中药血清药物化学
中药血清药物化学的研究动态及发展趋势_王喜军
综述中药血清药物化学的研究动态及发展趋势王喜军(黑龙江中医药大学药学院,黑龙江哈尔滨150040)[摘要]中药血清药物化学作为一门新兴的应用学科,近年来在中药及复方的研究领域方兴未艾。作者回顾了中药血清药物化学产生的历史背景、概念的提出及独立理论体系形成的整个演变过程;总结了中药血清药物化学的成功实践经验;在此基础上提出了中药血清药物化学的未来发展方向、目标及具体方案;预见,中药血清药物化学必将被更加广泛地应用到中医药研究的的各个领域,并与其他相关学科相互融合,不断地发展壮大,最终成为推动中医现代化进程的主要学科。[关键词]中药血清药物化学;药效物质基础;中药现代化;药物代谢[中图分类号]R2855[文献标识码]A[文章编号]10015302(2006)10078905
[收稿日期]20050812[通讯作者]王喜军,Tel:(0451)82110818,Email:wxj@hljucmnet中药及复方研究的基本困难在于药效物质基础不明,因此对于其作用机制、生物转化和代谢过程等系列研究也就成了无的放矢;药效物质基础不明确直接造成中药不能建立与国际接轨的质量标准,缺乏可靠的药理学、毒理学研究数据,导致我国中药出口率低、市场竞争力薄弱,已成为严重制约中药发展的瓶颈[1]。传统的研究方法利用色谱、光谱等技术,寻找中药中的化学成分,研究其结构、性质、组成,从而揭示中药作用物质基础,在中药的现代研究中取得了很多卓越的成就。但大多所谓活性成分研究,多半只是将分离得到的化合物在测定结构之后,再进行活性筛选,收效甚微,很少有人采用活性指导下的导向分离方法,因此那些含量甚微又难于分离的活性成分在分离途中可能丢失,且丢失了也难于察觉。中药复方是中医防病治病的主要手段,但所含成分极为复杂,活性成分的研究很少有人涉足,甚至不想涉足,或是能力有限,生物体内环境(如pH值、肠内菌丛、酶等)对中药复方制剂成分的影响也常被忽视。故采用传统方法得到的成分很可能只是一般化学成分,或可能只是活性成分的前体药物[2]。可见,传统中药及复方研究方法停留在分步提取、药效追踪的体外水平,所确定的成分是否是药效的代表性成分尚待商榷。多数中药或复方现行质量标准中所谈及或测定的所谓有效成分多为主要药物的主要成分或指标成分,并无充分依据证明其为有效成分。1中药血清药化学的提出传统的中药及复方研究模式只注重药物对人体的作用,一味地去研究中药中到底含有什么成分,什么成分能在体外药理实验中显示活性,往往使研究走入误区,不能真正的阐明中药及复方的药效物质基础。例如,生姜所含的6gingerol(6G)被认为是主要有效成分,亦能被吸收入血,然而当血液中6G已被完全清除时,药效尤在,说明生姜在体内有除6G以外的物质存在。可见,注重中药口服后的体内过程,从体内成分的角度去研究中药更为合理。1989年日本学者鹿野美弘发表了口服甘草附子汤后大鼠门静脉血中成分分析的文章[3]。同期,日本学者田代真一基于人体胃肠道中寄生菌群能够通过水解苷类物质获得能量来源,中药产生生物活性的成分可能是中药经过菌群代谢之后的产物的想法,提出了血清药理学和血清药化学的概念[4]。血清药理学的方法具有能防止中药粗制剂本身理化性质对实验干扰,尤其是模拟药物的体内过程,实现体外实验的有效性等优点,被国内学者广泛引用并取得了很好的效果[5,6]。但血清中成分不清楚,还是一种形式的黑箱操作,仍不能阐明中药的药效物质基础。血清药物化学主要是研究血清中的化学物质,观测血清中外源性活性物质及其作用和代谢规律。但至提出以后,很少见有研究报道,1994年鹿野美弘、王喜军、王莎莎等人发表了有关茵陈蒿的血中移行成分及药代动力学、口服远志提取物后血清及胆汁中活性成分分析的研究论文[7,8],使血清药物化学的工作被真正付诸实践。此后王喜军等进行了大量血清药物化学的实践研究工作,1997年,发表了中药及复方的血清药物化学研究一文,正式提出了中药血清药物化学的概念及理论。2001年发表了中药血清药物化学的理论与实践一文,完成了中药血清药物化学方法的建立与实789第31卷第10期2006年5月中国中药杂志ChinaJournalofChineseMateriaMedicaVol31,Issue10May,2006施的系统研究工作(获得了2002年度国家科技进步二等奖)。使中药血清药物化学的理论及方法实现了系统化及规范化,确定了中药血清药物化学理论内涵及方法的技术规范,将中药血清药物化学定义为以药物化学的研究手段和方法为基础,多种现代技术综合运用,分析鉴定中药口服后血清中移行成分,研究其药效相关性,确定中药药效物质基础并研究其体内过程的应用学科。2中药血清药物化学的理论基础及研究范畴任何药物都是通过与人身的相互作用来发挥疗效的。中药所含成分及其复杂,要想将其成分逐一地弄清楚,再进行药效、药理学研究,几乎是不可能的。此时,就应该换一个角度来思考这个问题,即首先考虑人体对药物的作用。中药口服给药后,经消化道、肠道菌群作用,生成一种由中药固有成分及其代谢产物组成的混合物,有的直接被排泄,有的被选择性吸收,经肝酶作用进入血液,通过血液运输到各个器官组织或靶点,并在达到一定的血药浓度时才能真正起效。可见,不论中药含有多少成分,只有进入血液的成分才有可能成为有效成分(外用药及直接刺激胃肠道药物除外)。目前,绝大多数中药及复方仍然只能采用传统的口服给药的方式,口服中药后的血清中含有真正的有效成分,即原形成分、代谢产物及机体产生的应激性成分。因此,通过分析口服给药后血清中成分,确定中药及复方的体内直接作用物质,将成为快速、准确的研究确定中药药效物质基础的有效途径。中药血清药物化学正是基于以上论述而建立并发展的。中药血清药物化学的研究目的决定其研究范畴应该包括以下几方面:口服样品成分分析及品质评价;实验动物的选择;给药方案的确定;采血时间及采血方式的确定;含药血清样品的制备;血清样品分析方法的选择;血中移行成分的制备;血中移行成分与中药传统疗效相关性研究;代谢产物及代谢途径研究;中药及复方的药代动力学研究。3中药血清药物化学研究的成功实践31对单味药的研究311远志口服给药后,在血清中分离获得了TMCA及其代谢物MTMCA,经药效研究证明TMCA及MTMCA具有显著的镇静催眠作用,为远志的药效成分[8]。312茵陈蒿口服给药后,监测血清中成分发现只有6,7DME被大量吸收入血,药效研究证明其具有利胆、抗炎、利尿、降血脂等一系列茵陈蒿生药的药效,是茵陈蒿的有效成分[9]。313越桔茎叶经口给药后,发现熊果苷和秦皮苷被吸收入血,药效研究证明它们的活性与越桔疗效有相关性,表明秦皮苷及熊果苷为越桔茎叶的体内直接作用物质[10]。314白术白术提取物口服给药后苍术酮和苍术内酯并未被吸收,只有TEDYA在消化管内水解成TEDY而被吸收入血,TEDY是白术体内直接作用物质,而TEDYA是前体药物[11]。315东北红豆杉乙醇提取物口服后,证明血中主要移行成分是紫杉醇、紫杉脂素、异紫杉脂素、紫杉宁、三尖杉酯碱、金松双黄酮、银杏双黄酮等,并通过药效学研究确定了以上述成分为主的药用部位群的有效性[12]。316地黄通过对不同提取部位给药后的血清色谱指纹图的分析比较,初步确定了水溶性高分子部位是地黄的主要有效部位[13]。32对复方的研究321茵陈蒿汤研究表明茵陈蒿汤血中主要移行成分是来源于茵陈的6,7DME,而大黄、栀子的成分在血中未被检出,并通过药效学实验认定6,7DME为茵陈及茵陈蒿汤的药效物质基础。322六味地黄丸研究表明口服六味地黄丸后从血中发现了11个入血成分,其中4个为新产生的代谢产物;7个成分为六味地黄丸体外所含成分的原型,其中有一成分虽为熟地中所含原型成分,但其他2种药材也能代谢产生,对其体内的量变有共同的贡献[14]。323复方安替威胶囊研究表明口服后产生了19个血中移行成分,5个为新产生的代谢产物,14个为原方成分直接入血;通过体外抗SARS病毒实验证实,以这19个血中移行成分为主的有效部位群是复方安替威胶囊药效物质基础[15]。4中药血清药物化学对现代中药研究的实践意义41推动中药血清药理学实验方法的完善中药血清药理学是将中药或复方经口给动物灌服一定时间后,采集动物血液,分离血清,用含药血清进行体外实验的一种方法。经过近20年的实践,有效地带动了中药及复方体外药效学及药理学评价研究的发展,但也逐渐暴露出其自身无法克服的弊端:无法确定最佳给药方案;无法做到体外培养体系内药物浓度与血药浓度相等又不影响组织、细胞生长;药效最佳的采血时间难以确定;血清成分复杂,不可控的影响因素太多,实验结果重复性差;血清本身固有的活性成分影响试验结果,无去除血清影响的理想措施[16]。以上缺点的核心就是,血清药理学的方法仍然属于一种模糊的黑箱式操作,不能明确中药的入血成分,无法确定中药的药效物质基础。因此,血清药理学实验必须结合中药血清药物化学的研究结果,依据给药后入血成分数和量的变化规律,制定合理的给药及采血方案;依据血清色谱指纹图为指导,选择适当的方法去除血清中固有成分及内源性杂质,高度富集入血成分。在进行复方安替威胶囊体外抗SARS病毒实验中,首先建立复方安替威胶囊的血清色谱指纹图,明确了给药后120790第31卷第10期2006年5月中国中药杂志ChinaJournalofChineseMateriaMedicaVol31,Issue10May,2006min时血中移行成分最多且浓度最高,然后利用固相萃取和冷冻干燥技术大量制备了入血成分被高度富集的血清样品之后,用此样品成功地证明了复方安替威胶囊体外抗SARS病毒的作用。为中药复方的血清药理学实验树立了一个成功的典范[17]。42推动中药药代动力学的发展中药药代动力学是借助于动力学原理,研究中药及复方的体内吸收、分布、代谢和排泄的动态变化规律及其体内时量、时效关系的学科。可是中药成分复杂,其药效物质基础尚有待进一步阐明,所以中药药代动力学研究的对象也并不很清楚。以往的研究,大多是在未确定有效成分的前提下,仅以个别成分的药动学特征代表复方的药动学规律,无法反映复方整体的药动学特征。中药血清药物化学是在全面分析中药入血成分的基础上,通过药效相关性实验确定真正的有效成分,并对有效成分的体内动态、代谢及消长规律进行研究,从而阐明整个复方的药动学特征。茵陈蒿汤由茵陈、栀子、大黄3味中药组成,本课题组研究表明,来源于茵陈的6,7DME为茵陈蒿汤的药效物质基础,进而分别研究了全方以及去除大黄、栀子后6,7DME的药代动力学参数,结果表明,复方中某些成分虽未被吸收,但能通过影响主要药效成分的药动学参数来参与整个复方效应过程。此外,即使在血中移行成分结构不清楚的情况下,亦可对体内多种成分进行血中浓度经时变化规律研究,充分反映复方的的整体体内过程的本质。43建立与国际接轨的中药及复方质量标准通过中药血清药物化学研究确定中药体内直接作用物质,以此为指标通过HPLC,GC等手段,建立国际标准化的定性定量方法,从而使中药及复方质量标准化。白术以TEDYA为指标考察其质量,而不是苍术酮及苍术内酯;茵陈蒿虽然含有6,7DME及capillarisine等利胆成分,但以血中移行成分6,7DME为指标进行定量分析才足以说明茵陈蒿的质量,茵陈蒿的复方亦是如此。甘草附子汤,除甘草、附子的主要成分监测外,更重要的是以肉桂中肉桂酸及白术中的TEDYA为指标进行的监测,因为后者为口服后血中移行成分。六味地黄丸在建立血清色谱指纹图的基础上,结合血中移行成分马钱素和丹皮酚的含量测定来共同控制质量[18];复方安替威胶囊在建立血清色谱指纹图基础上,结合血中移行成分绿原酸和黄芩苷的含量测定来控制质量[19];由此而建立的质量监控体系是经得起国际化考验的。44有助于阐明中药复方的配伍机制中药复方是中医临床使用的主要形式,其配伍的科学性和临床的有效性己被世人所公认。但由于组成复杂,造成对其配伍规律的现代研究滞后,且说法不一。中药血清药物化学在全面分析复方入血成分、确定复方药效物质的基础上,通过主要药效成分的体内动态、成分间相互作用及消长规律的研究,能够在一定程度上科学地诠释复方的配伍规律。血清药物化学研究表明茵陈蒿汤主要药效成分6,7DME,配伍大黄后吸收速度加快(提前10min),而消除速度减慢,配伍栀子后血中浓度出现2次峰值,进一步研究表明栀子中的成分geniposide促使6,7DME产生了肠肝循环,从而使AUC加大,药效增强。六味地黄丸给药后血中出现了11个移行成分,其中1号峰成分在六味地黄丸和熟地中含量均很低,但是吸收入血后此成分的相对含量大大提高,其来源于3种生药:熟地中含有此成分直接被吸收入血,而山茱萸和泽泻中虽不含有此成分,但给药后血中也能产生该成分,复方中3种生药对同一入血成分的产生有共同贡献,表明了熟地配伍山茱萸和泽泻的必要性。上述复方配伍规律的研究说明了经典方剂配伍的科学性及实际意义。45促进新药的开发以中药及复方为基础,优化原处方、改善剂型,或是提取、富集其中有效成分开发新药,一直是新药开发的一个重要途径。越橘为民间常用中药,用于急慢性呼吸系统感染的治疗,本课题组在血清药物化学研究的基础上,利用大孔吸附树脂法从越橘药材中定向制备越橘血中移行成分,获得了已知可测成分达70%以上的有效部位群,以此有效部位群为原料的五类新药正在申报中。以再生东北红豆杉茎枝为原料,在其口服后血清色谱指纹图的指导下,定向富集抗肿瘤有效部位群,其中总黄酮、紫杉醇等可测有效成分的含量大于70%,打破了红豆杉药材仅以紫杉醇及紫杉烷类衍生物等微量成分为有效成分的局面。可见,中药血清药物化学为新药开发提供一条快速、准确的捷径。5中药血清药物化学的未来发展中药血清药物化学自诞生以来就显示出了其蓬勃的生机,为以显得凝重的中药及复方研究注入了一针强心剂。在近10年的实践中,取得许多卓越的成绩,有力地推动了中医药现代的脚步。但是,做为一门新兴的应用学科,中药血清药物化学必须从以下几个方面继续完善。51建立中药血清药物化学实验方法的标准化操作规程(SOP)511给药样品成分分析及品质评价建立给药样品的全成分指纹图谱,明确给药样品中所含原型成分,测定主要成分的含量,控制给药样品质量的稳定和均一。512实验动物的选择依据所研究中药所含的成分,从动物对药物作用的选择性角度去考虑,选择与人体代谢行为相同或相似的动物,真正模拟药物的体内过程。513给药方案的确定两种给药方案相结合来进行研究,即传统方式,给药剂量、次数、途径均按照原方药的规定进行折算;现代方式,提高给药剂量连续多次,或以主要成分的稳态浓度为指导,确定给药时限。514采血时间及采血方式的确定末次给药后05~6h791第31卷第10期2006年5月中国中药杂志ChinaJournalofChineseMateriaMedicaVol31,Issue10May,2006
红花龙胆血清药物化学初步研究
红花龙胆血清药物化学初步研究
赵琳珺;罗君;卿娟;武春兰;张丽艳;叶世芸
【摘 要】Objective To explore the bioactive constituents of Gentiana
rhodantha for its serum pharmacochemistry research.Methods The blood
migrating constituents of Gentiana rhodantha were determined by
comparing the HPLC fingerprints of the aqueous extracts,drug contained
serum and blank serum.Results Twenty compounds were detected in drug
contained serum,four among which were original constituents of Gentiana
rhodantha,the rest might be metabolites of the original
ingredients.Conclusion These twenty constituents absorbed in blood could
be the bioactive components of Gentiana rhodantha.Further studies will be
useful to clarify the bioactive constituents and action mechanisms of
Gentiana rhodantha.%目的 研究红花龙胆血清药物化学,探讨红花龙胆药效作用的物质基础.方法 采用血清药物化学研究方法,在建立红花龙胆高效液相色谱(HPLC)指纹图谱的基础上,比较红花龙胆提取物、红花龙胆含药血清、空白血清HPLC指纹图谱差异,确认红花龙胆提取液灌胃后大鼠含药血清的移行成分.结果 在红花龙胆含药血清中发现20个入血成分,4个为原型成分,其余16个可能为原型成分代谢产物.结论 20个入血成分可能是红花龙胆的体内直接作用物质,对其进行深入研究可能有助于阐明红花龙胆的药效物质基础及药效机制.
论何首乌血清药物化学研究的创新与发展
ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ ＭＥＤＩＣＩＮＥ ＡＮＤ ＭＡＴＥＲＩＡ ＭＥＤＩＣＡ ＲＥＳＥＡＲＣＨ ２００９ ＶＯＬ．２０ ＮＯ．２ 时珍国医国药２００９年第２０卷第２期
论何首乌血清药物化学研究的创新与发展
昊晓青，童妍，王兴，闫志勇
（西南交通大学药学院，四川峨嵋６１４２０２）
摘要：探索新的何首乌物质基础研究方法。通过分析现行的何首乌物质基础研究方法的局限性，结合笔者近年来在中 药物质基础研究和中药血清药物化学研究中的体会，提出了用血清药物化学的研究方法进行何首乌物质基础研究并在
研究中引入高效液相色谱一二极管陈列检测器一质谱联用（ＨＰＬＣ—ＤＡＤ—ＭＳ）指纹图谱技术的设想。
关键词：何首乌； 血清药物化学； 高效液相色谱一二极管陈列检测器一质谱联用 中图分类号：Ｒ２８３；Ｒ２—０３ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１００８－０８０５（２００９）０２－０３９１－０１
何首乌为蓼科植物何首乌Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ ｍｕｌｔｉｆｌｏｒｕｍ Ｔｈｕｎｂ．的
干燥块根，是著名的生熟异治的中药，有生首乌和制首乌之分。 生品性平，味甘、苦，归心、肝、大肠经；制品性变温、味转甘，归肝、
肾经。生首乌截疟解毒，润肠通便；制首乌功善补益精血，固肾乌 须ｕ 。目前，对何首乌的化学成分及药效研究较多，但有关的成
分研究大多只限于成分的定性、定量的分析 ，针对药效物质基
础的研究极少。而药效物质基础研究是中药现代化的核心问
题 ，只有在中药物质基础研究成果的基础上，才能有效地进行
相关中药复方产品的二次开发、中药有效部位以及中药有效单体 成分的三个层次的研究开发工作，提高产品的技术壁垒。药效物
质基础的关键，不仅是在体外研究药物的化学成分，其根本在于
要明确药物以何种形式进入体内、进入体内后如何变化，只有这 样我们才能把握中药的内在实质 ，因此采用血清药物化学的
研究方法对何首乌的血中移行成分进行详细分析，阐明何首乌在
体内以何种成分、何种形式发挥作用具有重要意义。 血清药物化学是从含有真正有效成分的血液中分取血清进
中药含药血清制备的思考与探讨
中药含药血清制备的思考与探讨
作者：郭迎超 梁爽 周波
来源：《云南中医中药杂志》2021年第09期
摘要：中药含药血清作为干预手段在中药药理研究体外实验中越来越受到广大科研工作者的重视，并取得一定的进展。科学、严谨、标准的实验设计方案贯穿于整个中药含药血清制备的全过程，直接影响到血清中药物有效成分的含量、活性等，对于模拟中药在体内真实药理活动过程至关重要，也是中药及复方体外实验研究取得成功的关键点。基于课题组在进行中药复方养营活血汤含药血清制备的过程中，查阅相关文献及制备方法，对中药含药血清制备进行详细的梳理，并提出一些见解，以飨同道。
关键词：含药血清;制备方法;研究
中图分类号：R285.5 文献标志码：A 文章编号：1007-2349（2021）09-0051-05
中药含药血清是指根据实验设计的需要用中药（单味或复方）按照一定的剂量、规定的剂型（大多用中药煎汤）和预定的给药次数、给药时间等对特定的动物如大鼠、小鼠、豚鼠和兔等进行灌胃后，选择适宜的采血法在拟定的时间内采集动物的血液并对其进行分离，最后得到的含有药物本身、药物代谢产物、活性成分、杂质成分和一定酸碱度变化等的血清复合物。中药含药血清是用于代替原药物的粗提物作为供试材料进行体外实验的，其可避免中药复方粗提物本身的理化性质等对实验结果的干扰[1]。
1 中药含药血清制备的研究现状
1.1 动物种属的选择 中药含药血清的制备首先要考虑供体动物的选择，不同种属、年龄的动物对药物吸收也不相同，因而造成血药成分、浓度的差异[2]。有报道因药物不同、被采血动物的种属差异及同一种属间的个体差别而获得的含药血清中各种因子含量也不尽相同，并由此在后续的试验中可能会影响到细胞贴壁[3]。所以，欲获得合理可信的实验结果，必须在一开始就有较为合理的实验设计。
关于中药血清药理学方法的再思考
２００８第十卷第六期Ｖ０１．１０Ｎｏ．６
摘要：血清的形成与凝血及其相关过程（纤溶与补体系统活化）的蛋白酶级联反应以及血小板
和白细胞活化有关，这些过程直接影响血标本的组成，并可能也影响中药成分；但这些过程可用抗凝
剂而加以避免。因此，血浆的组成较血清能更好地反映生理、病理状况和吸收进入循环血中药物变化。
根据已有报道，药物浓度与反应物质在血浆与血清中可能存在差异，故倡导在中药半体内实验中采用
血浆药理学方法。由于不同抗凝剂的作用机制各异，究竟哪一抗凝剂适用于哪类半体内实验，需要进
一步开展研究。我们建议在大多数中药半体内实验中，可以采取含药血浆与含药血清平行观察，除非
事先对该试验的干扰已有充分了解。
关键词：中药血清药理学血浆药理学／方法半体内实验
尽管药物的疗效与毒副反应的确定主要依赖整
体（ｉｎｖｉｖｏ）试验，但为阐明药物的药理与毒理作用及
其机制，通常还需借助体外（ｉｎｖｉｔｒｏ）与半体内（ｅｘ
ｖｉｖｏ）实验。血清药理学方法属于半体内实验。关于这
一方法，我们在研究生教材中早已提出异议…。三年前，我们又在《中国药理学通报》上发表了质疑血清
药理学的专文【２】。由于这一问题是关系到中药药理能
否被国际生物医学界广泛认可的重大问题，故从促
进中药药理学科发展出发，根据国内外的新进展，结合我们自己的工作，再次对血清药理学方法进行质
疑，并建议发展血浆药理学方法。
一、采用血标本进行半体内实验的合理性
中药成分复杂，除有效成分外，还含有非有效成
收稿日期：２００８—１０－０６修回日期：２００８一１１一１７分和杂质，甚至毒性成分等。若将中药粗制品直接加
入离体生物反应体系，可能导出假阳性或假阴性或
相反的结果。为解决这一困难，模拟临床常用服药力
式，将中药给动物灌服，而后间隔一定时间，取血静
备血清；以此含有中药成分的血清进行体外实验，世
即血清药理学方法。应当肯定提出这一方法的初褒
是合理的。口服或灌服中药后，进入血流的有效成分大致包括六个来源：①中药天然原形成分；②中药力【
龙眼叶抗氧化活性部位的血清药物化学初步研究
龙眼叶抗氧化活性部位的血清药物化学初步研究
摘要：龙眼也被叫做是桂圆，龙眼叶指的主要是龙眼树当中的一些嫩芽和叶子，龙眼叶具有发表清热、利湿解毒等一系列功效，可以对感冒发热等疾病进行治疗，并且可以抑制葡萄糖普酶活性。从龙眼叶当中可以获得很多有效物质，比如说黄酮，属于一种具有较好效果的体外抗氧化活性。本文对龙眼叶抗氧化活性部位的血清药物化学初步研究，以供参考。
关键词：龙眼叶；抗氧化；活性部位；血清药物；化学研究
2 方法
2.1龙眼叶不同极性部位提取物的制备
清洗药材，并且进行烘干处理，称取其中的640g，通过6倍量95%,50%乙醇进行加热回流处理，每次处理的时间控制在2h，并且对获得的滤液进行合并，最后获得总提取8.56g，剩余的滤液通过回收乙醇后添加一定的纯水，接着加入乙酸乙酷、石油醚、正丁醇等完成萃取的工作，石油醚当中萃取获得5.28g墨绿色浸膏，乙酸乙酷萃取获得22.52g淡黄色粉末，正丁醇萃取获得27.72g橙黄色粉末，水部位萃取获得30.78g橘黄色胶质，另外获得药材粗粉lOg，经过浓缩挥干后获取水煎液提取物。
2.2龙眼叶体外抗氧化活性研究
2.2.1 FRAP法测定龙眼叶不同极性部位总抗氧化能力
对FeS04·7H20标准品的进行配置，保证及浓度符合要求，并且进行标准曲线的绘制，依照总抗压能力测试和当中的相关要求进行测试，并且利用酶标仪在593纳米位置对吸光度值进行读取，并且对各样本的总抗氧化能力进行分析和计算。
2.2.2含药血清的制备
对大鼠进行4天的适应性喂养之后，对10只大鼠进行分类，分为两组，一组为EFD给药组，另外一组为空白组，每组设置5只大鼠，依照相关试验要求对总抗氧化能力最强的EDF进行筛选，并且做出后续的实验操作，对EDF进行称量，获得4克EFD并且加入适量的水配制成大鼠灌胃液。其中给药组依照107(生药量)·kg-1ip(1/3MTD)的给药量，连续服用三天，每天服用的次数为两次，空白组也通过相应的给药量进行蒸馏水的供应。而后对血清进行混合收集，并且通过微孔滤膜进行过滤，让他们保存在零下20度的环境当中备用。
单味中药土茯苓血清药物化学的初步研究
中华中医药杂志（原中国医药学报）２００５年第２０卷第６期
・论著・
单味中药土茯苓血清药物化学的初步研究
唐泓皓王伟刘斌张建军张贵君
（北京中医药大学，北京１０００２９）
摘要：目的：对单味中药土茯苓进行血清药物化学的研究，寻找给药血清中存在的活性
成分。方法：通过ＨＰＬＣ建立指纹图谱，比较分析空白血清、给药血清的差异。结果：多次
重复后，确定了处理血清的方法。给药血清有一明显能在不同条件下重复出现的特征峰，与水提醇沉液的指纹图谱对照后发现在相应保留时间出峰，光谱类似。结论：本实验采用的血
清处理方法发现的特征峰代表的物质极性比较大，该物质可能为原型成分。
关键词：土茯苓；血清药物化学；代谢；指纹图谱
２０００年版药典规定土茯苓（ＴｕｆｕｌｉｎｇＲｈｉｚｏｍａ
ｓｍｉｌａｃｉｓｇｌａｂｒａｅ）为百合科植物光叶菝葜（Ｓｍｉｌａｘ
ｇｌａｂｒａＲｏｘｂ）的干燥根茎。从该药材中提取得到的
化学物质主要有二氢黄酮类、甾醇类、色原酮类、
有机酸类等。但尚未发现关于土茯苓体内代谢过程
的文献报道。故有必要对土茯苓的体内代谢过程进
行研究，寻找有药理活性的原型成分、代谢成分或
内源性物质…。
材料与方法
１．主要材料Ａｇｉｌｅｎｔ１１００ＨＰＬＣ；依利特液相
分离柱，填料：ＨｙｐｅｒｓｉｌＯＤＳ２５斗ｍ，尺寸：４．６ｍｍＸ２５０ｍｍ；ＴＧＬ一１６Ａ台式高速冷冻离心机；土茯苓
药材经北京中医药大学药学院鉴定符合药典规定；
ＳＤ大鼠，北京中医药大学动物中心提供。
２．实验方法
２．１实验一、空白和含药血清的对照
２．１．１土茯苓灌胃药液的制备土茯苓药材
２ｋｇ，晚上浸于１０倍量常水中，第２天加热煮沸１ｈ，药渣再加入８倍量的常水煮沸４５ｍｉｎ，合并药
液浓缩至１８００ｍｌ，加入９５％乙醇，使含醇量达到
６０％。药液挥醇、浓缩至８００ｍｌ，使其浓度为２．５９
生药／ｍｌ，于４℃冰箱保存。２．１．２血清的制备和处理６只ＳＤ大鼠，随
机分为两组，编号１、２、３为空白组；４、５、６为土茯苓组。晚禁食，第２天早晨８点，空白组给
基于中药血清药物化学方法的逍遥散治疗黄褐斑的药效物质基础研究
基于中药血清药物化学方法的逍遥散治疗黄褐斑的药效物质基础研究
张宁;李会娟;祁永华;陈巧云;王喜军
【期刊名称】《世界科学技术-中医药现代化》
【年(卷),期】2010(012)004
【摘 要】目的:利用中药血清药物化学的方法,初步确定逍遥散治疗黄褐斑的药效物质基础及其作用机理.方法:通过建立逍遥散经口给药后大鼠血清色谱指纹图,确定大鼠血中移行成分的生药来源,并以血清色谱指纹图为指导,以血中移行成分来源生药为原料,定向富集制备逍遥散提取物;采用体外培养的小鼠B16黑素瘤细胞株,以熊果苷为阳性对照药,用MTT法、多巴氧化法、NaOH裂解法评价逍遥散提取物对细胞增殖、酪氨酸酶活性和黑素合成的影响,探讨逍遥散治疗黄褐斑的药效物质基础及作用机理.结果:逍遥散经口给药后大鼠血中发现了14个入血成分,其中4个为血中原型成分,10个为原型入血或代谢产物,分别来自于柴胡、当归、白芍、甘草、茯苓.定向制备的逍遥散提取物对B16细胞酪氨酸酶活性和黑素合成有明显的抑制作用,作用强度呈浓度依赖性.结论:逍遥散的血中移行成分具有抑制B16细胞酪氨酸酶活性和黑素合成的作用,是逍遥散治疗黄褐斑的药效物质基础.
【总页数】4页(P643-646)
【作 者】张宁;李会娟;祁永华;陈巧云;王喜军
【作者单位】黑龙江中医药大学,哈尔滨,150040;黑龙江中医药大学,哈尔滨,150040;黑龙江中医药大学,哈尔滨,150040;黑龙江中医药大学,哈尔滨,150040;黑龙江中医药大学,哈尔滨,150040 【正文语种】中 文
【中图分类】R2
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26429403_蒌芍痉挛平颗粒的血清药物化学研究
实验研究
基金项目:福建省科技厅引导性项目(Ｎｏ.２０１９Ｙ００３２)
作者简介:严国鸿ꎬ男ꎬ主任药师ꎬ副教授ꎬ研究方向:药物新剂型及新技术研究ꎬＥ－mail:137****7517＠１６３.ｃｏｍ
通信作者:徐伟ꎬ男ꎬ博士研究生ꎬ教授ꎬ博士生导师ꎬ研究方向:中药化学与活性研究ꎬＴｅｌ:０５９１－２２８６１６９３ꎬＥ－ｍａｉｌ:２００００１７＠ｆｊｔｃｍ.ｅｄｕ.ｃｎ蒌芍痉挛平颗粒的血清药物化学研究
严国鸿１ꎬ２ꎬ蒋昆霞２ꎬ３ꎬ朱美玲２ꎬ３ꎬ王雅心２ꎬ３ꎬ吴蕙２ꎬ３ꎬ徐伟２ꎬ３
(１.福建中医药大学附属人民医院ꎬ福建福州３５０００４ꎻ２.福建中医药大学药学院ꎬ福建福州３５０１２２ꎻ
３.福建中医药大学生物医药研发中心ꎬ福建福州３５０１２２)
摘要:目的 对蒌芍痉挛平颗粒进行血清药物化学成分研究ꎬ研究其入血成分ꎮ方法 通过建立超高效液相
串联飞行时间质谱法(ＵＰＬＣ－Ｑ－ＴＯＦ－ＭＳ)快速鉴定蒌芍痉挛平颗粒经大鼠灌胃给药后吸收入血的化学成分ꎮ超
高效液相串联飞行时间质谱法采用ＷａｔｅｒｓＣＯＲＴＥＣＳＣ１８色谱柱(２.１ｍｍ×１００ｍｍꎬ１.６μｍ)ꎬ以乙腈－０.１％甲酸水为
流动相进行梯度洗脱ꎬ对大鼠灌胃蒌芍痉挛平颗粒后的含药血清进行负离子模式一级分子离子和二级子离子扫
描ꎬ鉴定血中移行成分ꎮ结果 通过比较色谱峰保留时间、对照品或文献质谱一级、二级信息、质谱裂解方式ꎬ共鉴
定了蒌芍痉挛平颗粒３５个吸收入血成分ꎬ主要包括单萜苷类、黄酮类、酚酸类、皂苷类等ꎮ结论 建立的超高效液
相串联飞行时间质谱法鉴定蒌芍痉挛平颗粒血清药物化学成分的分析方法简便、快速、准确ꎬ为揭示院内制剂蒌芍
痉挛平颗粒对体内药效物质基础与制剂开发奠定基础ꎮ
关键词:蒌芍痉挛平颗粒ꎻ血清药物化学ꎻ单萜苷类ꎻ黄酮类ꎻ酚酸类ꎻ皂苷类ꎻ超高效液相串联飞行时间质谱法
中图分类号:Ｒ２８５.５ 文献标识码:Ａ 文章编号:２０９５－５３７５(２０２１)１１－０７０１－００８
中药血清药理学及血清药物化学研究进展
中药血清药理学及血清药物化学研究进展
作者：代启良
来源：《健康之友·下半月》2020年第04期
【摘 要】本文重点整理和分析了最近几年中药血清药理学和血清药物化学研究情况，不仅涵盖了药物血清的制备和药物血清与疗效的关系，而且还包括血清药物化学在提高中药质量控制标准中价值作用。同时，还归纳出血清药物化学和血清药理学在体外药效研究中优缺点，大胆提出了中药血清指纹图谱同微透析取样技术的联合使用，从而有效促进中药血清药理学和血清药物化学的蓬勃发展。
【关键词】中药;血清药理学;血清药物化学
【中图分类号】R285.6 【文献识别码】A 【文章编号】1002-8714（2020）04-0288-01
1 血清药理学与血清药理学研究方法的提出
日本著名药理学家田代真一在20世纪80年代，第一次提出了血清药理学。田代真一认为中药经口服吸收后，需要借助体内胃肠道菌群的代谢和排泄才能充分发挥重要治疗效果。因此，中药和其他复方中存在的生物活性成分都属于中药经过人体生物转化后的产物。当这些产物被人体吸收进入血液以后，将与血浆蛋白结合，顺着血液流向靶器官和组织。所以，传统的体外药效学实验方法，一旦直接将中药水提液直接加入细胞反应体系和离体组织中，其药物生物活性和血清化学成分远不如静脉给药或整体口服药物疗效。
2 血清药理学研究
2.1选择含药血清供体动物
为了取得可靠的实验数据结果，避免和降低动物血清与人类血清在生物、理化等方面的不同，专家学者们需要选择与人类生物学特性非常接近的动物制备含药血清，从而更加真实地模拟人体内部环境。现阶段，家兔和大鼠是常见的实验室动物。在探索菝葜抗炎活性部位时，谢长等人发现健康动物是不能有效诠释病理状态下药物入血活性成分和活性成分代谢过程。相关研究人员需要结合药效试验结果来进一步确定选择模型动物还是健康动物。