O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶与肿瘤预见性化疗新策略
脑胶质瘤DNA甲基化临床意义及研究进展
脑胶质瘤DNA甲基化临床意义及研究进展
姚盈盈;王雷明;滕梁红
【期刊名称】《中国现代神经疾病杂志》
【年(卷),期】2022(22)9
【摘 要】脑胶质瘤存在特异性CpG岛甲基化表型(G⁃CIMP),与异柠檬酸脱氢酶(IDH)突变密切相关。经替莫唑胺治疗的胶质瘤复发时存在一种超突变,O6⁃甲基鸟嘌呤⁃DNA甲基转移酶(MGMT)启动子甲基化水平有助于预测超突变风险,从而为临床决策提供依据。全基因组DNA甲基化分析业已成为中枢神经系统肿瘤分类的有效辅助方法,本文综述DNA甲基化分析在胶质瘤中的研究进展,并探讨其临床意义。
【总页数】6页(P823-828)
【作 者】姚盈盈;王雷明;滕梁红
【作者单位】首都医科大学宣武医院病理科
【正文语种】中 文
【中图分类】R73
【相关文献】
1.DNA甲基化在脑胶质瘤中调控囊泡相关膜蛋白8基因的表达2.DNA修复基因MGMT启动子区过甲基化与脑胶质瘤3.脑胶质瘤患者异柠檬酸脱氢酶(IDH)1/2基因突变与O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因启动子区甲基化的相关性研究4.脑胶质瘤SOX7基因的甲基化状态及临床意义5.O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因启动子甲基化对脑胶质瘤患者化学治疗敏感性及生存的影响 因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买
泌尿生殖系统肿瘤的表观遗传学生物标志物研究新进展
泌尿生殖系统肿瘤的表观遗传学生物标志物研究新进展
何立;王敏;蒋冠军;汪志顺
【摘 要】Kidney,bladder,prostate and testis cancers are the most common
genitourinary ( GU) neo-plasms.There are no effective tests with both high
sensitivity and high specificity ,which are also unable to detect cancer at
earliest stages when curative treatment is most likely
successful.However,epigenetic-based GU cancer biomarkers like
microRNA,DNA methylation,histone modifications and chromatin
remodeling are the latest research hotspots,and have the potential to
reform the detection,diagnosis and treatment of GU neo-plasms,and
predict the response of GU cancer to therapy.%肾癌、膀胱癌、前列腺癌及睾丸癌是泌尿生殖系统常见的恶性肿瘤. 现有的检验手段不能兼顾敏感性和特异性,并且难以在早期诊断疾病,导致患者错过最佳的诊治时期. 表观遗传学生物标志物,如微RNA、DNA甲基化、组蛋白修饰和染色质重塑等是近年的研究热点,有望革新泌尿生殖系统肿瘤的筛查、诊断和预后评估,而且还能预测疾病对治疗的反应性.
【期刊名称】《医学综述》
【年(卷),期】2016(022)002
替莫唑胺治疗多形性胶质母细胞瘤的化疗耐药机制
替莫唑胺治疗多形性胶质母细胞瘤的化疗耐药机制
陈欢欢;蔡炜嵩
【摘 要】胶质瘤约占原发性颅内肿瘤的50％以上,多形性胶质母细胞瘤(GBM)为WHOⅣ级胶质瘤,复发率高,5年生存率不到10％.化疗是GBM综合治疗中的重要一环,而替莫唑胺作为多形性胶质母细胞瘤基石化疗药物在临床广泛应用,然而因其化疗耐药性的存在,严重影响了治疗效果的进一步提高.本文针对目前胶质瘤化疗药物的主要耐药机制:多药耐药、DNA损伤修复机制、凋亡通路异常、胶质瘤干细胞学说等几个方面,结合替莫唑胺药理机制进行分析、总结,希望对提高替莫唑胺在多形性胶质母细胞瘤中的疗效有一定启示.
【期刊名称】《实用药物与临床》
【年(卷),期】2015(018)002
【总页数】5页(P215-219)
【关键词】多形性胶质母细胞瘤;替莫唑胺;化疗耐药
【作 者】陈欢欢;蔡炜嵩
【作者单位】中国医科大学附属盛京医院肿瘤科,沈阳110022;中国医科大学附属盛京医院肿瘤科,沈阳110022
【正文语种】中 文
胶质瘤(Glioma)是成年人最常见的颅内恶性肿瘤，其中多形性胶质母细胞瘤(Glioblastoma Multiforme,GBM)占胶质瘤的40%～50%，是人类生存预后最差的恶性肿瘤之一。临床上现普遍采取手术切除，术后替莫唑胺同步放化疗序贯替莫唑胺口服化疗为主要治疗手段。然而，即便经积极治疗后，GBM中位生存期平均仅为14.6个月,5年生存率不到10%[1]。除GBM恶行程度高、侵袭性生长及某些部位手术难度较大外，胶质瘤的放疗抵抗与化疗耐药也是肿瘤复发预后不良的重要原因。有研究表明，替莫唑胺(Temozolomide,TMZ)对恶性胶质瘤的有效率约45%[2]，TMZ耐药是造成GBM化疗失败的主要原因之一。
TMZ是第二代咪唑并四嗪类烷化剂，广泛应用于恶性胶质瘤和黑色素瘤中。TMZ口服给药，易通过血脑屏障，生物利用度高。进入胶质瘤碱性组织中后，自动分解,其分解产物作用于肿瘤DNA，甲基化肿瘤DNA嘌呤残基—主要分为甲基化鸟嘌呤N7(70%)、O6(6%)以及腺嘌呤N3(9%)、O3，为N7-meG、O6-meG及N3-meA、O3-meA，使DNA在复制时出现碱基错配，最终致DNA双链断裂,干扰DNA合成,使肿瘤细胞G2/M期停止生长，诱导肿瘤细胞自噬或凋亡。其中，O6位点鸟嘌呤甲基化是TMZ发挥细胞毒性效应的主要途径[3]。其次,实验和部分临床Ⅰ/Ⅱ期研究表明，低剂量节拍式[4]TMZ给药方案能够诱导内源性血管生成抑素,抑制新生肿瘤血管,使肿瘤相关内皮细胞凋亡。此外，小剂量持续每天应用TMZ还具有放疗增敏作用，在恶性胶质瘤放射治疗中广泛应用[5]。
IDH1突变和MGMT基因启动子甲基化在脑胶质瘤中表达及关联度分析
IDH1突变和MGMT基因启动子甲基化在脑胶质瘤中表达及关联度分析
朱潇鹏;唐军海;黄国浩;徐庆福;臧振乐;赵邦云;王彬;吕胜青
【摘 要】目的：探讨脑胶质瘤中异柠檬酸脱氢酶1(isocitrate dehydrogenases 1，IDH1)突变和O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（O6-methylguanine-DNA
methyltransferase，MGMT）基因启动子甲基化状态及二者之间的关联性。方法收集手术切除并经病理证实的脑胶质瘤组织133例，采用巢式甲基化特异性PCR（nested methyla⁃tion-specific PCR，nMSP）法和甲基化特异性PCR（methylation specific PCR,MSP）法联合变性高效液相色谱分析（denaturing
high performance liquid chromatography，DHPLC）法检测脑胶质瘤中的MGMT基因启动子甲基化情况，直接测序法检测脑胶质瘤中IDH1基因的突变情况。采用χ2检验进行IDH1突变和MGMT基因启动子甲基化关联度的统计分析。结果133例脑胶质瘤患者中MGMT基因启动子甲基化88例（66.17%），IDH1突变62例（46.62%）。IDH1突变和MGMT基因启动子甲基化存在关联（P=0.01）。结论脑胶质瘤中IDH1突变和MGMT基因启动子甲基化之间关联显著，提示两者在脑胶质瘤的发生发展中可能存在相互调节的作用；IDH1突变和MGMT基因启动子甲基化是脑胶质瘤的重要疾病相关因素。
【期刊名称】《中国神经精神疾病杂志》
【年(卷),期】2015(000)002
【总页数】4页(P111-114)
【关键词】IDH1;突变;MGMT;甲基化;脑胶质瘤 【作 者】朱潇鹏;唐军海;黄国浩;徐庆福;臧振乐;赵邦云;王彬;吕胜青
【作者单位】第三军医大学新桥医院神经外科 重庆 400037;第三军医大学新桥医院神经外科 重庆 400037;第三军医大学新桥医院神经外科 重庆 400037;第三军医大学新桥医院神经外科 重庆 400037;第三军医大学新桥医院神经外科 重庆
颅内和椎管内肿瘤整理
颅内和椎管内肿瘤整理
● 颅内肿瘤
● 概述
● 病理学分类
● 组织学病理诊断+基因特征的“综合诊断”新模式
● 标准化的诊断术语如“弥漫星形细胞瘤-IDH突变型”，“髓母细胞瘤-WNT激活型”
● 临床表现
● 颅内压增高
● 原因：脑瘤占位、瘤周脑水肿、脑脊液循环受阻
● 头痛：多晨醒、咳嗽和大便时加重，呕吐后可暂时缓解
● 呕吐：多清晨呈喷射状发作
● 视神经乳头水肿
● 神经功能定位症状
● 原因：肿瘤直接刺激、压迫和破坏脑神经
● 破坏性症状
● 中央前后回肿瘤——一侧肢体运动和感觉障碍
● 额叶肿瘤——精神障碍
● 枕叶肿瘤——视野障碍
● 顶叶下部角回和缘上回——失算失读失用及命名性失语
● 语言运动中枢——运动性失语
● 下丘脑肿瘤——内分泌障碍
● 四叠体肿瘤——眼球上视障碍
● 小脑蚓部——肌张力减退及躯干和下肢共济运动失调
● 小脑半球肿瘤——同侧肢体共济失调
● 脑干肿瘤——交叉性麻痹
● 压迫症状
● 鞍区肿瘤——视力视野障碍
● 海绵窦区——肿瘤压迫Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ脑神经——病人出现眼睑下垂、眼球运动障碍、面部感觉减退减退等海绵窦综合征
● 癫痫
● 脑肿瘤病人癫痫发病率高达30%-50%
● 与肿瘤部位有关
● 缓慢生长的脑肿瘤癫痫率＞迅速生长的恶性脑肿瘤
● 脑电图检测到癫痫发作期的棘波、棘尖波有诊断价值
● 老年和儿童颅内肿瘤特点
● 老年人脑萎缩，颅内空间相对增大，颅内压增高不明显，以幕上脑膜瘤和转移瘤多见
● 儿童以发生中线区肿瘤多见，幕下以髓母细胞瘤和室管膜瘤多见，幕上以颅咽管瘤多见
● 诊断
● 头部CT和MRI扫描
● 正电子发射体层摄影术（PET）
● 活检
● 治疗
● 药物抗癫痫
● 降低颅内压
● 术前有癫痫病史，术后一般药物抗癫痫3个月
● 术前无癫痫病史，幕上肿瘤病人无需预防性使用，术后一般药物抗癫痫2周
● 手术治疗
● 切除肿瘤、降低颅内压和解除对脑神经的压迫
【生物化学与分子生物学】真核细胞DNA损伤及修复方式
损伤 修复方式
碱基烷基化 直接修复 MGMT(O~6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶)的自杀性修复。这种酶在作用时将烷基化的碱基转移到自身，在使碱基恢复正常时自身失活。
嘧啶二聚体 直接修复 光裂解酶（光裂合酶）识别嘧啶二聚体的存在，在光的作用下，吸收光能，直接修复。
碱基受损 切除修复 碱基切除修复（BER）
DNA双螺旋结构扭曲 切除修复 核苷酸切除修复（NER） 20%碱基的氧化性损伤
DNA分子上碱基对错配 错配修复（MMR） 真核细胞中机制不明，但在大肠杆菌中为甲基化导向的错配修复
双链断裂 同源重组(HR)修复 利用细胞内一些促进同源重组的蛋白质来从姊妹染色体或同源染色体那里获得合适的修复断裂的信息
非同源末端连接（NHEJ）修复 在同源无序列的情况下，让断裂的末端重新连接起来
DNA分子严重损伤，正常的复制和修复系统无法完成DNA的复制 易错修复（SOS修复） 在无模板DNA 情况下合成酶的诱导修复或极度缺少某种dNTP时采用非常规的碱基配对，又称为错误倾向修复
双链DNA中的一条链发生损伤，在DNA进行复制时，由于该损伤部位不能成为模板，不能合成互补的DNA链，从而产生缺口 重组修复 ①受损伤的DNA链复制时，产生的子代DNA在损伤的对应部位出现缺口。②完整的另一条母链DNA与有缺口的子链DNA进行重组交换，将母链DNA上相应的片段填补子链缺口处，而母链DNA出现缺口。③以另一条子链DNA为模板，经DNA聚合酶催化合成一新DNA片段填补母链DNA的缺口，最后由DNA连接酶连接，完成修补。
谷胱甘肽S-转移酶与肿瘤防治
谷胱甘肽S-转移酶与肿瘤防治
孙士勇;韩锐
【期刊名称】《国际药学研究杂志》
【年(卷),期】1992(19)2
【摘 要】谷胱甘肽S—转移酶是属机体Ⅱ相代谢酶中催化谷胱甘肽与亲电性物质发生结合的一类酶系,在保护生物体免遭毒物损害方面起重要作用。由于环境中的致癌物和癌化疗药物多为亲电性物质,因而该类酶系具有双重作用,即一方面提高机体解致癌物毒性的能力,降低肿瘤发生;另一方面也增加癌细胞对化疗药物的代谢能力,产生耐药性。此外,谷胱甘肽S—转移酶在肿瘤诊断方面可能亦有一定的应用价值。
【总页数】5页(P69-73)
【作 者】孙士勇;韩锐
【作者单位】北京医科大学生化教研室;中国医学科学院药物研究所
【正文语种】中 文
【中图分类】R730.1
【相关文献】
1.谷胱甘肽S-转移酶π在胃肠道恶性肿瘤研究中的进展 [J], 侯振江;侯建章
2.谷胱甘肽S-转移酶π在消化道恶性肿瘤研究中的应用 [J], 牟红梅
3.谷胱甘肽S-转移酶-π与肿瘤多药耐药的研究进展 [J], 王慧群
4.恶性与良性卵巢肿瘤患者血清中O~6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)和谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性的意义 [J], Akc.ay T.;Dinc.er Y.;Alademir Z.;刘亦恒
5.谷胱甘肽和谷胱甘肽S－转移酶与肿瘤耐药关系的探讨 [J], 夏瑞祥
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肺癌的预见性化学治疗
・７４・ 中华肺部疾病杂志（电子版）２９１１年４月第４卷第２期Ｏｆｉｎ ＪｈｌｎｇＤｉｓ（Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ Ｅｄｉｔｉｏｎ）．Ａｐｒｉｌ２９１１．Ｖｏｌ ４．Ｎｏ．２
肺癌的预见性化学治疗
Ｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ
李 羲
【关键词】支气管肺癌；化学治疗，预见性
中图法分类号：Ｒ７３４．２ 文献标识码：Ａ
在肺癌治疗方案的选择中，依据细胞类型、临床 分期等临床特征制订的肺癌治疗策略，是公认的肺
癌治疗基本标准之一。它比单纯依据临床经验制订
的肺癌治疗策略更科学、更合理、也更有效。但客观
事实告诉我们，以大样本临床资料而确立的非小细 胞肺癌（ｎｏｎ—ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ，ＮＳＣＬＣ）“规范化
疗”的客观有效率仅为２０％～３０％。肺癌的总体５ 年生存率不足１５％＿１ｊ。同一细胞类型的肺癌对同
一化疗方案疗效的个体差异很大。其中，肿瘤细胞
耐药是主要问题之一。如何发现肺癌细胞的耐药
性，进行肺癌的预见性化学治疗，是临床亟待解决的
一个重要问题。
预见性化学治疗属于个体化治疗范畴。个体化
治疗就是根据每一位肺癌患者的疾病特点制订针对 性治疗方案。其首要目标是用各种方法获得肺癌治
疗获益人群的准确信息并指导临床治疗。同时，根
据治疗反应评估和修正治疗方案，最终实现疗效的
最大化和不良反应的最小化。新近的一些研究显
示，通过检测一些指标，可以判断肺癌细胞对哪些药 物耐药。这将有助于设计个体化的化学治疗方案。
Ｐ糖蛋白（Ｐ—ｇＰ）是１９７６年发现的一种能量依
赖性药物输出泵。当化疗药物靠浓度梯度到达细胞
后与Ｐ—ｇＰ结合，导致三磷酸腺苷（ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ｔｒｉｐｈｏｓ—
ｐｈａｔｅ，ＡＴＰ）结合区活化，此时其核苷酸结合位点与 ＡＴＰ结合，ＡＴＰ随即水解为二磷酸腺苷（ａｄｅｎｏｓｉｎｅ
ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ，ＡＤＰ）释放能量，在Ｍｇ 作用下使Ｐ—ｇＰ 形态发生变化，在药物尚未发生细胞毒作用时即被
O 6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义
临床泌尿外科杂志２００７年１１月第２２卷第１１期 ・ ８４１ ・
Ｏ６一甲基鸟嘌呤一ＤＮＡ甲基转移酶在膀胱移行
细胞癌中的表达及临床意义
吴准 刘双林 李俊 李东 赵宇峰 张旭
［摘要］ 目的：研究０ 一甲基鸟嘌呤一ＤＮＡ甲基转移酶（ＭＧＭＴ）在膀胱移行细胞癌（ＴＣＣＢ５组织中的表达及
其与临床病理特征的关系。方法：应用免疫组织化学ＳＰ法检测６Ｏ例膀胱移行细胞癌中ＭＧＭＴ的表达，统计分
析其与肿瘤临床病理的关系。结果：膀胱癌组织中ＭＧＭＴ阳性表达率为３５．０ （２１／６０），明显低于癌旁组织
（７６．７ ．４６／６０）及正常膀胱组织（８６．７ ，１３／１５）（Ｐ＜Ｏ．０１）；ＭＧＭＴ蛋白的表达与膀胱移行细胞癌组织分化程
度有关（Ｐ＜Ｏ．０５）。而与临床分期无明显关系。结论：ＭＧＭＴ在膀胱移行细胞癌的发生和发展中起抑制作用；
ＭＧＭＴ蛋白的表达可能是预断膀胱癌预后的重要指标。
［关键词］膀胱肿瘤；移行细胞癌；Ｏ 甲基鸟嘌呤一ＤＮＡ甲基转移酶；免疫组织化学
［中图分类号］Ｒ７３７．１４ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１—１４２０（２００７）１１ ０８４１－０３
Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ０ｆ ｏ 一ｍｅｔｈｙｌｇｕａｎｉｎｅ－ＤＮＡ ｍｅｔｈｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ ｉｎ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎａｌ
ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｏｆ ｔｈｅ ｂｌａｄｄｅｒ ａｎｄ ｉｔｓ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ
ＷＵ Ｚｈｕｎ ＬＩ己，Ｓｈｕａｎｇｌｉｎ ＬＩ ＪＵｌ？ ＬＩ Ｄｏｎｇ ＺＨＡＯ Ｙｕｆｅｎｇ ＺＨＡＮＧ Ｘｕ
（ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｕｒｏｌｏｇｙ，Ｔｏｎｇｊｉ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｔｏｎｇｊｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｈｕａｚｈｏｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ
Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｗｕｈａｎ，４３００３０，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｐａｔｈｏ—
O 6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶在肝癌组织中的表达及其意义
现代肿瘤医学２００８年１２月第１６卷第１２期 ０６一甲基鸟嘌呤一ＤＮＡ甲基转移酶在肝癌组织中的表达及其意义 袁丁 ，陈治强 ，陈 娟 ・２１３５・
Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ ＭＧＭＴ ｉｎ ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ＹＵＡＮ Ｄｉｎｇ ，ＣＨＥＮ Ｚｈｉ—ｑｉａｎｇ ，ＣＥＨＮ Ｊｕａｎ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＧｅｎｅｒａｌ Ｓｕｒｇｅｒｙ，Ｔｈｅ Ｆｉｆｔｈ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆＣｈｏｎｇｑｉｎｇ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ ４０００６２，Ｃｈｉｎａ； Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆＭｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｎ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄ ｅ ｅ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆＭｅｄｗａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ ４０００１６，Ｃｈｉｎａ． 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＭＧＭＴ ｉｎ ｈｅｐａｔｏｅｅｌｌｕｌａｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ＭＧＭＴ ａｎｄ ｐ５３．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅ ｅｘｐｒｓｓｉｏｎ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ＭＧＭＴ ｗｅｒｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｂｙ ＲＴ—ＰＣＲ．ａｎｄ ｔｈｅｎ ｐ５３ ｐｒｏｔｅｉｎ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｏｔａｌ ｏｆ ２８ ｃａｓｅｓ ｓｈｏｗｅｄ ｌｏｗｅｒ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ＭＧＭＴ ｇｅｎｅ ｉｎ ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｇｒｏｕｐ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｎｏｒｍａｌ ｌｉｖｅｒ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｐ５３ ａｎｄ ＭＧＭＴ ｇｅｎｅ ｅｘ— ｐｒｅｓｓｉｏｎ． 【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ ｔｕｍｏｒ；ＭＧＭＴ；ｐ５３ Ｍｏｄｅｍ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ ２００８，１６（１２）：２１３５—２１３７ 【摘要】 目的：研究Ｏ 一甲基鸟嘌呤一ＤＮＡ甲基转移酶（Ｏ。一ｍｅｔｈｙｌｇｕａｎｉｎｅ—ＤＮＡ ｍｅｔｈｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＭＧＭＴ） 在肝癌组织中的表达及其与ｐ５３的相关性。方法：采用ＲＴ—ＰＣＲ的方法检测４０例肝癌组织中ＭＧＭＴ基因 的表达水平，并采用免疫组织化学方法检测肝癌组织中ｐ５３蛋白的表达。结果：４０例肝癌组织中有２８例 ＭＧＭＴ的表达水平明显低于对照非肝癌组织中，其ＭＧＭＴ ｍＲＮＡ表达的相对量为０．５４ ４－０．１３，而非肝癌组织 组为１．１５±０．０９５。结论：ｐ５３蛋白的表达与细胞中ＭＧＭＴ基因的表达有一定的相关性。 【关键词】肝肿瘤；ＭＧＭＴ；ｐ５３ 【中图分类号】Ｒ７３５．７ 【文献标识码】Ａ 【文章编号】１６７２—４９９２一（２００８）１２—２１３５—０３ Ｏ 一甲基鸟嘌呤一ＤＮＡ甲基转移酶（Ｏ。一ｍｅｔｈｙｌｇｕａｎｉｎｅ —ＤＮＡｍｅｔｈｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＭＧＭＴ）是从细菌到哺乳类机体中存 在的一种独特的ＤＮＡ修复蛋白，其作用是在ＤＮＡ损伤的修 复过程，催化ＤＮＡ分子鸟嘌呤位上的烷基从鸟嘌呤碱基转 移至ＭＧＭＴ蛋白的半胱氨酸残基上，而使ＤＮＡ分子鸟嘌呤 复原。ＭＧＭＴ蛋白在细胞的含量变化与肿瘤细胞的生成及 其对于亚硝基脲类化疗药物产生耐药性和药物对于骨髓的 毒性均有着密切的关系。本研究通过检测肝癌组织中ＭＧ－ ＭＴ基因的表达及含量，拟探讨ＭＧＭＴ基因表达水平与肝癌 发生的关系。 １材料与方法 １．１材料 重庆市第五人民医院肝胆外科与重庆医科大学附属医 院肝胆外科２００５年４月至２００７年４月收治的４０例原发性 肝癌（ＨＣＣ）患者的癌组织（实验组），标本均取至重庆医科 大学肝胆外科。诊断均符合２００１年第八届全国肝癌学术会 议通过的ＨＣＣ临床诊断与分期标准。男２６例，女ｌ４例；年 龄３２—７１岁，平均５５岁；Ｉ期２例、ＩＩ期２４例、ＩＩＩ期１４例。 Ｉ收稿日期】２００８—０３—０４ 【作者单位】 重庆市第五人民医院普外科，重庆４０００６２ 重庆医科大学感染性疾病分子生物学实验室，重庆 ４Ｏ０ｏ１６ 【作者简介】袁丁（１９７７一），男，重庆人，主治医师，主要从事肿瘤 外科工作，侧重肝癌研究。 １．２方法 １．２．１标本切取肝癌组织取自病灶中央非坏死部分，并 取手术切除块边缘离病灶３ｃｍ以上的非肝癌组织标本．组织 标本离体后剪为２块，一块作冰冻或石蜡连续切片，用于病 理组织学和免疫组化检测；一块在离体３０ ｍｉｎ内迅速置液氮 冰冻保存。所有组织标本由重庆医科大学病理科医生诊断。 Ｔｒｉｚｏｌ试剂盒和ＲＴ—ＰＣＲ试剂盒为德国Ｑｉａｇｅｎ公司产品，ｓ —Ｐ试剂盒购自北京中山公司。 １．２．２ ＲＮＡ的制备取组织标本１００ｍｇ，加入Ｔｒｉｚｏｌ溶液 ｌｍｌ在冰上用玻璃匀浆器彻底匀浆，按Ｔｒｉｚｏｌ试剂盒（ＧＬＢＣＯ ＢＲＬ）说明书的步骤提取总ＲＮＡ，用紫外分光核酸蛋白分析 仪测定ＲＮＡ的纯度和浓度。用１．５％低熔点琼脂糖凝胶电 泳检查ＲＮＡ的完整性。 １．２．３ ＲＴ—ＰＣＲ检测ＭＧＭＴ基因ｍＲＮＡ在２５ ｌ逆转 录反应体系中加入ＲＮＡ模板７ ，５×ｂｕｆｆｅｒ ５Ｉｘｌ，５×Ｑ ｂｕｆｆｅｒ ５ ，１０ｍｍｏｌ／１ ｄＮＴＰ １ ｌ，逆转录酶０．５ ｌ，引物各１ ｌ，纯水 （ＲＮａｓｅ ｆｒｅｅ）２．５ ｌ。 ＲＴ—ＰＣＲ检测ＭＧＭＴ基因的ｍＲＮＡ时，以人３ 磷酸 甘油醛脱氢酶（ｈＧＡＰＤＨ）基因为内参。ＭＧＭＴ基因ＰＣＲ上 游引物下游为５ 一ＧＡＡＴＴｃＡＴＧＧＡｃ从ＧＧＡ１＿ｒＧＴ一３ 下游 引物为５ 一Ｇ Ｇ ｒＡｃｃｃＡＴｃｃＧＡＴＧｃＡＧＴＧＴ一３ 扩增长度为 约７３０ｂｐ。ｈＧＡＰＤＨ的上游引物为５ 一ＧＧＣＴＣＴＣＣＡＧＡＡ． ＣＡＴＣＡＴ一３ 下游引物为５ 一ＣＡｃｃＴＧＧ ｒＧｃＴｃＡＧＴＧＴＡ一３ 扩增产物为２４０ｂｐ。ＲＴ—ＰＣＲ反应条件为：５０￣Ｃ３０ｍｉｎ；９５￣Ｃ １５ｍｉｎ；９４℃３０ｓｅｅ，５７ｏＣ３０ｓｅｅ，７２ｏＣ５０ｓｅｃ，