第三章动物细胞融合与杂交
2018_2019学年高中生物专题2细胞工程2.2动物细胞工程2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体课件新人教版选修3
黄花烟草原生质体和 “革新” 一号烟草原生质体的融 合两个科学实验，在电融合仪内经过 160 min 后，终于获 得成功。 材料二 如图为哺乳动物生殖过程及相关细胞工程
的示意图，其中 b 为卵细胞，c、d 为体细胞。
根据以上材料回答。 (1)细胞融合技术与传统的有性杂交相比，其优越性 在于 ___________________________________________。
(4)人工诱导动物细胞融合与诱导植物细胞融合的方 法相同的是都可用物理法和化学法，此外动物细胞融合 还可用______________作为诱导剂。 解析：(1)细胞融合与精卵结合相比，通过人工的方 法克服了存在于物种之间的遗传屏障的困难， 从而能够按 照人们的主观意愿， 把来自不同物种的不同组织类型的细 胞融合起来，克服了远缘杂交不亲和的障碍。
专题2 细胞工程
2.2 动物细胞工程
2．2.2 动物细胞融合与单 克隆抗体
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1.概述动物细胞融合技术。2.概述单克
隆抗体的制备过程及单克隆抗体的特点及应用。3.比较动 物细胞融合与植物体细胞杂交技术。
一、动物细胞融合 1．概念：是指两个或多个动物细胞结合形成一个细 胞的过程，也称细胞杂交。 2．原理：细胞膜的流动性。 3．结果：形成杂交细胞。 4．诱导因素：①聚乙二醇(PEG)、②灭活的病毒、 ③电激等。
(2)制备过程。
(3)单克隆抗体优点：特异性强、灵敏度高、 并可大量制备。 (4)单克隆抗体的应用。 ①作为诊断试剂，具有准确、高效、简易、快速的 优点。 ②用于治疗疾病和运载药物。
判断正误 1．动物细胞培养前要用胃蛋白酶处理分散成单个细 胞。(×) 提示： 不能用胃蛋白酶处理， 能用胰蛋白酶或胶原蛋 白酶处理，因为胃蛋白酶的适宜 pH 为 1.5 左右。
高二生物人教版选修3课件：专题22-2-2动物细胞融合与单克隆抗体PPT课件
目
原理
细胞融 用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁 合方法 后诱导原生质体融合
用胰蛋白酶或胶原
蛋白酶使细胞分散
后，诱导细胞融合
专题2——
仅供学习交流！！！
专题2——
3．动物细胞融合和受精作用的区别有哪些呢？ 答案 (1)受精作用是在同种生物之间进行的，精子与卵细胞的融 合不需要任何诱导剂就能形成受精卵，受精卵内具备同种生物的 两个亲本的遗传物质。 (2)动物细胞融合是在不同物种间进行的细胞融合，由于物种间存 在生殖隔离，所以在自然条件下不能融合成杂交细胞，必须有诱 导剂作用才能融合。形成的杂交细胞具备两个亲本细胞的遗传物 质，从而体现两个亲本的遗传特性。
专题2——
1 预习导学
2 课堂讲义 3 对点练习
挑战自我，点点落实 重点难点，个个击破
即时训练，体验成功
预习导学
挑战自我，点点落实
一、动物细胞融合(阅读P52－53) 1．概念： 两个 或 多个 过程，也称细胞杂交。 动物细胞结合形成 一个细胞 的
细胞膜的流动性 。 2．原理： 3．诱导融合的方法： (1)物理、化学方法：与植物体细胞杂
B淋巴 杂交瘤 诊断试剂
对点练习
1 2 3 4
1 ．下列关于动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，叙 述正确的是( ) A．诱导融合的方法完全相同 B．所用的D．都能形成杂种细胞
专题2——
1 2 3 4
2．单克隆抗体在医疗、诊断等方面发挥着越来越重要的作用。英
(5)单克隆抗体最主要的优点是特异性强、灵敏度高，并能大量制
备。( √ )
(6)单克隆抗体可以用于治疗疾病。( √ ) (7)动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体能体现细胞的全能性。( × )
第三章 细胞工程
第三章细胞工程案例1. 世界上第一头克隆绵羊“多莉”1997年2月27日英国爱丁堡罗斯林(Roslin)研究所的伊恩·维尔莫特科学研究小组向世界宣布，世界上第一头克隆绵羊“多莉”(Dolly)诞生，这一消息立刻轰动了全世界。
“多利”的产生与三只母羊有关。
一只是怀孕三个月的芬兰多塞特母绵羊，两只是苏格兰黑面母绵羊。
芬兰多塞特母绵羊提供了全套遗传信息，即提供了细胞核（称之为供体）；一只苏格兰黑面母绵羊提供无细胞核的卵细胞；另一只苏格兰黑面母绵羊提供羊胚胎的发育环境——子宫，是“多莉”羊的“生”母。
其整个克隆过程简述如下：从芬兰多塞特母绵羊的乳腺中取出乳腺细胞，将其放入低浓度的营养培养液中，细胞逐渐停止了分裂，此细胞称之为供体细胞；给一头苏格兰黑面母绵羊注射促性腺素，促使它排卵，取出未受精的卵细胞，并立即将其细胞核除去，留下一个无核的卵细胞，此细胞称之为受体细胞；利用电脉冲的方法，使供体细胞和受体细胞发生融合，最后形成了融合细胞，由于电脉冲还可以产生类似于自然受精过程中的一系列反应，图3-1 克隆羊“多利”使融合细胞也能象受精卵一样进行细胞分裂、分化，从而形成胚胎细胞；将胚胎细胞转移到另一只苏格兰黑面母绵羊的子宫内，胚胎细胞进一步分化和发育，最后形成一只小绵羊。
出生的“多莉”小绵羊与多塞特母绵羊具有完全相同的外貌。
从理论上讲，多莉继承了提供体细胞的那只芬兰多塞特母绵羊的遗传特征，它是一只白脸羊，而不是黑脸羊。
分子生物学的测定也表明，它与提供细胞核的那头羊，有完全相同的遗传物质（确切地说，是完全相同的细胞核遗传物质。
还有极少量的遗传物质存在于细胞质的线粒体中，遗传自提供卵母细胞的受体），它们就像是一对隔了6年的双胞胎。
克隆羊“多利”的诞生，引发了世界范围内关于动物克隆技术的热烈争论。
是科学界克隆成就的一大飞跃。
它还被美国《科学》杂志评为1997年世界十大科技进步的第一项，也是当年最引人注目的国际新闻之一。
体细胞杂交与细胞融合的区别
体细胞杂交与细胞融合的区别
体细胞杂交和细胞融合在原理和应用上存在显著的差异。
体细胞杂交的原理是基于细胞膜的流动性和细胞的全能性，通过融合两个不同植物的体细胞来创造新的植物品种。
这项技术的目的是克服植物间远源杂交的不亲和性，培育作物新品种。
细胞融合则是动物细胞融合技术的原理，同样利用了细胞膜的流动性，但更多的是关注于细胞的增殖。
动物细胞融合技术的主要应用不是为了培育新品种，而是用于制备单克隆抗体。
单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面具有特异性强、灵敏性高的优点。
总结来说，体细胞杂交和细胞融合在应用和研究领域、原理、目的和方法上都有明显的区别。
实验3 PEG介导的动物细胞融合技术
实验3 PEG介导的动物细胞融合技术
PEG介导的动物细胞融合技术是一种常用的体外融合细胞的方法，主要应用于融合一些生长速度缓慢或难以进行杂交的细胞。
该技术利用聚乙二醇（PEG）使两种不同细胞融合成一个细胞，从而产生一些杂合细胞，可以获得有趣的遗传组合。
技术原理
PEG确保了细胞融合的前提是细胞外膜的破裂。
PEG受到细胞表面膜过渡物质的吸引，然后与细胞表面膜结合，形成一个PEG-膜复合物。
虽然聚乙二醇是一种高分子，但由于其化学性质与细胞膜相似，在一定程度上可以渗透到细胞膜中，从而使细胞表面膜发生缺陷和破裂，从而产生细胞融合。
实验步骤
1.将需要融合的两种细胞分别进行繁殖和培育，并将其分离。
2.将细胞置于无血清的生长培养基中，进行24-48小时的饥饿处理，使细胞停止生长。
3.制备PEG溶液，将细胞加入到PEG中，进行处理。
4.将PEG处理后的细胞转移到培养基中，定期更换培养基供给其营养并观察其生长情况。
实验注意事项
1.选择渗透性强，尺寸相似的细胞，以利于融合。
2.通过显微镜观察细胞的形态和数量，确保细胞膜在PEG处理后的破裂和细胞融合情况。
3.注意PEG用量，一般为2-4 g/L，过多的PEG处理可能会导致不必要的副作用。
4.注意细胞的状态和健康程度，以保证实验的稳定性和可靠性。
实验应用
PEG介导的细胞融合技术被广泛应用于细胞融合和制备杂交瘤，可以产生一些具有较好生长特性和生物学功能的新型细胞。
此外，该技术也应用于基因转移、卵母细胞和体细胞融合技术，以及其他相关研究领域中。