块 5块无色透明塑料袋96孔微孔板（白色）1块 5块 标准血片S 1～S6 （0.24、1.06、2.76、5.32、8.34、13.47 mg/dl ） 1份 2份 铝箔袋质控血片C1、C2 1份2份说明书 1份 质量验证单1份注：标准品或质控血片的浓度若有改变，将在试剂盒内放通知单，同时电话通知。
试剂盒使用说明书
人抗乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中抗乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）水平。
用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被的微孔中依次加入抗乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb），再与HRP标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的抗乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人抗乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）含量。
试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存标准品：270IU/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
本草养颜膏对衰老皮肤羟脯氨酸含量的影响
本草养颜膏对衰老皮肤羟脯氨酸含量的影响靳怡;王萍;潘文【摘要】目的:探讨外用本草养颜膏对小鼠衰老皮肤羟脯氨酸含量的影响.方法:将60只10月龄小鼠随机分为对照组和治疗组,每组30只,分别于用药后第10天、20天.30天时颈椎脱臼处死,测量等同面积皮肤的重量和羟脯氨酸的含量.结果:用药10天时,皮肤重量和羟脯氨酸含量有增加现象,继续用药20天和30天后,与对照组比较,治疗组皮肤重量和羟脯氨酸含量明显增加(P＜0.05和P＜0.01).结论:本草养颜膏外用可增加衰老皮肤中羟脯氨酸含量,促进皮肤胶原蛋白合成,具有延缓皮肤衰老的作用.【期刊名称】《西部中医药》【年(卷),期】2010(023)006【总页数】2页(P32-33)【关键词】本草养颜膏;羟脯氨酸;衰老;小鼠【作者】靳怡;王萍;潘文【作者单位】西北师范大学生命科学院,甘肃,兰州,730000;甘肃中医学院医学美容教研室;甘肃省中医药研究院【正文语种】中文【中图分类】R275本草养颜膏是在开发唐代美容古方“玉容散”的基础上结合现代生物科技研制而成的一种皮肤外用功效型中药制剂。
主要成分有白及、白蔹、白僵蚕等，对面部皮肤干燥粗糙、皱纹早现及晦暗无光泽等症状有较好的治疗和美容作用［1］，临床应用后疗效显著。
现通过实验研究来探讨其作用机制，报告如下：1.1 药物与试剂本草养颜膏及其基质，均由甘肃中医学院医学美容教研室提供；皮肤羟脯氨酸测定试剂盒，由南京建成生物工程研究所提供［批号：20070726］；科玛脱毛膏，由柏维诗(香港)化妆品贸易公司提供。
1.2 实验动物昆明种S P F级10月龄小鼠60只，雌雄各半，体质量29.5～35.6 g，由甘肃中医学院科研实验中心提供，实验动物合格证号：SCX K(甘)2004-0006；实验室温度(25±1)℃，相对湿度70%。
1.3 仪器紫外分光光度计，进口日本岛津牌，型号为U V-2401P C；电子精密天平，长沙湘平科技发展有限公司生产，型号为ES-1000E；以上实验仪器均由甘肃中医学院科研实验中心提供。
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羟脯氨酸检测试剂盒使用说明
微量法
货号:BC0255
规格:100T/96S
产品简介：
HYP是机体胶原蛋白主要成分之一，胶原蛋白大多分布于皮肤、腱、软骨和血管等，因此HYP
含量是反映胶原组织代谢及纤维化程度的一项重要指标。
样品经水解产生游离的HYP，进一补被氯胺T氧化，氧化产物与对二甲氨基苯甲醛反应，产
生红色化合物，在560nm处有特征吸收峰。通过测定样品水解液560nm吸光值，可计算HYP
含量。
产品内容：
组织提取液：6mol/L盐酸，自备。浓盐酸：H2O（V/V）=1:1，室温保存；
细胞提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体10mL×1瓶，4℃避光保存；
试剂二：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。
操作步骤：
一、羟脯氨酸提取：
1.组织：取约0.2g样品于玻璃管，加入2mL的组提取液，置于110℃烘箱，水解6至12
小时，16000rpm，25℃，离心20min，用提取液定容至2mL，取上清待测。
2.细胞：取约500万个细胞，加入1mL的细胞提取液，于高压消毒器中15磅保持30min，
自然降压后待测。
二、测定操作：
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对照管测定管
样本（uL）60
试剂一（uL）6060
混匀，室温静置20min
试剂二（uL）6060
H2O（uL）180120
混匀，60℃，20min，取出后室温静置15min，测定A560。(A560=A测定-A对照)
羟脯氨酸含量计算：
用微量比色皿测定的计算公式:
标准曲线：y=64.875x+0.0251，R2=0.9991
（1）按组织计算
HYP含量（mg/g）=（A560-0.0251）÷64.875×V反总÷(V样÷V样总×W)
=0.154×（A560-0.0251）÷W
（3）按细胞计算：
HYP含量（mg/104cell)=（A560-0.0251）÷64.875×V反总÷V样×V样总÷细胞数量（万
个）
=0.077×（A560-0.0251）÷细胞数量（万个）
V反总：反应体系总体积，0.3mL；V样：反应中样本体积，0.06mL；V样总：加入提取液
体积，mL；W：样本质量，g。
用96孔板测定的计算公式如下:
标准曲线：y=32.4375x+0.0251，R2=0.9991
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（1）按组织计算
HYP含量（mg/g）=（A560-0.0251）÷32.4375×V反总÷(V样÷V样总×W)
=0.308×（A560-0.0251）÷W
（3）按细胞计算：
HYP含量（mg/104cell)=（A560-0.0251）÷32.4375×V反总÷V样×V样总÷细胞数量（万
个）
=0.154×（A560-0.0251）÷细胞数量（万个）
V反总：反应体系总体积，0.3mL；V样：反应中样本体积，0.06mL；V样总：加入提取液
体积，mL；W：样本质量，g。
注意事项：
1、OD值大于0.8，样品适当稀释再测定，注意计算公式里乘以稀释倍数。
2、试剂有一定的毒性，请操作时做好防护措施，防止吸入或与皮肤接触。