免疫检测常用方法与运用秦伟
免疫检测技术的研究和应用
免疫检测技术的研究和应用随着现代生物技术的发展，免疫检测技术受到越来越多的关注和应用。
免疫检测技术是指利用生物学方法来检测和测量特定的生物体分子，如蛋白质、抗体、细胞等。
免疫检测技术广泛应用于医学诊断、生物学研究、环境监测、食品安全等领域，具有灵敏、特异、快速等优点。
目前，免疫检测技术主要有免疫层析、酶联免疫吸附检测（ELISA）、免疫荧光、免疫电泳等几种常见的方法。
其中，ELISA是最为常用的一种免疫检测方法。
它通过将待测物与特异性抗体结合，再通过酶偶联的二抗与该复合物发生化学反应，从而产生信号。
ELISA具有灵敏度高、特异性好的优点，因此被广泛应用于医学诊断、疫苗研发和生物药物监测等领域。
免疫检测技术在医学领域的应用尤为广泛。
例如，在临床医学中，免疫检测技术可以用于探测病原体感染、肿瘤标志物、免疫功能异常等疾病诊断。
通过对患者血清或组织样品中特定抗体或抗原的检测，可以快速、准确地确定疾病的类型和严重程度，有助于合理制定治疗方案。
此外，免疫检测技术还广泛应用于疫苗研发、药物监测与药代动力学研究等领域。
免疫检测技术的应用还涉及到生物学研究领域。
免疫检测技术可以用于研究细胞分子的产生和功能，揭示生物体内的信号传导机制和生命过程。
特定的抗体可以用于检测细胞表面的蛋白质，从而帮助研究人员了解细胞的结构与功能。
此外，免疫检测技术还可以用于蛋白质相互作用的研究，在研究蛋白质相互作用的分子基础和生物学功能方面发挥重要作用。
环境监测是另一个免疫检测技术的重要应用领域。
通过使用特定的抗体可以检测环境中的污染物或致病菌，从而帮助监测和评估环境质量。
例如，通过检测水体中的细菌或有毒物质，可以及早发现并遏制水污染的蔓延。
此外，免疫检测技术还可以应用于食品安全领域，检测食品中的残留物或有害物质，保障人民的食品安全。
总之，免疫检测技术在医学诊断、生物学研究、环境监测和食品安全等领域具有广泛的应用前景。
随着科学技术的不断进步和优化，免疫检测技术将更加灵敏、准确、可靠，为人们的生活和健康提供更多的保障。
免疫检测技术及其应用研究
免疫检测技术及其应用研究免疫检测技术是一种能够检测身体免疫反应、抗原-抗体反应以及细胞表面分子表达和功能等的检测方法。
免疫检测技术在疾病诊断、治疗监测和免疫学研究中扮演着不可或缺的角色。
一、免疫检测技术的分类免疫检测技术包括多种方法，根据不同的原理和应用可以分为以下几种。
1.免疫荧光检测技术：免疫荧光检测技术是通过标记特定的免疫分子（如抗体）和激发它们的荧光来检测免疫分子在样本中的表达以及抗原-抗体结合。
2.酶联免疫吸附测定（ELISA）：ELISA法基于抗原-抗体反应，在试剂盒中直接反应形成可检测的颜色和荧光信号，用于检测分子间特异性的相互作用，如抗原和抗体之间的相互作用。
3.流式细胞术：流式细胞术是一种多参数分析技术，通常用于分析细胞表面分子的表达和功能，可以用于定量细胞表面特异性的抗原-抗体结合，检测细胞内的蛋白表达和功能状态。
4.免疫电泳：免疫电泳是一种将蛋白质或核酸分离并在电泳技术中联合免疫反应进行识别的方法，它是一种在电泳胶上进行免疫染色的方法，主要用于检测血清和组织蛋白的多态性。
5.免疫印迹：免疫印迹是一种通过对蛋白质的空间结构和特异性抗原-抗体结合来检测特定蛋白质表达和活性的方法。
它能够用于病原体的识别和鉴定，以及重组蛋白质的制备和检测等。
二、免疫检测技术的应用免疫检测技术应用广泛，在生命科学研究和临床医学等领域都有很大的应用价值。
1.疾病诊断：免疫检测技术可以用于疾病的早期诊断、疾病的监测和治疗效果的评估，如HIV、乙肝等常见病的检测和诊断。
2.药物开发：免疫检测技术可以用于药物的发现和开发，如用于检测药物分子和靶标分子之间的相互作用，筛选新型药物分子。
3.生命科学研究：免疫检测技术可以用于分子和细胞水平的研究，如研究基因表达、肿瘤细胞、细胞因子等方面。
三、未来发展方向在未来的研究中，我们可以预见到免疫检测技术会继续向着更高级、更精细的方向发展。
具体而言，未来的发展方向包括以下几个方面。
免疫检测技术的新进展与应用
免疫检测技术的新进展与应用随着科技的不断发展和进步，很多原本不容易被察觉的病毒和疾病，如今都可以通过免疫检测技术来进行检测和诊断。
免疫检测技术可以利用人体自身的免疫系统来检测制定特定抗体。
而近年来，免疫检测技术也随着新科技的推动而迅速发展，更加准确和实用化，应用场景也越来越广泛。
一、技术基础免疫检测一般分为两种：直接和间接免疫检测。
直接检测是通过抗原-抗体反应来检测样本中的抗原或抗体。
常用的直接检测有放射免疫测定和酶联免疫吸附测定等。
间接检测则是通过检测抗体反应来推断样本中的抗原或抗体。
常见的间接检测有血凝法、凝集反应法、免疫荧光法等。
二、新技术随着科技不断发展，新型的免疫检测技术也不断出现，例如：1. 免疫层析技术：这是一种基于分子大小层次分离的技术。
常用的免疫层析实现方法有电泳法、吸附法、沉淀法等。
它具有简便、快速、经济等特点，被广泛用于单克隆抗体的制备以及药物分离纯化等。
2. 贡献基因工程技术：基因工程技术使得免疫检测的敏感度和特异性大大提高。
例如，通过重组DNA技术，可以生产出高亲和力的单克隆抗体，用于检测非常低浓度的分子和病原体。
3. 电化学免疫传感技术：这是一种基于电化学特性的检测技术。
与传统的免疫检测方法相比，电化学免疫传感技术具有快速、简便、高效等特点。
这是一种高灵敏度、高稳定性的检测技术，已经广泛应用于多种疾病的诊断和病原体的检测。
4. 快速免疫检测技术：这是一种快速鉴定病原体的技术，常用于外出野营、医学急救和实验室诊断等场合。
快速免疫检测技术需要简单设备和操作步骤，而且使用速度很快，一般不需要特殊的专业培训和设备。
三、新应用免疫检测技术的应用场景越来越广泛，除了传统的医学领域外，应用范围也涵盖了很多其他领域。
例如：1. 食品安全检测：食品中可能存在一些致病菌，如沙门氏菌等，通过对食品中的致病菌进行免疫检测，可以及时预防和控制食物中毒的发生。
2. 农业养殖：农业养殖中病毒的侵蚀，会带来无法计量的经济损失。
测免疫功能
测免疫功能免疫功能是人体的一项重要功能，它与人体的健康密切相关。
当免疫功能受损时，人体容易受到疾病的侵袭，病程也更加严重。
因此，对于免疫功能的测定非常重要，可以帮助医生及时了解免疫状况，采取相应的措施。
测免疫功能的方法有很多，常见的方法有免疫球蛋白测定、淋巴细胞亚群分析和免疫功能评估等。
免疫球蛋白测定是一种常见的测免疫功能的方法。
免疫球蛋白是人体免疫系统中非常重要的成分，可以帮助抵御感染。
通过检测血液中的免疫球蛋白水平，可以了解患者的免疫状况。
正常情况下，免疫球蛋白的水平是相对稳定的，如果免疫球蛋白过低或过高，都可能表示免疫功能异常。
通过测定免疫球蛋白水平，医生可以判断患者的免疫功能是否正常，以及是否存在免疫缺陷病等疾病。
淋巴细胞亚群分析是一种通过测定不同类型的淋巴细胞在血液中的比例来评估免疫功能的方法。
淋巴细胞是人体免疫系统中的主要细胞类型，不同类型的淋巴细胞具有不同的功能。
通过测定血液中各种淋巴细胞的比例，可以了解人体的免疫功能是否正常。
例如，CD4+T淋巴细胞是免疫应答的调节细胞，CD8+T淋巴细胞是杀伤病原体的细胞。
通过测定CD4+/CD8+比值，可以判断人体的免疫功能是否平衡。
如果CD4+/CD8+比值过低，可能表示免疫功能低下。
除了免疫球蛋白测定和淋巴细胞亚群分析外，还有一种综合评估免疫功能的方法，即免疫功能评估。
免疫功能评估是通过综合评估多个指标来判断免疫功能的状态。
常用的评估指标包括免疫球蛋白水平、淋巴细胞数目、B淋巴细胞活性等。
通过对这些指标的综合分析，可以评估患者的免疫功能是否正常。
免疫功能评估可以帮助医生明确诊断，制定合理的治疗方案。
总之，测免疫功能对于保护人体健康非常重要。
通过测定免疫球蛋白水平、淋巴细胞亚群分析和免疫功能评估等方法，可以判断人体的免疫功能是否正常。
及时了解和干预免疫功能异常，有助于预防和治疗疾病，保护人体健康。
因此，建议人们在医生的指导下进行免疫功能的测定，以保持身体的健康。
免疫学检测技术及应用概述
免疫学检测技术及应用概述免疫学检测技术的原理是利用机体产生的特异性抗体与抗原之间的特异性结合反应。
当机体感染病原体或注射外源性抗原后，免疫系统将识别并生成相应的抗体。
免疫学检测技术通过将已知的抗原与待测物进行结合，利用特异性抗体识别和测定待测物的存在与含量。
常见的免疫学检测技术包括免疫荧光、酶联免疫吸附法（ELISA）、放射免疫分析法（RIA）、免疫电泳、免疫印迹等。
其中，免疫荧光是一种通过将荧光标记的抗体与待检测物结合后，利用荧光显微镜观察来检测抗原或抗体的存在。
ELISA是一种通过将待检测物与酶标记的抗体结合，再利用底物与酶反应来产生颜色变化，通过光密度计读取颜色变化程度来测定待检测物的含量。
RIA则是通过将放射性同位素标记的抗体与待检测物结合，再通过放射性测定来确定待测物的含量。
免疫学检测技术在临床诊断中被广泛应用。
例如，通过检测病毒或细菌感染所产生的特异性抗体，可以确定患者是否感染此病原体。
免疫学检测还广泛用于肿瘤标志物的检测，根据肿瘤细胞产生的特异性抗原来判断肿瘤的存在与发展程度。
此外，免疫学检测还可用于血型鉴定、妊娠检测、自身免疫性疾病等多个方面的诊断。
免疫学检测技术在生物学研究中也发挥着重要作用。
例如，在分子生物学研究中，通过检测特定的抗体可以确定蛋白质的表达和定位，从而理解其功能。
免疫学检测还可以用于研究免疫系统的功能和异常情况，为疾病的治疗和预防提供参考。
在药物研发中，免疫学检测技术可以用于药物的安全性和有效性评估。
例如，通过检测特定抗体的产生，可以评估疫苗的免疫效果。
免疫学检测技术还可以用于药物代谢和药物动力学研究，为药物的合理应用提供依据。
总之，免疫学检测技术是一项重要的分析和检测技术，广泛应用于临床诊断、生物学研究和药物研发等领域。
随着技术的不断发展，免疫学检测技术将继续发挥其在疾病诊断、药物研发和生物学研究中的重要作用。
常用的免疫学检测方法
常用的免疫学检测方法
免疫学检测方法在医学和生物学领域可是超级重要的呀！它就像是一把神奇的钥匙，能打开了解免疫系统和疾病的大门。
先来说说酶联免疫吸附试验吧，这可是常用的免疫学检测方法之一呢！步骤就是先将抗原或抗体固定在固相载体上，然后加入待检测的样本，接着加入酶标记的抗体或抗原，经过一系列孵育和洗涤后，加入底物显色，通过检测颜色的变化来确定样本中是否存在目标物质。
哇塞，听起来是不是有点复杂？但其实只要按照步骤来，还是很容易操作的呢！在操作过程中，要注意保持实验环境的清洁，严格按照说明书来配制试剂，可不能马虎哦！
再说说这个过程的安全性和稳定性吧。
一般来说，只要操作规范，安全性是有保障的。
而且这些方法经过了长期的实践和验证，稳定性也是杠杠的呀！就像一座坚固的城堡，稳稳地矗立在那里。
那它都有哪些应用场景和优势呢？这可多啦！可以用于疾病的诊断，比如检测传染病、自身免疫性疾病等。
还可以用于药物研发、食品安全检测等领域。
它的优势在于灵敏度高、特异性强、操作相对简单，而且可以同时检测大量样本，效率很高哦！这就好比是一个高效的小助手，能快速准确地帮我们解决问题。
给你们讲个实际案例吧。
在新冠疫情期间，免疫学检测方法就发挥了巨大的作用呀！通过检测患者体内的抗体，可以快速判断是否感染过新冠病毒，为疫情防控提供了重要的依据。
这效果，简直太赞了吧！
总之，常用的免疫学检测方法真的是非常重要且实用的呀！它们就像是免疫系统的侦探，能帮助我们了解身体的状况，为健康保驾护航！。
免疫检测技术-
Ab
No Ab
Ag
三、补体结合实验
（2个系统, 5种成分）
免疫标记技术是采用酶、荧光素、放射性核素等标记物标记抗原或抗体所进行的抗原抗体反应。 免疫标记技术既可对样品作定性、定量检测, 也可进行定位分析, 且大大提高了方法的灵敏度, 是目前应用最广泛的免疫学检测技术。
四、免疫标记技术
常见标记免疫技术
3 竞争法测定抗原
血清标本中的IgM包括针对抗原的特异性IgM抗体和非特异性的IgM 加入特异性抗原试剂: 它只与固相上的特异性IgM结合 抗人IgM抗体包被 加入血清标本 加入特异性抗原试剂 加入针对特异性抗原的酶标抗体 加底物显色
4 捕获包被法测IgM抗体
酶标
荧光
放免
发光
有效期（月）
18 15 12 9 6 3 0
0
20,000
40,000
60,000
80,000
100,000
试剂盒
仪器
特殊防护
治理污染
人民币
人民币
三种免疫测定技术的成本及费用
三种免疫测定技术的成本及费用
放免
酶标
发光
A. 将Ab吸附在固相载体表面; B. 加入酶标Ag和待测Ag, 竞争结合Ab； 对照只加入酶标Ag； C. 加底物。对照孔与样品孔底物降解量的差＝未知Ag量。
免疫检测技术在生物科学领域中的应用:
第一节 抗原抗体反应原理
抗体能特异性地识别相应的抗原, 并与之结合。这种 结合在体外也能发生, 当抗原和抗体在体外特异性结合后 可出现肉眼可见或借助仪器可检测出的反应现象。 试验时既可用已知抗体检测标本中有无相应抗原, 也可用已知抗原检测标本中有无相应抗体。
3. 免疫酶测定法
免疫检测技术及其在诊断和治疗中的应用
免疫检测技术及其在诊断和治疗中的应用随着现代医学的迅猛发展，越来越多的疾病被发现并且被研究。
有些疾病可能症状不明显，需要进行检测才能发现，并且部分疾病需要长期监测和治疗。
随着免疫学的不断进步，免疫检测技术也在不断完善，越来越多的疾病可以通过免疫检测技术进行诊断和治疗。
这篇文章将介绍免疫检测技术及其在诊断和治疗中的应用。
一、免疫检测技术是什么？免疫检测技术，也称为免疫诊断技术，是指利用机体免疫系统的反应特异性来检测和诊断疾病的一类检测技术。
免疫检测技术可以通过检测机体中特定的生物标志物，如抗体、抗原、细胞因子、肿瘤标志物等来诊断疾病。
常见的免疫检测方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫荧光技术、放射免疫测定术、免疫印迹技术等。
二、免疫检测技术的应用1、诊断感染性疾病免疫检测技术在感染性疾病的诊断中起着重要的作用。
常见的检测方法包括检测特定病原体的抗体和抗原，如乙肝病毒表面抗原(HBsAg)、丙肝病毒核心抗体(HBcAb)等，这些标志物的检测可以帮助诊断病毒感染。
糖尿病人士需要终身定期检测血糖浓度和尿糖，防止糖尿病恶化，免疫检测技术对于糖尿病的筛查和诊断也具有重要的意义。
2、诊断自身免疫性疾病免疫检测技术对自身免疫性疾病的诊断也具有重要的作用。
自身免疫性疾病是由机体免疫系统异常攻击自身组织和细胞所导致的疾病。
通过检测血液中的抗体和自身抗原可以帮助早期诊断多种自身免疫性疾病。
例如风湿性关节炎、全身性红斑狼疮、硬皮病等。
3、肿瘤诊断和治疗监测免疫检测技术是肿瘤诊断和治疗监测中非常重要的方法。
通过检测肿瘤标志物，可以帮助早期发现肿瘤，从而采取更加有效的治疗方式。
同时，免疫检测技术还可以用于肿瘤治疗的监测。
如癌症患者经过放化疗后，检测肿瘤标志物的水平可以帮助判断治疗是否有效。
4、移植排异反应的检测移植是治疗器官或组织失效的常见方法。
移植病人需要长期使用免疫抑制药物来避免移植排斥反应，然而使用免疫抑制药物会增加感染和肿瘤的风险。
检验科常见免疫性疾病检测方法介绍
检验科常见免疫性疾病检测方法介绍免疫性疾病是指由于机体免疫系统异常引起的疾病，包括自身免疫性疾病和变态反应性疾病。
针对这类疾病，我们通常需要进行免疫性疾病的检测。
本文将介绍检验科常见的免疫性疾病检测方法。
一、自身免疫性疾病的检测方法自身免疫性疾病是机体免疫系统异常攻击自身正常组织和器官引起的疾病。
常见的自身免疫性疾病包括类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、糖尿病等。
为了准确诊断和治疗这些疾病，以下是常见的自身免疫性疾病检测方法：1. 免疫荧光法免疫荧光法是一种检测抗体和抗原结合的方法。
通过将待检材料与已知标记有荧光染料的抗体结合，观察荧光信号的出现来确定是否存在特定的抗体。
在自身免疫性疾病的检测中，免疫荧光法常用于检测抗核抗体、抗线粒体抗体等。
2. 酶联免疫吸附试验（ELISA）酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked Immunosorbent Assay，ELISA）是一种通过酶标记的抗体与待检物质发生特异性反应，并通过酶的催化作用使显色物质呈色的方法。
ELISA常用于检测自身免疫性疾病相关的抗体，例如类风湿因子等。
3. 免疫固相化学发光法（CLIA）免疫固相化学发光法（Chemiluminescent Immunoassay，CLIA）是利用化学发光技术检测待检物质的方法。
通过将待检材料与特异性抗体结合并激发化学物质的发光反应，可以测定免疫分析物的含量。
在自身免疫性疾病的检测中，CLIA可以用于检测抗体、免疫球蛋白、自身抗体等。
二、变态反应性疾病的检测方法变态反应性疾病是机体对特定的抗原产生过敏反应，引起一系列疾病症状。
常见的变态反应性疾病包括过敏性鼻炎、哮喘、荨麻疹等。
以下是变态反应性疾病的常见检测方法：1. 无刺激试验无刺激试验是通过皮肤接触或口服等方式将可能引起过敏反应的物质与机体接触，观察机体发生的过敏反应。
无刺激试验常用于检测常见的变态反应性疾病，如过敏性鼻炎和食物过敏等。
2. 免疫界定试验（RAST）免疫界定试验（Radio Allergo Sorbent Test，RAST）是一种通过血清检测特定抗原特异性IgE抗体水平的方法。
临床分析中的免疫球蛋白检测方法及其在自身免疫性疾病诊断中的应用
临床分析中的免疫球蛋白检测方法及其在自身免疫性疾病诊断中的应用在临床分析中，免疫球蛋白检测起着重要的作用。
本文将介绍免疫球蛋白检测的方法及其在自身免疫性疾病诊断中的应用。
一、免疫球蛋白检测的方法免疫球蛋白检测主要有以下几种方法：1. 封闭性免疫荧光法封闭性免疫荧光法是一种常用的免疫球蛋白检测方法。
它通过使用特定的抗体结合荧光染料使抗体与免疫球蛋白结合，然后观察标记物的荧光信号来检测免疫球蛋白的存在。
这种方法具有高灵敏度和高特异性，能够准确地检测各种免疫球蛋白的水平。
2. 酶联免疫吸附试验法酶联免疫吸附试验法（ELISA）利用酶的底物与抗体结合形成底物-抗体复合物，然后用底物的酶活性来检测免疫球蛋白的存在。
ELISA 方法操作简单，结果准确可靠，广泛应用于临床诊断中。
3. 免疫电泳法免疫电泳法是一种基于电泳原理的免疫球蛋白检测方法。
它将样品中的免疫球蛋白进行电泳分离，然后使用特定的抗体来反应，通过观察电泳带上的条带来检测和定量免疫球蛋白。
这种方法对于某些特定类型的免疫球蛋白具有较高的分辨率和敏感性。
二、免疫球蛋白检测在自身免疫性疾病诊断中的应用免疫球蛋白检测在自身免疫性疾病的诊断中起着重要的作用。
以下是几种常见的自身免疫性疾病及其免疫球蛋白检测的应用：1. 类风湿性关节炎免疫球蛋白检测可用于类风湿因子（RF）的检测。
RF是类风湿性关节炎的标志性自身抗体，其存在与疾病的活跃度和关节损害程度密切相关。
通过检测RF水平可以帮助医生判断疾病的活跃度和预后，从而指导治疗方案的选择。
2. 系统性红斑狼疮系统性红斑狼疮是一种自身免疫性疾病，免疫球蛋白的检测在其诊断和鉴别诊断中起着重要作用。
抗核抗体（ANA）和双链DNA抗体（ds-DNA）等特异性抗体的检测可以帮助病情评估和疾病活动监测。
3. 类天疱疮类天疱疮是一种自身免疫性皮肤病，免疫球蛋白的检测可用于天疱疮脱落液用蛋白酶分析（DIF）和间接免疫荧光试验（IIFT）的辅助诊断。
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ELISA—竞争法
ELISA—竞争法
最常见的应用： 乙肝HBeAb、 HBcAb检测
ELISA—捕获法
（1）将抗人 IgM 抗体（抗人 IgM µ 链抗体）连接在固 相载体上，形成固相抗人 IgM。
（2）加入标本， IgM 抗体被固相抗体捕获。洗涤除去其 他抗体。
（3）加入特异性抗原试剂，它只与固相上的特异性 IgM 结合，洗涤。
固相膜免疫测定
利用微孔膜（主要是醋酸纤维素膜）作为固相进 行免疫检测的方法
根据标记物的不同分为两类： 酶标固相膜免疫测定：
酶免疫斑点法 酶免疫印迹法 金标法： 胶体金斑点渗滤试验 胶体金免疫层析试验
正向间接凝集反应 —MP-Ab试验
正向间接凝集反应 —MP-Ab试验
检测肺炎支原体的总抗体（IgM, IgA IgG)
以滴度的方式报告检测结果（<1:80 1:80、1：160、1:320 ……)
反向间接凝集反应
用已知特异性抗体致敏载体以检测标 本中的相应抗原。
抗人球蛋白试验 （Coombs试验）
（4）加入针对特异性抗原的酶标抗体，形成固相二抗 — IgM抗体—抗原 —酶标抗体复合物。
（5）加底物显色，如有颜色显示，则表示血清标本中的 特异性 IgM 抗体存在，是为阳性反应。
ELISA—捕获法
以优生四项IgM抗体检测为例
ELISA—捕获法
甲肝IgM抗体测定
ELISA总结
酶免疫测定具有高度的敏感性和特异性， 几乎所有的可溶性抗原抗体系统均可用以 检测。它的最小可测值达 ng 甚至 pg 水平。 酶免疫测定标记试剂比较稳定，且无放射 性危害。因此，酶免疫测定的应用日新月 异，酶免疫测定的新方法、新技术不断发 展。
酶联免疫吸附试验 （ELISA）
① 使抗原或抗体结合到某种固相载体表面， 并保持其免疫活性。
② 使抗原或抗体与酶连接成酶标抗原或抗 体，且既保留其免疫活性又保留酶的活性。
③ 标本中的抗原或抗体、酶标抗原或抗体 按一定的次序与固相载体表面的抗体或抗 原反应，并通过底物与酶的反应来反映标 本中的抗原或抗体的量。
抗人球蛋白抗体参与的间接血凝试验， 用于检测抗红细胞不完全抗体
分类： 直接Coombs试验 间接Coombs试验
直接Coombs试验
间接Coombs试验
凝集反应总结
一、直接凝集反应 血型鉴定 二、间接凝集反应
胶乳凝集试验 ASO/RF 1正向间接凝集反应 RPP/TRUST
明胶颗粒凝集 TPPA/MP 2反向间接凝集反应 三、抗人球蛋白试验 直接/间接Coombs试验
免疫检测常用方法及应用
免疫学检测方法是应用免疫学理论设 计的一系列测定抗原、抗体、补体、 细胞因子等免疫相关物质及微量物质 如激素、酶、血浆微量蛋白、血液药 物浓度、微量元素、毒品等试验方法。
这些方法所具有的特异性好、敏感性 高、简单、快速和稳定的特点为临床 上确定诊断、分析病情、调整治疗方 案和判断预后等提供有效的实验依据， 使它们在临床的应用进一步普及和推 广。
正向间接凝集反应 —TRUST试验
正向间接凝集反应 —明胶颗粒凝集试验
所用载体为人工合成的惰性明胶颗粒 梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA） 肺炎支原体抗体检测（MP-Ab）
正向间接凝集反应 —TPPA试验
正向间接凝集反应 —TPPA试验
正向间接凝集反应 —MP-Ab试验
正向间接凝集反应 —MP-Ab试验
将溶血素O 吸附在羧化的聚苯乙烯胶乳颗 粒上检测抗”O”。
将变性IgG包被于羧化的聚苯乙烯胶乳颗粒 上检测RF。
正向间接凝集反应 —RPR/TRUST试验
血浆反应素试验(RPR) 所用载体颗粒为活性炭颗粒
甲苯胺红不加热血清反应素试验 （TRUST） 所用载体颗粒为甲苯胺红颗粒
正向间接凝集反应 —RPR试验Fra bibliotek 直接凝集反应
颗粒性抗原(细菌、细胞等)与相应的抗 体在有适量电解质存在下，形成肉眼 可见的凝集小块。
常见的应用是血型的鉴定
血型鉴定示意图
间接凝集反应
将可溶性抗原（或抗体）先吸附于适当大 小颗粒性载体的表面，然后与相应抗体 （或抗原）作用，在适宜的电解质存在的 条件下，出现特异性凝集的现象称间接凝 集反应（indirectagglutination）或被动 凝集反应（assiveagglutination）。
酶联免疫吸附剂试验
酶联免疫吸附试验
双抗体夹心法 双抗原夹心法 间接法 竞争法 捕获法测 IgM 抗体
ELISA—双抗体夹心法
用特异性抗体进行包被和制备酶标抗 体，以检测相应的抗原。
乙肝标志物中HBsAg、 HBeAg的检测 常采用本法
ELISA—双抗体夹心法
ELISA—双抗体夹心法
凝集反应(agglutination)
颗粒性抗原(细菌、细胞等)与相应的抗 体，或可溶性抗原(亦可用抗体)吸附于 与免疫无关的载体形成致敏颗粒与相 应的抗体(或抗原)，在有适量电解质存 在下，形成肉眼可见的凝集小块。
凝集反应的分类
直接凝集反应 间接凝集反应 抗人球蛋白试验（Coombs试验）
间接凝集反应
常用的载体微球有人O型血红细胞、绵羊或 家兔红细胞、聚苯乙烯乳胶、活性炭/甲苯 胺红、明胶颗粒等
间接凝集反应
正向间接凝集反应 反向间接凝集反应
正向间接凝集反应
用抗原致敏载体以检测标本中的相应 抗体
正向间接凝集反应 —胶乳凝集试验
所用载体颗粒为羧化的聚苯乙烯胶乳，是 一种直径约为0.8μm大小的圆形颗粒，带 有负电荷，可物理性吸附蛋白分子。
ELISA—双抗原夹心法
用特异性抗原进行包被和制备酶结合 物，以检测相应的抗体。
抗HBs的检测 抗HCV的检测 抗HIV的检测
ELISA—双抗原夹心法
ELISA—竞争法
标本中的抗体和一定量的酶标抗体竞争与 固相抗原结合。如受检标本中无抗体，则 酶标抗体能顺利地与固相抗原结合。加入 酶标抗原后就显色深。如受检标本中含有 抗体，则与酶标抗体以同样的机会与固相 抗原结合，竞争性地占去了酶标抗体与固 相抗原结合的机会，使酶标抗原与固相载 体的结合量减少。加入酶标抗原后就显色 浅或不显色。