斑马鱼下颌损伤后的再生组织的超微结构观察及神经递质分析

Hans Journal of Agricultural Sciences 农业科学, 2014, 4, 73-80 Published Online August 2014 in Hans. http://www.hanspub.org/journal/hjas http://dx.doi.org/10.12677/hjas.2014.44012

73 Ultrastructural Observation and Neurotransmitter Analysis of Tissue Regeneration after Amputation of Zebrafish Lower Jaw Hao Wu1, Li Li2, Xianrui Li3, Jiyu Wang3, Danqun Chen4, Jizhou Yan3 1Key Laboratory of Freshwater Fishery Germplasm Resources, Ministry of Agriculture, College of Fisheries and Life Sciences, Shanghai Ocean University, Shanghai 2Guangxi Fangchenggang Subversion Bureau of Quality and Technique, Fangchenggang 3Department of Biology, College of Fisheries and Life Sciences, Shanghai Ocean University, Shanghai 4Putou District Fisheries Management Center, Zhoushan City Email: hwu@shou.edu.cn Received: May 27th, 2014; revised: Jun. 16th, 2014; accepted: Jun. 23rd, 2014 Copyright © 2014 by authors and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/ Abstract Zebrafish is an ideal model for studying organ regeneration, particularly in complicated nerve tissue structures like lower jaw and caudal fin. In this study, we dynamically observe ultrastruc-tural changes of wound tissues and analyze four neurotransmitter contents during the early stage of lower jaw regeneration after removal of one third of mandible and associate soft tissues. Two hours post-amputation (2 hpa), contraction occurs around the edges of the wound causing the wound size to become smaller. In comparison with non-amputation, the level of dopamine, γ-Aminobutyric acid (GABA), glutamic acid and glycine increase in the wound tissues. The content of four neurotransmitters reaches to the peak when epidermis reconstitution is complete at 2 dpa. At 5 dpa, the missing structure is largely recovered while the 4 neurotransmitters retain the high level or slightly reduce. These results suggest that neurotransmitters play important roles in in-troducing lower jaw regeneration. Keywords Zebrafish, Lower Jaw, Regeneration, Neurotransmitter

74 斑马鱼下颌损伤后的再生组织的超微结构观察及神经递质分析吴昊1，李利2，李先瑞3，王箕雨3，陈丹群4，严继舟3 1上海海洋大学水产与生命学院农业部淡水水产种质资源重点实验室，上海 2广西防城港市质量技术监督局，防城港 3上海海洋大学水产与生命学院生物系 4浙江舟山市普陀区渔业经营管理站，舟山 Email: hwu@shou.edu.cn 收稿日期：2014年5月27日；修回日期：2014年6月16日；录用日期：2014年6月23日摘要斑马鱼(Danio rerio)具有很强的再生能力是生物再生研究的良好模型，尤其是下颌组织和尾鳍有复杂的组织学结构。本文结合形态观察检测递质类化合物的动态变化。斑马鱼下颌组织被切除掉约1/3后，2小时创面细胞收缩，神经递质类化合物的释放增加。在修复的第2天创面形成较完整的表皮组织，递质类物质如多巴胺(DA)、γ-氨基丁酸(GABA)谷氨酸(Glu)以及甘氨酸(Gly)等的含量达到峰值。到5天的时候下颌被剪除部位外部形态已经大部分恢复，且递质类化合物的含量呈现高位维持或缓慢下降。结果提示神经递质在斑马鱼下颌再生过程中发挥重要作用。关键词斑马鱼，下颌，修复，神经递质 1. 引言具有很强自我修复能力的斑马鱼是再生研究的良好模型生物，而斑马鱼的下颌同尾鳍和心脏或者蝾螈的腿一样在损伤后也能够自行修复[1]。已有研究[2]-[4]比较多的主要有两类组织再生方式一种是像水螅、涡虫的组织再生方式，它们体内保持有处于未分化状态的干细胞，当机体受到损伤时这些干细胞就被激活进而分化、发育成所需的组织；另一类则是像斑马鱼、蝾螈等的修复方式，通过损伤部位的芽基(blastema)细胞的再分化来完成组织再生，其中芽基被认为是由一种或多种细胞的增殖、去分化集聚而形成，对组织器官再生有重要作用的多潜能细胞群结构，很多脊椎动物的组织再生就是通过形成芽基完成。也会有同一个体同时具有以上两种组织再生方式的，例如棘皮动物门的海参等[5] [6]；。对于斑马鱼下颌修复的研究可以为生物体软骨组织方面的自我修复研究提供重要的借鉴意义。王学龙等研究[7]结果表明若切除约1/3的斑马鱼下颌组织后，创口表面组织可快速愈合，在3到4天的时候表皮下会出现大量的成纤维细胞样梭形细胞即芽基细胞，通过芽基细胞的进一步增殖分化，包括齿骨在内的各组织可在1个月重新长出并恢复原样。在参与组织修复再生的分子调控机制中，包括糖类、氨基酸等大量的小分子化合物参与其中，甚至部分神经递质亦在此修复过程中扮演着特定的角色。在芽基细胞分化增殖需要生物体给予物质和能量方面的支持，因此诸如糖酵解过程、磷酸戊糖途径、糖原的合成与分解、蛋白质的合成与脂肪酸等代谢途

斑马鱼下颌损伤后的再生组织的超微结构观察及神经递质分析

75 径有可能参与了再生修复这一系统工程。通过对部分化合物的监测来间接了解各个通路代谢转化的情况是一种研究途径，尤其是针对兼具多重角色的化合物如谷氨酸等，它既可能是蛋白质合成的原料也可能是在传递着调控的信息。同时关于递质类物质如多巴胺、γ-氨基丁酸等在调节神经元活性或传导修复信息时发挥着何种作用等都是值得关注的研究内容。关于斑马鱼下颌自我修复的分子机制尚无相关文献，我们前期的试验结果显示，在修复的过程中组织中的谷氨酸、甘氨酸和天冬氨酸等含量出现了明显的波动，代谢或中间产物如丙三醇和柠檬酸以及脑部及组织中的多巴胺、γ-氨基丁酸的含量在修复过程中亦呈现规律性变化。其中的天冬氨酸及柠檬酸等数据因涉及到另外的课题研究将在其它的论文中予以描述，本文试图以上述谷氨酸、甘氨酸和递质类的小分子化合物为研究对象，通过观察它们在斑马鱼下颌修复过程中的变化情况，来初步诊断或分析它们在再生过程中的作用。 2. 材料与方法 2.1. 试验生物试验以3个月左右的斑马鱼为研究对象，体长1.5 ± 0.3 cm，并养殖于斑马鱼养殖系统。研究分一个对照组和三个试验组，每组设置15条鱼并以5条所剪的组织合并成一个检测样本，由此设置成一个试验组的三个平行。3个试验组分别是斑马鱼减去约1/3的下颌组织后第2小时、第2天和第5天的时候，再次剪取下颌正在修复的部位，所减组织重量约0.5 mg左右，因此单个检测样本重量约为2.5 mg，能够使气质联用仪的检测器能够检测到目标化合物。同时以未做减除下颌处理的斑马鱼作为对照组试验样本，各试验组在下文中分别命名为对照0小时、修复2小时、修复2天和修复5天这四个组。 2.2. 下颌修复过程的形态观察取对照和3个实验组的下颌组织样本，放入戊二醛固定液中，4℃条件下固定24小时，以10%为梯度用乙醇溶液进行脱水处理，每次脱水时间为20分钟，样品用100%乙醇脱水后用丙酮进行置换乙醇的处理，置换5分钟后将试验样品置于临界点干燥仪进行干燥处理，之后用离子溅射仪(HITACHI-E1010)进行喷金处理，然后进行扫描电镜(HITACHI-S3400N II型)观察。 2.3. 斑马鱼脑部、下颌组织和肝脏部位的小分子化合物分析剪除下颌后第2小时、第2天和第5天，剪取斑马鱼的脑部、下颌以及肝脏组织，称重后迅速加液氮冷冻，匀浆并加入提取试剂(甲醇-氯仿水溶液)，在零下20℃静置提取1小时，旋涡振荡后在12,000 rpm、4℃条件下离心10分钟，取上层清液于气相色谱瓶中，低温干燥后样品进行硅烷化处理，用GC-MS进行分析。仪器为安捷伦7890气相色谱和5975C质谱仪组成的气质联用仪，色谱柱为DB-17MS，进样口温度260℃，起始温度50℃，以10℃/min为梯度升到310℃，质谱离子源为EI，结果以全扫描模式进行监测，扫描范围质核比(m/z)从55到650。数据统计用spss statistics 20进行分析，用ANOVA进行不同试验组的差异性分析，Tukey检验进行各时间点实验组的两两比较分析。 3. 结果 3.1. 斑马鱼下颌修复过程中修复表面组织的微观观察斑马鱼下颌被剪除1/3的组织后即开始了修复的过程，到第5天的时候被剪除的组织从外部观察基本上都已恢复。由于试验样本一旦取样并被戊二醛溶液固定并用来进行观察便意味着无法继续生长，所以下图(图1)所呈现的并非同一条鱼。多条斑马鱼下颌被剪除的部位略有差异，但基本上整个下颌在第五

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斑马鱼中脑微细结构及相关免疫组化反应

畜牧与兽医２０１５年第４７卷第１２期・８９・

斑马鱼中脑微细结构及相关免疫组化反应

陈微１，章琳俐１，刘仪１，张茜１，杨平１，

胡建华２，高诚２，陈秋生ｈ，林金杏２＋

（１．南京农业大学动物医学院，江苏南京２１００９５；２．上海实验动物研究中心，上海２０１２０３）

摘要：为深入了解斑马鱼中脑的微细结构，采用光镜技术对斑马鱼中脑结构进行观察研究，并利用免疫组化反应显示脑源性神经营养因子（ｂｒａｉｎ—ｄｅｒｉｖｅｄｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ，ＢＤＮＦ）和ＣＤ３４的分布特征。选用成年ＡＢ型斑马鱼，对其中脑连续切片后进行ＨＥ染色。观察辨认中脑神经核团结构，包括有视顶盖、半环枕、被盖、中央层、边缘层、纵枕等十多个核团，并与其他鱼类进行比较。根据试验结果绘制出斑马鱼中脑结构概念图。免疫组化试验观察ＢＤＮＦ和ＣＤ３４都分布在斑马鱼中脑视顶盖边缘层和中央层交界处。本次结果可为斑马鱼神经生物学模型的建立与应用提供有效的理论基础。关键词：斑马鱼；中脑；结构；ＢＤＮＦ；ＣＤ３４；免疫组化中图分类号：￥９１７．４文献标志码：Ａ文章编号：０５２９－５１３０（２０１５）１２—００８９－０５

目前，斑马鱼作为一种模式动物，缺乏详细的解

剖和组织学参考，亟需建立其机体重要组织脏器的形

态标准。斑马鱼组织细胞学数据的匮乏，阻滞了斑马

鱼作为模式动物的进一步应用…。组织学检查能够

判断动物主要器官的结构异常和组成变化，其平台和

结构模式的建立，对斑马鱼的应用推广有极大促进作

用，能提供正常组织的参考。因此，本研究应用光学

显微镜对斑马鱼中脑ＨＥ染色切片观察，分析中脑各

个核团细胞形态特征，并与其他鱼类脑组织核团进行

比较，为斑马鱼相关病理毒理学研究提供正常组织形

态学参考。

脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ），是神经生长因

子家族成员之一。ＢＤＮＦ广泛分布于中枢及外周神经

系统，而对ＢＤＮＦ在斑马鱼脑中的分布研究不多。阿

尔茨海默氏症呤１的形成与．ＢＤＮＦ的表达量有关，ＢＤ—

《典型酚类抗氧化剂对斑马鱼的神经毒性效应研究》范文

《典型酚类抗氧化剂对斑马鱼的神经毒性效应研究》篇一

一、引言

随着现代工业的快速发展，环境污染问题日益严重，尤其是化学物质对水生生物的毒性影响引起了广泛关注。酚类化合物作为一类常见的环境污染物，具有抗氧化性，同时对生物体可能产生毒性效应。其中，典型酚类抗氧化剂因其在食品、化妆品和工业领域广泛应用而备受关注。斑马鱼作为一种常见的模式生物，被广泛应用于生态毒理学研究中。本研究以典型酚类抗氧化剂为研究对象，探讨其对斑马鱼的神经毒性效应，以期为环境风险评估和生态保护提供科学依据。

二、材料与方法

1. 材料

（1）酚类抗氧化剂：选择几种典型的酚类抗氧化剂，如丁基羟基茴香醚（BHA）、丁基羟基甲苯（BHT）等。

（2）斑马鱼：选取健康、年龄相近的斑马鱼。

2. 方法

（1）暴露实验：将斑马鱼暴露于不同浓度的酚类抗氧化剂溶液中，设置对照组和实验组，观察斑马鱼的行为变化及存活情况。

（2）神经毒性检测：通过电生理学方法、行为学观察及组织学检测等方法，检测斑马鱼神经系统的毒性效应。（3）数据统计与分析：采用SPSS软件进行数据统计与分析，比较各组间的差异。

三、结果与分析

1. 行为学观察

通过观察发现，暴露于酚类抗氧化剂溶液中的斑马鱼表现出异常行为，如活动减少、游泳迟缓、躲避反应减弱等。随着浓度的增加，这些异常行为的发生率也逐渐增加。

2. 神经毒性检测

（1）电生理学检测：通过检测斑马鱼神经元的电生理活动发现，暴露于酚类抗氧化剂溶液中的斑马鱼神经元兴奋性降低，传导速度减慢。

（2）组织学检测：通过观察斑马鱼脑组织切片发现，暴露于高浓度酚类抗氧化剂溶液中的斑马鱼脑组织出现神经元损伤、胶质细胞增生等病理变化。

3. 数据统计与分析

通过SPSS软件对数据进行统计与分析，发现暴露于酚类抗氧化剂溶液中的斑马鱼与对照组相比，神经毒性效应具有显著性差异。随着浓度的增加，神经毒性效应逐渐增强。

四、讨论

本研究结果表明，典型酚类抗氧化剂对斑马鱼具有神经毒性效应。这可能与酚类抗氧化剂干扰神经递质的传递、破坏神经元结构及功能有关。此外，不同浓度的酚类抗氧化剂对斑马鱼的神经毒性效应存在差异，表明浓度与毒性之间存在一定的剂量-效应关系。因此，在环境风险评估中，应充分考虑酚类抗氧化剂的浓度及其对水生生物的潜在影响。

斑马鱼尾鳍-理想的再生研究模型

学术论坛

154生物技术世界 BIOTECHWORLD生物技术

世界

1 引言

再生是指由基因组、细胞、微生物和生态系统对在自然环境下

所造成的自身损伤的一种重建、恢复和发育的过程,从细菌到人类,

任何物种都有再生能力。人类在成年后对损伤的细胞、组织乃至器

官的再生能力非常有限。科学家们希望通过对模式动物再生过程的

研究,找到可以修复人类受损组织的方法。

近年来,斑马鱼由于其自身明显的优势,越来越受到生物学家

们的关注。斑马鱼又名蓝条鱼、花条鱼,属鲤科短担尼尔属,原产于

印度、孟加拉国,是一种常见的热带鱼[1]。它具有以下几大优势:①其

体型纤细,具暗蓝与银色纵条纹,成体长3-4cm,对水质要求不高;②

斑马鱼的受精过程在体外进行, 且受精卵发育迅速,在24小时内就

可发育成形;③胚胎发育透明,可非常方便地观察其整个发育过程;

④性成熟周期短,孵出后约3个月达到性成熟,成熟鱼每隔几天可产

卵200-400枚;⑤基因与人类的相似度达87%,能模拟约2000种人类

斑马鱼正常肝脏显微形态和超微结构的初步观察

Ｆｅｂ．２０１０．３０（１）　实验动物与比较医学Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ａｎｉｍａｌ　ａｎｄ　Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　１７　

ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７４—５８１７．２０１０．０１．００５　

斑马鱼正常肝脏显微形态和超微结构的初步观察　

初晓红　，濮俊毅　，ｚ．３，包慧君１，胡建华２，３，高诚ｚ－３，　姚一琳１，徐春生１　覃君慧－，陈秋生－　

（１．南京农业大学动物医学院，南京２１００９５；　２．上海实验动物研究中心，上海２０１２０３；　３．上海市计划生育科学研究所，上海２０００３２）　

【摘要］　目的观察与分析斑马鱼肝脏的显微和超微结构。方法光镜和透射电镜观察组织切片。　结果斑马鱼肝脏没有典型的门管区，静脉和胆管随机地分布在肝实质中，很难观察到动脉。肝　

板由两层并列的肝细胞排列成双层板状结构，以中央静脉为中心呈放射状分布，在肝板（肝细胞索）　之间是血窦，肝细胞索呈弯曲、分支和吻合状态　肝细胞核大而圆，核仁分区明显，核孔数目多，　

且密度大，呈现细胞代谢活跃旺盛的形态　胞质中粗面内质网（ＲＥＲ）ｇ￣Ｌ有管状结构也有扁平囊状　结构，扁平囊状结构的ＲＥＲ呈区域化的层层排列，可达二十余层。线粒体成群分布，并且与ＲＥＲ　紧密接触，为ＲＥＲ合成蛋白质提供能量。电镜观察发现当细胞质富含线粒体、ＲＥＲ、核糖体时，　

核孔的数目多，细胞质内出现一定量的溶酶体，糖原在细胞质内有少量的聚集。当细胞质内有大　量的糖原分布时，则核孔的数目较少，且细胞嚣也较少。胆管系统在肝脏内呈树枝状分布，胆小　

管包括细胞内胆小管和细胞间胆小管，细胞内胆小管腔内的微绒毛明显多于细胞间胆小管。本文　也对内皮细胞、贮脂细胞、红细胞和淋巴细胞进行了描述。并对斑马鱼肝脏的结构与其他硬骨鱼　类进行了比较。结论斑马鱼肝细胞排列方式与其他硬骨鱼类有一定差异，也与前人的报道并不　完全相同，这种差异和不同与动物种类和研究方法有一定关系。肝细胞的超微结构特征，在形态　

成年斑马鱼脊髓损伤模型的制备和评估

邓豪;滕益霖;刘槃;席德双;宗少晖

【期刊名称】《广西医科大学学报》

【年(卷),期】2024(41)2

【摘要】目的:建立一种成年斑马鱼脊髓损伤(SCI)模型。方法:将成年斑马鱼随机分为正常组、假手术组和SCI组。SCI组进行脊髓完全横断手术,假手术组对斑马鱼的脊髓只暴露而不切断,正常组不做特殊处理。通过测试处理后斑马鱼的自由游泳能力和顺行轴突追踪来评估神经再生的情况。结果:假手术组与正常组斑马鱼5

min游泳路径的平均距离比较,差异无统计学意义(P>0.05),与第1周相比,SCI组斑马鱼第6周的5 min游泳路径的平均距离显著增加(P<0.05)。顺行神经示踪显示SCI组斑马鱼在损伤后2周出现可观察的轴突恢复。结论:成年斑马鱼具有显著的SCI恢复能力,本实验建立的成年斑马鱼SCI模型技术成熟、容易复制,可应用于SCI的相关研究。

【总页数】6页(P241-246)

【作者】邓豪;滕益霖;刘槃;席德双;宗少晖

【作者单位】广西医科大学再生医学与医用生物资源开发应用省部共建协同创新中心;广西医科大学第一附属医院脊柱骨病外科;新乡医学院第三附属医院骨科

【正文语种】中文

【中图分类】R651

【相关文献】 1.成年斑马鱼脊髓损伤修复中BDNF/TrkB的表达研究2.成年斑马鱼脊髓修复中脑内vegf基因的表达变化3.成年斑马鱼脊髓损伤修复中脑gdnf 和nos 基因的表达4.鼠李糖乳杆菌对斑马鱼脊髓损伤后肠道炎症的抑制作用及其机制5.斑马鱼脊髓损伤后细胞因子和再生相关分子的表达分析

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斑马鱼模型的基因组及其在发育研究中的应用

斑马鱼（Danio rerio）在科学界已经成为了广泛使用的模式生物之一，其具有繁殖快、易于维护、生长快等特点，可以在研究发育生物学、遗传学、神经学等领域发挥重要的作用。斑马鱼的基因组研究与分析，更是为生物学研究提供了丰富的资源。本文将介绍斑马鱼基因组的构成及其在发育研究中的应用。

一、斑马鱼基因组的构成

斑马鱼的基因组约为1.5亿个碱基对，分为25对染色体。这种基因组主要由DNA组成，DNA又由核苷酸组成，核苷酸包括葡萄糖、磷酸和四种碱基（腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶和鳕嘧啶）。

与其它生物一样，斑马鱼的基因组也可以被分为编码区和非编码区，编码区指的是直接编码功能蛋白的DNA序列，而非编码区则指由DNA转录产生但不被翻译成蛋白质的RNA序列。通过对斑马鱼基因组的研究，科学家们已经发现了许多与人类病理有关的基因（如自闭症等）以及与发育有关的基因。

二、斑马鱼在发育研究中的应用

斑马鱼在发育研究中的应用非常广泛。典型的应用案例包括模拟人类疾病、研究肢体再生及衰老机制等。其中，模拟人类疾病是利用斑马鱼具有与人类基因组高度相似的特性，来研究某些疾病。例如，斑马鱼可以被制成自闭症模型，通过这一模型可以研究自闭症的神经学特性以及潜在的药物治疗。将这些与人类疾病相关的斑马鱼研究结果应用到临床上，有望为人们提供新的预防和治疗方法。

肢体再生也是斑马鱼发育研究的一方面。斑马鱼的可再生能力非常高，能够在受损的组织区域新生组织甚至再生失去的组织。科学家们通过对斑马鱼肢体再生过程中参与的基因进行研究，有望为人类组织工程学领域提供新的思路和策略。此外，斑马鱼还能被用于衰老研究。斑马鱼短时间的寿命与其生长发育周期短、繁殖快、适应能力强等特点有关，这使得斑马鱼成为了衰老研究领域的理想候选。科学家们通过对斑马鱼衰老过程中参与的基因进行研究，可以为人类寿命延长和老年病的治疗提供新的思路和策略。

Il34拯救甲硝唑导致的斑马鱼中枢神经系统轴突再生障碍

刘吉祥;赖思婷;白晶;徐进

【期刊名称】《遗传》

【年(卷),期】2024(46)6

【摘要】甲硝唑(metronidazole,MTZ)是临床常用的抗感染药物,同时在科学研究中被用作细胞靶向消融系统的前体药物,具有极高的应用价值。但MTZ会引起一定程度的神经毒性症状,目前临床及科研使用过程中也缺乏规避其毒性的有效手段,这在一定程度上限制了其应用。因此,探究MTZ引起神经症状的具体机制并探讨应对措施将更大程度地发挥MTZ的实用价值。本研究利用斑马鱼(Danio rerio)脊髓损伤再生模型确认了MTZ的神经毒性导致斑马鱼中枢神经系统轴突再生障碍,通过在斑马鱼中枢神经系统中过表达il34消除了MTZ对轴突再生的抑制,并证明了这种抗MTZ神经毒性的促再生作用不是由白细胞介素34(interleukin 34,Il34)趋化的过量巨噬细胞/小胶质细胞所介导。通过转录组测序分析组间差异表达基因的GO富集分析发现,Il34通过促进细胞间的黏附和细胞定位等生物学过程抗MTZ神经毒性从而促进脊髓损伤修复。综上所述,本研究揭示了MTZ神经毒性的可能原因,为消除MTZ毒性提供了一个新的视角。

【总页数】12页(P478-489)

【作者】刘吉祥;赖思婷;白晶;徐进

【作者单位】华南理工大学医学院发育生物学与再生医学团队

【正文语种】中文【中图分类】R73

【相关文献】

1.先天性纯红细胞再生障碍性贫血斑马鱼模型相关microRNA的组学研究2.中枢神经系统轴突再生障碍信号分子的研究进展3.氯化汞对斑马鱼发育的毒性作用及对轴突蛋白2a基因表达的影响4.中枢神经损伤后早期轴突再生的障碍:髓磷脂抑制轴突再生的信号转导机制5.孤独症谱系障碍相关转录因子EB基因罕见变异导致神经元轴突发育障碍

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邻甲酚对斑马鱼成鱼急性毒性及组织显微结构的影响

宋兴超;江倩倩;甘真博;梁正其;梅杰;巴家文

【期刊名称】《南方农业学报》

【年(卷),期】2024(55)1

【摘要】【目的】明确邻甲酚对斑马鱼成鱼的急性毒性及其对肌肉、鳃和肝脏组织显微结构的影响,为邻甲酚对斑马鱼毒性效应的分子机理研究与环境安全评价和生态风险评估提供理论依据。【方法】采用静水式方法,将斑马鱼成鱼分为6组,暴露于0(对照)、15.00、19.74、25.98、34.19和45.00 mg/L邻甲酚溶液中,记录染毒24、48、72和96 h的各组斑马鱼中毒症状和死亡尾数,计算死亡率、半致死浓度(LC_(50))和安全浓度(SC),并进行安全性评价,采用组织病理学技术分析不同浓度邻甲酚对斑马鱼肌肉、鳃和肝脏组织显微结构的影响。【结果】与对照组相比,45.00 mg/L(最高浓度)组斑马鱼急性中毒症状表现为呼吸困难、狂游、抽搐、轻微侧翻且对外周刺激反应迟钝,逐渐失去平衡而静卧水底,24h内全部死亡。邻甲酚对斑马鱼成鱼24、48、72和96h的LC_(50)分别为34.721、30.079、27.123和27.092 mg/L,SC为6.612mg/L,毒性等级为低毒。组织病理学分析表明,15.00和19.74mg/L组斑马鱼染毒96h后,肌肉、鳃和肝脏组织显微结构无明显变化。邻甲酚浓度达34.19和45.00 mg/L时,斑马鱼肌肉组织的肌纤维逐渐断裂、肿胀和坏死;鳃组织中鳃小片末端肿大出血,上皮细胞肿胀、脱落和损伤,红细胞数量明显增多,细胞排列混乱;肝脏出现大面积细胞空泡化,肝细胞核萎缩变形、溶解或偏移,导致肝细胞呈坏死状态。【结论】邻甲酚对斑马鱼成鱼的毒性效应随着暴露浓度升高、时间延长而增强,属于低毒性酚类污染物。高浓度邻甲酚暴露可导致斑马鱼成鱼肌肉、鳃和肝脏组织显微结严重损伤。【总页数】9页(P290-298)

【作者】宋兴超;江倩倩;甘真博;梁正其;梅杰;巴家文

神经组织的实验报告(3篇)

第1篇

一、实验目的

1. 了解神经组织的结构特征。

2. 观察神经元的形态结构，包括细胞体、树突和轴突。

3. 掌握神经纤维和神经胶质细胞的形态特点。

4. 理解神经组织在神经传导中的作用。

二、实验原理

神经组织是构成神经系统的基础，主要包括神经元和神经胶质细胞。神经元是神经系统的基本功能单位，具有接受、传导和传递信息的功能。神经胶质细胞则具有支持、营养和保护神经元的作用。

三、实验材料与仪器

1. 实验材料：豚鼠大脑切片、神经组织染色液、显微镜、载玻片、盖玻片等。

2. 仪器：显微镜、切片机、染色机、数码相机等。

四、实验方法

1. 切片：将豚鼠大脑组织进行切片，厚度约为10微米。

2. 染色：将切片浸入神经组织染色液中，进行染色处理。

3. 观察：使用显微镜观察切片，记录神经组织的结构特征。

4. 拍照：使用数码相机记录观察到的图像。

五、实验步骤

1. 将豚鼠大脑组织固定在切片机上，调整切片机参数，进行切片。

2. 将切片放入染色液中，进行染色处理，使神经组织染色。

3. 取出切片，滴加少量生理盐水，使切片展平。

4. 将切片放置在载玻片上，用盖玻片覆盖。 5. 使用显微镜观察切片，观察神经组织的结构特征，包括神经元、神经纤维和神经胶质细胞。

6. 使用数码相机记录观察到的图像。

六、实验结果与分析

1. 神经元：神经元由细胞体、树突和轴突组成。细胞体呈圆形或椭圆形，含有细胞核。树突短而分支多，负责接收来自其他神经元的信号。轴突长而分支少，负责将信号传递给其他神经元或肌肉、腺体等效应器。

2. 神经纤维：神经纤维是神经元轴突的延伸，外面包裹着髓鞘。髓鞘具有绝缘作用，可以减少神经冲动在传导过程中的能量损失。

3. 神经胶质细胞：神经胶质细胞包括星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞。星形胶质细胞具有支持、营养和保护神经元的作用；少突胶质细胞主要负责形成髓鞘；小胶质细胞具有吞噬作用，可以清除神经系统中的细胞碎片和病原体。

斑马鱼的软骨发育及其矿化过程

清华大学毕业设计论文

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摘要

斑马鱼，作为发育生物学研究的最佳脊椎动物模型，为人类的相关研究提供了重要的参考依据。本文主要讨论了斑马鱼幼体的软骨，特别是脊椎软骨的发育过程及其软骨的超微结构特点。为转基因、基因突变鱼类的研究提供了对比依据。

本文主要讨论了斑马鱼脊椎软骨的发育进程，以及软骨细胞特别是脊索旁软骨的排列，形貌，大小及其显微结构特点和中胚层分化的显微形貌。

斑马鱼脊椎软骨在配卵后2～3天开始发育，围绕在脊索周围，并逐渐向神经管和血管方向延伸。斑马鱼脊椎软骨沿体节发育，腹部以前的体节在6天已基本分化为软骨细胞，并且随着时间的推移，沿体节向尾部方向的生骨节逐步分化为软骨细胞，在1个半月左右的时间，软骨组织的分化基本完成。斑马鱼的软骨组织排列整齐，大多数细胞大小在5－20μm范围内。斑马鱼的软骨组织为透明软骨，胶原纤维为II型胶原，没有典型的周期结构，含量很少。

在TEM的观察中发现，斑马鱼的肌肉组织分化较早，在3天已基本分化完成。而体干部的脊索旁仍为中胚层的间叶细胞，为软骨细胞的原基，在分化成软骨细胞的过程中，首先是在形状和排列上趋于整齐和规则。斑马鱼的骨化方式为软骨骨化。软骨细胞的细胞质中富含大量的线粒体和内质网。在细胞质中还有大量直径为100-400nm的囊泡，紧密排列在一起，起传输物质的作用。此外，脊髓处的细胞，其细胞核较大，细胞质很少，有别于软骨细胞。并且该处细胞有部分已死亡，被其它细胞所代替。

关键词：软骨细胞，发育，显微结构

清华大学毕业设计论文

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Abstract

Zebrafish provides an important referenced foundation for the relative research as

the best pattern of vertebrate in developing biology. In this paper the process of

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