川陈皮素有激活CRE-依赖性转录和神经再生活性

二、CREB简介
CREB 它是一种位于细胞核内的 转录因子，聚集在脑细胞 中，作用在于刺激特定基 因，制造蛋白质，强化细 胞彼此的连接。
为了查明CREB蛋白质的作用，有人研究了神经细胞相互 交流及其发生变化的过程，即所谓的“长期增化”的生 物过程。结果发现，如果CREB蛋白质一直活跃的话，就 会产生长期记忆。
川陈皮素是增强CRE依赖的转录的同时 增强了TH的转录和表达
分别用100μM的下列六种黄酮类化合物： （1） 川陈皮素 （2） 5-去甲基川陈皮素 （3） 橘皮素 （4） 甜橙黄酮 （5） 6-去甲氧基橘皮素 （6） 6-去甲氧基川陈皮素 对PC12D细胞进行处理，并检测六种物质对CRE依赖的转录和轴突生长的 影响。
结果和讨论
1.对CRE依赖的转录活性的影响
Nobiletin and its related flavonoids with CRE-dependent transcription- stimulating and neuritegenic activities
川陈皮素有激活CRE-依 赖性转录和神经再生活性
一、英文缩写
cAMP：环单磷酸腺苷 PKA： cAMP依赖性蛋白激酶 CRE： cAMP反应元件 CREB：CRE结合蛋白 CBP： CREB结合蛋白 ERK： 细胞外信号调节激酶 MAPK： 促分裂素原活化蛋白激酶 NGF： 神经生长因子 BDNF： 脑源性神经营养因子
神经生长因子（NGF） 由效应神经元支配的靶组织 细胞所合成和分泌的一种神 经细胞生长调节因子。
功能：维持感觉、交感神经元 存活，促进受损神经纤维修 复。 NGF
P
MET
P
P
ERK
P
结论三
蛋白激酶A(PKA)
又名cAMP依赖的 蛋白激酶, 当cAMP 不存在时， PKA以 无活性的全酶状态 存在
结论: 对CRE依赖的转录活性增强的 顺序： 1>> 6, 4, 3 > 5 > 2 即川陈皮素的活性最大。
结果和讨论
2.对轴突生长的影响
结论： a. 促进轴突生长的顺序： 1>> 6, 4 > 3, 5, 2 即川陈皮素的活性最大。 b. 100μM川陈皮素对轴突生长的 促进作用可以与50ng/ml的神经 生长因子（NGF）的作用相媲美。
结论三
nobiletin
P
MET
P
同时，在不影响 P PKA蛋白表达的 P ERK 情况下激活 CREB的磷酸化 NGF
结论四
激活蛋白1（AP1）
是一种激活因子蛋白，NGF通过增强AP1 依赖的转录过程而诱导神经突触的生成。
酪氨酸羟化酶（TH）
儿茶酚胺类神经递质多巴胺和去甲肾上腺素合成 的限速酶。其活biletin增强CRE依赖的转录活性
结论四
1：vehicle 2：nobiletin 3：forskolin
同时，nobiletin增强了TH的转录和表达
小结
川陈皮素是增强CRE依赖的转录和轴突 生长的最有效的化合物，其中转录和轴 突生长之间有极大的相关性；
结论
川陈皮素增强了MET/ERK/MAP激酶依赖 的信号转导的活性，同时增强了CREB 的磷酸化
EtOH 部分
EtOAC 部分 硅胶柱层析 CHCCl3-MeOH(9:1)
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
C6H12-Me2CO (2:1)
Ⅴ
C6H12-Me2CO (3:2)
C6H12-Me2CO (3:2)
5-去甲基 橘皮素 川陈皮素 川陈皮素
甜橙黄酮 6-去甲氧基橘皮素 6-去甲氧基川陈皮素
结果和讨论
一、川陈皮素及其结构相关化合物对PC12D细胞中CRE依 赖的 转录和轴突生长的影响
三、激活CREB的信号通路
四、天然化合物
中文名称 川陈皮素 5-去甲基川陈皮素 橘皮素 甜橙黄酮 6-去甲氧基橘皮素 6-去甲氧基川陈皮素
提取和分离
扁氏柠檬皮 热甲醇 甲醇提取物 Diaion HP-20 柱
H20-MeOH H20-MeOH H20-MeOH MeOH (7:3)部分 (2:3)部分 (1:4)部分 部分
结果和讨论
由前面两个实验数据图可以得出：
在以上六种化合物中，川陈皮素是增强PC12D细胞 中CRE依赖的转录和轴突生长的最有效的化合物。
结果和讨论
二、川陈皮素处理的PC12D细胞中CRE依赖的转录和 轴突生长之间有极大的相关性
川陈皮素对CRE依赖的转录和轴突生长的促进作用都是浓 度依赖性的。
结论三