2015.11产前诊断实验室技术
产前筛查产前诊断新知识新技术学习课件
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医患双方在产前筛查专用登记本上签字医院
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留存并在门诊病历上做好记录由孕妇或其他
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家属写明意见并亲笔签名
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定期常规产前检查
妊娠结局随防
产前筛查结果解释与临床处理
• 对筛查结果为21-三体、18-三体高风险的孕妇，医生应告知其结果只说明胎儿患有这两种先天异常的可能性大，但不 是确诊。建议其行羊水或脐血染色体核型分析，以排除染色体病
产前筛查
• 目前产前筛查、产前诊断的主要疾病种类与对象： • １．唐氏综合征 • ２．神经管缺陷 • ３．地中海贫血 • 筛查对象：所有３５岁以下孕１５－２０周的一般孕妇;有产前诊断指征的孕妇建议直接行产前诊断．
产前筛查
• 对要做产前诊断的孕妇必须： • １．详细询问孕妇的年龄．末次月经．体重．是否有胰岛素依赖性糖尿病． • ２．是否为多胎妊娠．是否吸烟．异常妊娠史．前胎是否是２１三体．１８三体等． • ３．必须使筛查者清楚筛查的局限性，在此基础上要求孕妇签署知情同意书．
产前诊断的疾病
• 1、染色体病：包括染色体数目和结约异常： • 2、性连锁遗传病：包括以X连锁隐性遗传病居多如红绿 色盲、血友病等； • 3、遗传性代谢缺陷病：如苯丙酮尿症、肝豆核变性； • 4、先天畸形特点是有明显结构改变如无脑儿、脊柱裂、唇腭裂、先心等。
产诊断的常用方法
• 一、观察胎儿结构 • B超： • 1、10—14周胎儿结构初筛，测NT值 • 2、22--26周三维系统彩超产前诊断 • 3、32--34周复查了解胎儿生长发育情况 • X线检查、胎儿镜、磁共振成像 • 二、染色体核型分析 • 绒毛采样检查：宜在孕8--11周进行 • 羊水穿刺：宜在孕16--22周进行（18--23） • 脐血穿刺：宜在孕18--24周进行（区医院大于24周也做）
《产前筛查与诊断讲》
标志物
MoM值
水平
AFP
0.7-0.8
↓
uE3
0.6
↓
HCG
1.8
↑
截断点：1：270
检出率：67%患儿
假阳率：5%
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超声波检查在胎儿畸形 产前筛查中有重要作用
长期高分辨率超声波 图像可进一步提供 胎儿解剖学信息
1次妊娠建议至少 3次超声检查
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建议3次超声检查时间
孕18—22周：最佳检出期，查大多畸形。 孕32—34周：查出部分畸形 孕38—39周：再次确认有无畸形，监测
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5、出生缺陷的预防
二级预防: 实施“产前诊断管理办法”， 建立全国性产前诊 断网络，实现产前筛 查诊断的有机结合。
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5、出生缺陷的预防
三级预防: 使出生缺陷及时得到治疗和 控制，开展新生儿和婴幼儿体系体检 。
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6、 遗传筛查的主要病种
唐氏综合症（21-三体综合征） 神经管畸形 爱德华氏综合症（18-三体综合征）
感染的孕妇者； 医生认为应做咨询和产前诊断者
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1、遗传筛查genetic screen ———产前筛查
产前筛查：通过经济、简便和无创伤的 检测方法，从孕妇中发现怀有某些先天 缺陷儿的高危孕妇，以便进一步明确诊 断，最大限度地减少异常胎儿的出生率 。目前所说的产前筛查通常是指通过母 血清标志物的检测来发现怀有先天缺陷 胎儿的高危孕妇。
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7、 筛查≠确诊
产前诊断本着自愿参加的原则，由医务 人员指导您开展产前保健。可能出现假 阳性和假阴性
对于高危孕妇最后确诊还需要做羊水穿 刺，行羊水染色体检查
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常用的产前诊断技术
羊膜腔穿刺术：最常用的侵袭性产前诊断技术， 在孕16-20周左右经腹抽取羊水，进行胎儿细 胞染色体核型分析，及酶学检测，从而对胎儿 的染色体病和代谢性遗传病作出诊断。
各种产前诊断高中生物教案
各种产前诊断高中生物教案教学目标：1. 了解产前诊断的概念和重要性；2. 掌握不同种类的产前诊断技术；3. 理解产前诊断对胎儿健康和家庭幸福的重要性。
教学重点：1. 产前诊断的定义和作用；2. 不同种类的产前诊断技术；3. 产前诊断的伦理道德问题。
教学难点：1. 核酸检测技术的原理和应用；2. 非侵入性产前诊断技术的优缺点；3. 如何平衡产前诊断的伦理道德问题。
教学内容：一、产前诊断的概念和作用1. 产前诊断的定义；2. 产前诊断的作用和意义。
二、不同种类的产前诊断技术1. 羊水穿刺术；2. 绒毛取样术；3. 脐血取样术；4. 非侵入性产前诊断技术。
三、产前诊断的伦理道德问题1. 产前诊断对胎儿健康和家庭幸福的影响；2. 如何平衡产前诊断的伦理道德问题。
教学方法：1. 案例分析：通过案例分析的方式让学生了解产前诊断的具体应用和意义；2. 实验演示：展示不同种类的产前诊断技术，让学生亲身体验；3. 小组讨论：让学生分组讨论产前诊断的伦理道德问题，促进思维碰撞和思考。
教学过程：1. 导入：介绍产前诊断的概念和作用，引起学生的兴趣；2. 学习：分组学习不同种类的产前诊断技术，掌握原理和应用；3. 实践：进行实验演示，让学生亲自操作产前诊断技术；4. 讨论：开展小组讨论，讨论产前诊断的伦理道德问题，引导学生思考。
教学总结：通过本节课的学习，希望学生能够理解产前诊断的重要性，并能够掌握不同种类的产前诊断技术，以及了解产前诊断的伦理道德问题。
产前诊断能够保障胎儿的健康和促进家庭幸福，因此我们应该正确看待和使用产前诊断技术。
产前诊断PPT课件
• 三类检查方法的五个水平:
• 形态学 • 染色体链 • 酶学 • 代谢产物 • 基因水平。
•三
先天畸形的分类
• 整胚发育畸形：早期死亡吸收或自然流产 • 胚胎局部发育畸形：头面发育不全、并肢畸形等。 • 器官和器官局部畸形：双侧或单侧肺不发生、室间隔膜部缺损 组织分化不良性畸形：骨发育不全、克汀病、巨结肠等。 • 发育过度性畸形：卵圆孔闭合或狭窄、多指（趾）畸形等。 • 吸收不全性畸形：蹼状指（趾）、不通肛、食管闭锁等。 • 超数和异位发生性畸形：如多孔乳腺、异位乳腺、双肾盂双输 尿管等。 • 发育滞留性畸形：双角子宫、隐睾、骨盆肾、气管食管瘘等。 • 重复畸形：单卵孪生的两个胎儿未能完全分离 • 寄生畸形：
4.2.2 诊断方法：
• 早期绒毛直接制片、羊水细胞培养、孕妇血及 胎儿血细胞等进行染色体核型分析，即可明确 诊断。有条件单位，可用DNA重组、DNA基因扩 增（PCR）、基因分析等新技术诊断。
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2019/4/1
4.3 代谢性遗传疾病的产前诊断
• 代谢性遗传病是由于染色体上的基因发生突变， 造成酶的缺失或异常，由原基因控制的某种酶的催 化过程不能正常进行，代谢过程发生紊乱和破坏， 造成一些物质缺乏，另一些物质大量堆积，从而影 响胎儿的代谢和发育。目前已发现1000多种病，多 数常染色体隐性遗传，少数为X连锁隐性遗传及常 染色体显性遗传。
• 4.1 神经管缺陷的产前诊断 • 神经管缺陷（NTD）是指胎儿期神经管闭合 障碍或闭合后因其它原因再度穿孔所致的一组中 枢神经系统畸形，包括无脑畸形、开放脊柱裂及 脑膨出等。我国NTD的发生率为0.66～10.53‰， 平均为2.74‰，在我国出生缺陷顺位中占第一位， 国家已列为重点研究课题。
产前诊断知识手册
大同市第一人民医院产前诊断中心简介大同市第一人民医院产前诊断中心为山西省在同朔地区首批批准成立的产前诊断中心，以妇产科为主干学科，联合超声科，检验科，儿科等多个相关科室共同成立产前诊断中心，形成多学科优势互补，不但为患者提供了专业的生育指导，而且集成了多种新的产前诊断技术，（羊膜腔穿刺）长期开展出生缺陷疾病的产前咨询，将来有望在遗传病检查，胎儿产前诊断和治疗方面有进一步的发展。
产前诊断中心拟开展技术有：羊膜腔穿刺，开展的检查项目包括唐氏筛查，无创性基因检测，细胞核型分析等产前筛查和诊断技术。
在胎儿影像学产前检查方面，近年集中开展了早孕期（11-13+6）NT监测，孕中期（18-24周）胎儿系统超声产前检查，可对胎儿心脏系统，神经系统，呼吸系统，泌尿系统，消化系统，骨骼系统，颜面等器官和系统畸形经行产前筛查和诊断。
产前诊断中心专家介绍王慧清，副主任医师，大同市第一人民医院产科主任，现任中华医学会妇产分会。
山西省薛珍春，副主任医师池樱，副主任医师贾海珍，副主任医师产前诊断对象（一）血清学产前筛查：目前用于临床的血清学产前筛查主要是唐氏筛查，其将MSAFP、UE3、F-βHCG联合起来用于唐氏综合症的胎儿筛查，又称三联筛查，其检出率为60%-80%，其筛查结果可能会受以下因素影响：①孕妇体重：由于稀释作用使AFP,UE3，HCG水平降低。
②种族差异：不同种族标志物水平不同。
③母亲吸烟：AFP高3%，HCG 低3%,UE3低23%。
④IVF孕妇：HCG升高而AFP降低。
⑤孕龄：不同孕龄标志物水平变化较大，因此它仅能用于唐氏综合征的筛查，而最终确诊需要羊水或脐血染色体检查。
（二）无创产前基因检测：是通过基因测序技术，直接检测母体血浆中游离的胎儿DNA序列，通过序列对比将这些染色体片段精确定位到每个染色体上，比较孕妇外周血中游离胎儿DNA量差异的关系，从而经行无创性产前诊断21-三体综合征，18-三体综合征，13-三体综合征。
最新开展产前诊断技术ppt课件
• 开展产前诊断技术医疗保健机构的网络和 职责
• 开展产前诊断技术医疗保健机构的基本准 入
• 从事产前诊断技术卫生技术人员的基本准 入标准
• 遗传咨询技术规范 • ２１三体综合征和神经管缺陷产前筛查技
术规范 • 超声产前技术规范 • 胎儿染色体核型分析技术规范
开展产前诊断技术医疗保健机构的
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• 实验室技术人员
2名（中级以上）
（六）设备配置基本标准
• B超室 • 细胞遗传室 • 分子遗传宝 • 生化室 • 其它
二、产前诊断技术服务单位 的基本准入标准
医疗保健机构可以根据自身的 技术配备和能力，向省级卫生行政 部门申请开展产前诊断单项技术： 遗传咨询、超声检查。生化检查、 细胞遗传分析等。经卫生行政部门 认证开展产前诊断单项技术的医疗 保健机构，称产前诊断技术服务单 位，在许可的范围内提供产前诊断 单项技术服务。
一、省级开展产前诊断技术 医疗保健机构的基本准入标准
（－）组织设置
• 诊疗组织 主任1名
办公室 资料室
负责产前诊断的临床 技术服务。 负责具体的管理工作 信息档案管理工作。
遗传咨询、 影像诊断（B超） 生化、 细胞遗传、 分子遗传等
具有相应的妇产科、儿科、病理 科、临床遗传专业的技术力量，并和 开展遗传病诊断的机构保持密切联系。
产前诊断MM
第一〇五医院临床学因病 各种环境因子所致的出生缺陷
第一〇五医院临床学院
产前诊断的指征
高龄孕妇 曾生育过染色体异常患儿者 夫妇之一是染色体平衡易位或倒位 者 有脆X综合征家系的孕妇 曾生育过神经管缺损儿的孕妇
第一〇五医院临床学院
第一〇五医院临床学院
产前诊断
产前诊断(prenatal diagnosis)，又 称宫内诊断 (intrauterine diagnosis)，是指在胎儿出生前用各 种方法诊断胎儿是否患有某种遗传病 或先天性疾病的一种手段，是由人类 细胞遗传学、分子遗传学、生物化学 和临床医学实践紧密结合的一门学科。
第一〇五医院临床学院
产前诊断的准确性
就诊夫妇必须明确产前筛查和诊断的区别 筛查针对普遍孕妇对象而非限于所有发病胎儿， 因此会有假阳性和假阴性 诊断是企图能检出每一个病儿 就诊夫妇必须明确，没有一种检查实验是完美无 缺的 生物学上的变化，如约10％的脊柱裂是闭合型 的 实验问题：培养失败或一些不幸的但无法避免 的人为错误
第一〇五医院临床学院
脐静脉穿刺
中孕期产前诊断技术 直接进入胎儿循环 主要用于快速胎儿核型分析、胎儿宫 内感染的诊断、胎儿血液系统疾病的 产前诊断和风险估计以及对羊水或绒 毛检查失败的补救 安全：与之相关的流产率1.9％
第一〇五医院临床学院
胎儿镜检查
时间：孕17～20周 直接观察胎儿外形和体表结构 宫内治疗 与之相关的流产率为3％
植入前遗传学诊断
第一〇五医院临床学院
超声检查
正常结构缺如：如无脑儿 赘生物的形成：如畸胎瘤 阻塞所致的脏器扩张：如脑积水 疝的形成：如脑膨出 胎儿结构的大小异常：如小头畸形 胎儿脏器运动异常：如胎心结构缺陷 其他：羊水过多或过少
介入性产前诊断技术
• 经宫颈CVS和经腹CVS是同样安全。 • 多胎妊娠采用CVS所致流产略高于单胎妊
娠，而与传统羊膜腔穿刺无区别。
CVS 与肢体发育缺陷 (LRD)
• 如果只有经胎盘途径才能使羊水池不被血污染 的话，可以选择这种方法。所有的学者都强调穿 刺进针时要从胎盘最薄处进。
中期羊膜腔穿刺技术安全性
• 穿刺者只有在超声图象上清楚地看到了羊 水池中的胎儿和脐带时,才能进行羊膜腔穿 刺术。当预计到可能会遇到某些困难时， 应当考虑将病人转给经验更丰富的医师保健院产前诊断中心
产前诊断的原则
• 尽可能早期 • 尽可能安全
介入性产前诊断技术
1、羊膜腔穿刺术 2、绒毛活检 3、脐血取样 4、胎儿组织取样 5、胎儿镜与胚胎镜
最常见的介入性产前诊断适应症
1、高龄孕妇：35岁以上的孕妇发生染色体不 分离的机会比正常人高。
2、曾生育过染色体异常儿史：生育过染色体 异常儿，比正常孕妇大10倍以上。
• 其途径可采取经宫颈和经腹取材 • 双针活检系统： 18号引导套针（长15cm，外径1.2mm) 22号活检针（长20cm，外径0.8mm)
经宫颈绒毛活检（CVS）
经宫颈CVS。
(From Simpson JL:Genetic counseling and prenatal diagnosis.In Gabbe SA,Niebyl JF,Simpson JL
正常：颜色为浅黄色
离心后培养
●金黄色
胆红素高（母儿血型不合）
●暗红或棕色
胎盘功能不足、死胎、羊膜腔
内出血、预示妊娠结局不好
●鲜红
穿刺（经胎盘）引起
●混有粪便（发绿） 胎儿宫内窘迫
分子细胞遗传学技术与产前诊断
4.体外蛋白截短试验（PTT）
• 从蛋白质水平检测基因的突变。其原理是碱基缺 失和插入导致的移码突变、碱基替换出现的无义 突变均可使基因提前出现终止密码，从而截短 mRNA翻译的蛋白质。
• 技术路线：血细胞RNAcDNART-PCR体外蛋 白质合成电泳分析截短了的蛋白质相应基因片 段的序列分析
• 无需进行染色体培养，对于不易制备良好分裂相的实体瘤尤为适 用。
• 所需染色体DNA可来自各种组织，如新鲜组织、福尔马林固 定的组织、石蜡包埋组织，可在很少量的基础上检测，利于做 回顾性研究。
第十六页，讲稿共六十二页哦
CGH的局限性：
• 难以检出以下异常：平衡易位，微小突变，基因 重排，倍体水平改变。
碱基的插入和缺失的结果：将导致移码突变（frameshift
mutation），并可在突变点下游提前出现终止密码产生截短型蛋白
缺失突变
第二十二页，讲稿共六十二页哦
基因突变形式
• 框内突变（inframe mutation）：3个或是的倍数 的碱基缺失或插入导致的突变，使基因丢失或增加1 个或几个氨基酸。
第四页，讲稿共六十二页哦
荧光原位杂交技术（Fluorescence in site
hybridization, FISH）的特异性DNA探针
• 基因座特异性探针：克隆扩增获得。在基因制图方面的努力， 越来越多的这方面探针可以使用
• 着丝粒重复序列探针：这些特异性的探针可在中期染色体和间期 细胞核中产生强烈信号，可以鉴别特异性染色体。
可通过酶切PCR产物，电泳分析:限制性片 段长度多态性（RFLP）
第二十六页，讲稿共六十二页哦
2.等位基因特异性（PCR）扩增（ASA）
检验科-产前诊断操作规程SOP文件
唐氏征产前筛查腾程孕期胎儿软件操作规程本文档提示医院从孕妇初次到医院抽血筛查直至最后孕妇妊娠结局，孕妇、检验科、产科涉及其它相关部门需要注意的一些步骤、过程以及其他注意事项。
各医院可以结合自身流程融入这些步骤。
一、孕妇告知书：么的”如果软件可以提供大部分信息导出的文件，可用Excel打开。
另外，为了表明医院尽到告知义务，如果孕妇不原意做唐筛，最好也让她签字“不筛查”，医院也留一份底。
三、检验申请单:医生开具检验申请单，并附上孕妇告知书和孕妇资料。
四、采样:检验科医生根据检验申请单采集孕妇静脉全血样本，并在检验申请单中注明采样日期。
采集全血样本不少于5ml。
唐氏筛查的采血无需空腹，同时也不宜吃太刺激油腻的食物。
根据对一些大型医院操作流程的观察，我们发现：1.如果是每天都做唐氏筛查样本，全血可在4℃冰箱内保存一天。
2.1-3年详、uE3和由展唐氏筛查之前，要在一到两周时间内预先做高中低三个标准各20-30个的质控品来确定靶值，不能以质控品盒上的值作为靶值。
需要注意的是，每次质控时，质控品从冰箱取出后放置于常温下的时间最好相当，保证质控结果的稳定。
七、软件操作要求;仪器测试结果可以直接传输到腾程孕期胎儿唐氏征产前筛查软件中并显示在“唐氏筛查”界面。
当然也可以手动录入，通过综合计算唐氏征的影响因素后可得到该孕妇的唐氏风险度。
软件的操作和使用必须严格按照用户手册使用。
八、AFP、HCG、uE3三联检测的结果运算:正常孕妇和唐氏征儿孕妇三指标血液浓度的分布经过大样本调查，求得正常孕妇在孕中期(第14~21周)各周的AFP，hCG和uE3的血清浓度。
各孕妇的血液浓度测定结果会有所不同。
若以该(坐标，指标1/1000左右，肯，uE1.0MoM，其三个指标的拟真率大约为1/8，乘以一个1/250左右的年龄(对照前面年龄风险表3格大约为37岁的年龄)，最终的怀有唐氏儿的风险在1/2000左右，肯定是筛查低风险范围内。