疲劳型亚健康小鼠模型的研制
摇广东省自然科学基金资助项目（编号：园远员园缘员员缘），广州市科技计划项目（编号：圆园园远在猿原耘缘园缘员原猿，圆园园怨在员原耘圆猿员）摇▲在读博士研究生摇△通信作者。罗仁，教授，主任医师，博士研究生导师，电话：园圆园原远员远源员远苑员，耘原皂葬蚤造：造怎燥则藻灶源员远苑员岳赠葬澡燥燥援糟燥皂援糟灶；赵晓山，副主任医师，电话：园圆园原远员远源员远苑员，耘原皂葬蚤造：扎澡葬燥曾泽圆园园源岳赠葬澡燥燥援糟燥皂援糟灶疲劳型亚健康小鼠模型的研制刘艳艳员▲，程静茹员，余克强员，谭为员，欧阳明子员，陈淑娟圆，黄建华猿，罗仁员△，赵晓山员△员南方医科大学南方医院中医科（广州缘员园缘员缘）；广州军区广州总医院圆肾内科，猿呼吸内科（广州缘员园园员园）摇摇【摘要】摇目的摇研制疲劳型亚健康小鼠模型。方法摇疲劳型亚健康小鼠模型制备：强迫小鼠水中站立愿澡辕凿，分别观察连续造模缘、怨、员圆、员远凿时小鼠行为学表现，以力竭游泳时间反映其疲劳程度，结合血浆生化、血常规及病理组织学检查等，确定造成疲劳型亚健康的最佳时间。疲劳型亚健康小鼠模型的评价：对上述创建的疲劳型亚健康小鼠模型进行评价，观察模型小鼠的疲劳持续时间。结果摇疲劳型亚健康小鼠模型制备：模型各组游泳时间与对照组比较显著下降（孕越园郾园园园）。与对照组小鼠比较，造模员远凿组月哉晕、粤蕴栽、粤杂栽、栽郧改变明显（孕约园郾园缘）；其余血生化、血常规及病理学检查未见明显异常。疲劳型亚健康小鼠模型的评价：模型小鼠力竭游泳时间明显下降；去除造模因素，休息恢复苑凿后其力竭游泳时间有增长，与对照组比较差异有统计学意义（孕约园郾园缘）；至恢复员源凿后，小鼠力竭游泳时间与对照组比较差异无统计学意义（孕跃园郾园缘）。结论摇采用强迫小鼠水中站立愿澡辕凿，连续怨凿，成功制备疲劳型亚健康小鼠模型。该模型的稳定性、重复性较好，为疲劳型亚健康病理机制的研究及相关药物的筛选提供技术平台。【关键词】摇疲劳型亚健康；动物模型；小鼠悦燥灶泽贼则怎糟贼蚤燥灶燥枣枣葬贼蚤早怎藻原贼赠责藻泽怎遭原澡藻葬造贼澡皂燥怎泽藻皂燥凿藻造援摇蕴陨哉再葬灶原赠葬灶☆，悦匀耘晕郧允蚤灶早原则怎，再哉运藻原择蚤葬灶早，栽粤晕宰藻蚤，韵哉再粤晕郧酝蚤灶早原扎蚤，悦匀耘晕杂澡怎原躁怎葬灶，匀哉粤晕郧允蚤葬灶原澡怎葬，蕴哉韵砸藻灶，在匀粤韵载蚤葬燥原泽澡葬灶援☆阅藻责葬则贼皂藻灶贼燥枣栽则葬凿蚤贼蚤燥灶葬造悦澡蚤灶藻泽藻酝藻凿蚤糟蚤灶藻，晕葬灶枣葬灶早匀燥泽责蚤贼葬造，杂燥怎贼澡藻则灶酝藻凿蚤糟葬造哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠，郧怎葬灶早扎澡燥怎缘员园缘员缘，悦澡蚤灶葬悦燥则则藻泽责燥灶凿蚤灶早葬怎贼澡燥则：蕴哉韵砸藻灶，栽藻造：园园愿远原圆园原远员远源员远苑员，耘原皂葬蚤造：造怎燥则藻灶源员远苑员岳赠葬澡燥燥援糟燥皂援糟灶；在匀粤韵载蚤葬燥泽澡葬灶，栽藻造：园园愿远原圆园原远员远源员远苑员，耘原皂葬蚤造：扎澡葬燥曾泽圆园园源岳赠葬澡燥燥援糟燥皂援糟灶援摇摇【粤遭泽贼则葬糟贼】摇韵遭躁藻糟贼蚤增藻摇栽燥藻泽贼葬遭造蚤泽澡葬灶凿藻增葬造怎葬贼藻贼澡藻枣葬贼蚤早怎藻原贼赠责藻泽怎遭原澡藻葬造贼澡皂燥怎泽藻皂燥凿藻造援酝藻贼澡燥凿泽摇耘曾责藻则蚤鄄皂藻灶贼员：酝蚤糟藻蚤灶皂燥凿藻造早则燥怎责泽憎藻则藻枣燥则糟藻凿贼燥泽贼葬灶凿蚤灶憎葬贼藻则愿澡燥怎则泽责藻则凿葬赠藻葬糟澡枣燥则缘，怨，员圆葬灶凿员远凿葬赠泽援栽澡藻责藻则枣燥则皂鄄葬灶糟藻泽燥枣皂蚤糟藻遭藻澡葬增蚤燥则泽，凿藻早则藻藻燥枣枣葬贼蚤早怎藻，责葬贼澡燥造燥早蚤糟葬造泽蚤早灶泽蚤灶贼蚤泽泽怎藻，遭造燥燥凿遭蚤燥糟澡藻皂蚤泽贼则赠则藻泽怎造贼泽葬灶凿燥贼澡藻则蚤灶凿蚤糟葬贼燥则泽憎藻则藻葬灶葬造赠扎藻凿贼燥凿藻贼藻则皂蚤灶藻贼澡藻燥责贼蚤皂葬造贼蚤皂藻枣燥则贼澡蚤泽枣葬贼蚤早怎藻原贼赠责藻泽怎遭原澡藻葬造贼澡皂燥凿藻造援耘曾责藻则蚤皂藻灶贼圆：耘增葬造怎葬贼蚤燥灶燥枣贼澡藻皂燥凿藻造憎葬泽责藻则枣燥则皂藻凿憎蚤贼澡贼澡藻贼藻泽贼燥枣苑豫憎藻蚤早澡贼原造燥葬凿藻凿枣燥则糟藻凿泽憎蚤皂援砸藻泽怎造贼泽摇耘曾责藻则蚤皂藻灶贼员：陨灶糟燥皂责葬则蚤泽燥灶憎蚤贼澡糟燥灶贼则燥造早则燥怎责，贼澡藻藻曾澡葬怎泽贼蚤增藻泽憎蚤皂皂蚤灶早贼蚤皂藻憎葬泽泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠泽澡燥则贼藻灶藻凿蚤灶葬造造皂燥凿藻造早则燥怎责泽（孕越园郾园园园）援杂蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼葬造贼藻则葬贼蚤燥灶泽燥枣月哉晕，粤蕴栽，粤杂栽葬灶凿栽郧憎藻则藻燥灶造赠燥遭泽藻则增藻凿蚤灶皂燥凿藻造员远凿早则燥怎责（孕约园郾园缘），灶燥泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼糟澡葬灶早藻憎葬泽则藻增藻葬造藻凿蚤灶贼澡藻燥贼澡藻则皂燥凿藻造早则燥怎责泽援耘曾责藻则蚤皂藻灶贼圆：栽澡藻藻曾澡葬怎泽贼蚤增藻泽憎蚤皂皂蚤灶早贼蚤皂藻憎葬泽泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠则藻凿怎糟藻凿蚤灶皂燥凿藻造皂蚤糟藻援粤造贼澡燥怎早澡贼澡藻枣葬贼蚤早怎藻凿藻早则藻藻葬遭葬贼藻凿葬枣贼藻则葬则藻泽贼燥枣苑凿葬赠泽枣则藻藻燥枣皂燥凿藻造蚤灶早枣葬糟贼燥则泽，泽憎蚤皂皂蚤灶早贼蚤皂藻憎葬泽泽贼蚤造造泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠泽澡燥则贼藻则贼澡葬灶灶燥则鄄皂葬造造藻增藻造（孕约园郾园缘）援匀燥憎藻增藻则，贼澡藻泽憎蚤皂皂蚤灶早贼蚤皂藻遭藻糟葬皂藻灶燥泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻糟燥皂责葬则藻凿憎蚤贼澡贼澡葬贼燥枣灶燥则皂葬造糟燥灶贼则燥造皂蚤糟藻憎蚤贼澡葬则藻糟燥增藻则赠燥枣员源凿葬赠泽（孕跃园郾园缘）援悦燥灶糟造怎泽蚤燥灶摇云燥则糟蚤灶早皂蚤糟藻贼燥泽贼葬灶凿蚤灶憎葬贼藻则愿澡燥怎则泽责藻则凿葬赠枣燥则怨凿葬赠泽糟葬灶泽怎糟糟藻泽泽枣怎造造赠藻泽贼葬遭造蚤泽澡贼澡蚤泽皂燥怎泽藻皂燥凿藻造燥枣枣葬贼蚤早怎藻原贼赠责藻泽怎遭原澡藻葬造贼澡，憎蚤贼澡泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼泽贼葬遭蚤造蚤贼赠葬灶凿则藻责则燥凿怎糟蚤遭蚤造蚤贼赠，责则燥增蚤鄄凿蚤灶早枣燥怎灶凿葬贼蚤燥灶枣燥则枣怎则贼澡藻则泽贼怎凿赠燥枣枣葬贼蚤早怎藻原贼赠责藻泽怎遭原澡藻葬造贼澡援【运藻赠憎燥则凿泽】摇枣葬贼蚤早怎藻原贼赠责藻泽怎遭原澡藻葬造贼澡；皂蚤糟藻；葬灶蚤皂葬造皂燥凿藻造摇摇亚健康是现阶段我国公共卫生的重要问题之一。流行病学调查［员原圆］显示，疲劳是亚健康最常见的临床表现之一，疲劳型亚健康是亚健康的主要类型［猿］。疲劳型亚健康是以长时间疲劳（即亚病理性疲劳或亚临床性疲劳）为中心表现的症状群，包括疲倦乏力、周身不适、失眠多梦等，但是上述表现不是由疾病引起来的。目前认为其发生与心理压力大、超负荷工作、生活方式不良等因素有关［源原缘］，但迄今尚未见有理想的疲劳型亚健康动物模型，这为深入研究带来困难。圆园园怨年员月至圆园员园年员月本研究在既往研究［远原苑］的基础上，拟采用强迫小鼠水中站立一定时间的造模方式建立动物模型并进行评价。员摇材料与方法员援员摇主要仪器与试剂摇小鼠饲养盒圆怨糟皂伊员愿糟皂伊员缘糟皂（苏州新区枫桥实验动物笼具厂）；恒温游泳箱（直径苑缘糟皂，高员园园糟皂）；韵造赠皂责葬泽粤哉愿园园全自动生化分析仪；耘责责藻灶凿燥则枣微量移液器；自制负重用铅坠、电子天平、秒表、温度计。甲醛（分析纯），汕头市光华化学厂；无水乙醇（分析纯），汕头市光华化学厂。员援圆摇实验动物与条件摇杂孕云级健康雄性运酝小鼠圆远园只（圆园园只用于实验员，远园只用于实验圆），体重员愿耀圆圆早，由广东省医学动物实验中心提供，动物质量许可·员圆·广东医学摇圆园员圆年员月第猿猿卷第员期摇郧怎葬灶早凿燥灶早酝藻凿蚤糟葬造允燥怎则灶葬造摇允葬灶援圆园员圆，灾燥造援猿猿，晕燥援员
万方数据证号：杂悦载运（粤）圆园园愿原园园园圆。实验前小鼠适应性饲养员周，室温圆圆耀圆远益，相对湿度源园豫耀远园豫，明暗交替员圆澡。所有小鼠分盒饲养，缘只辕盒，自由饮水，饲普通饲料。实验开始前小鼠适应性游泳锻炼源凿，缘皂蚤灶辕凿，水深猿园糟皂，水温圆缘益。动物室保持安静，实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。员援猿摇实验方法员援猿援员摇疲劳型亚健康小鼠模型制备（实验员）摇实验开始前员凿，对小鼠进行力竭游泳（负苑豫体重），记录游泳时间。实验前员凿禁食，称重，剔除力竭游泳时间及体重差异较大的小鼠，筛选出运酝小鼠员缘园只，随机分为员缘组，其中用于力竭游泳测试的有员园组：包括对照组及模型园、缘、怨、员圆、员远凿不同时间各缘组，另外用于测试血生化、血常规及病理学检查的有缘组：包括对照组、模型缘、怨、员圆、员远凿组。每组员园只，缘只辕盒。参照文献［愿］方法，结合预实验结果，对模型各组小鼠采用强迫水中站立愿澡辕凿的方式造模。具体方法：每天上午怨：园园，将模型各组小鼠放入水深为园郾愿糟皂的小鼠饲养盒内造模，当天下午员苑：园园，将其从水盒中拿出，正常饲养；对照组不作任何处理，按常规饲养方法饲养。员援猿援圆摇疲劳型亚健康小鼠模型的评价（实验圆）摇实验分组前处理同实验员。剔除力竭游泳时间及体重差异较大的小鼠，筛选出运酝小鼠源园只，随机分为源组：对照组、模型组及模型恢复苑、员源凿组。模型各组按预实验及实验员的结果，强迫小鼠水中站立愿澡辕凿，连续怨凿，制备疲劳型亚健康模型。造模结束后，对模型组及对照组进行力竭游泳（负苑豫体重），测定其疲劳程度。模型恢复各组造模结束后，中止造模因素，分别于造模结束后苑、员源凿进行负重力竭游泳，观察其恢复情况。员援源摇观测指标员援源援员摇小鼠行为学观察摇主要观察实验过程中小鼠的精神状态、活动情况、饮食、二便以及鼻唇、耳、爪等色泽等外观行为变化。员援源援圆摇疲劳程度测定摇测定力竭游泳时间衡量小鼠疲劳程度。用苑豫自身重量的铅坠系于小鼠尾部后，将负重小鼠放入水温圆缘益的水桶中进行力竭游泳测试；力竭游泳标准为小鼠鼻尖沉入水下员园泽［怨］。员援源援猿摇实验室检查摇采用全自动生化分析仪检测小鼠血浆丙氨酸氨基转移酶（粤蕴栽）、门冬氨酸氨基转移酶（粤杂栽）、总蛋白（栽孕）、白蛋白（粤造遭）、球蛋白（郧）、白辕球比值（粤辕郧）、总胆红素（栽月陨蕴）、尿素氮（月哉晕）、血清肌酐（杂糟则）、尿酸（哉粤）、乳酸脱氢酶（蕴阅匀）、α原羟丁酸脱氢酶（匀月阅匀）、肌酸激酶（悦运）、三酰甘油（栽郧）、总胆固醇（栽糟澡）、血总胆汁酸（栽月粤）、钾（运）、钠（晕葬）、氯（悦造）、钙（悦葬）等。血常规分析仪检测血液常规项目。员援源援源摇病理学检查摇实验结束后取实验各组小鼠心、肝、脾、肺、肾、脑、胃、肠等器官组织，固定于源豫多聚甲醛缓冲液中。常规石蜡包埋、切片，匀耘染色进行病理学检查。员援缘摇标本采集摇分别于造模园、缘、怨、员圆及员远凿后，对实验各组相应时间点生化组小鼠禁食，称重，眼眶取血，分别装入生化及血常规管。室温放置猿园皂蚤灶后，员缘园园则辕皂蚤灶离心员园皂蚤灶，上层血清移入耘孕管中，放入原圆园益中保存待测。员援远摇统计学方法摇采用杂孕杂杂员猿郾园统计软件，行析因设计方差分析和单因素方差分析。圆摇结果圆援员摇疲劳型亚健康小鼠模型的制备圆援员援员摇小鼠行为学观察摇实验猿凿，造模各组小鼠未见明显异常，仅尾部皮毛有轻度浸湿。实验缘凿，小鼠烦躁，易激惹，喜撕咬，体重下降尚不明显，尾部浸湿面积增加。实验怨凿，小鼠烦躁消失，精神倦怠，全身皮毛有浸湿现象，浸湿面积员辕猿耀圆辕猿，皮毛灰暗欠光泽，逃避反应降低。实验员圆凿时，精神不振，食量减少，体重下降，大部分小鼠全身浸湿；实验员远凿精神倦怠明显，活动减少，全身皮毛浸湿，欠光泽。对照组小鼠行为表现正常。圆援员援圆摇疲劳程度变化摇模型组小鼠力竭游泳时间随造模时间延长而明显减少，与对照组比较差异有统计学意义（孕约园郾园员），各模型小鼠明显疲劳。对照组各时间点力竭游泳时间比较差异无统计学意义（云越园郾圆园怨，孕越园郾怨圆猿）。见表员。表员摇各组力竭游泳时间比值随着时间延长对照组和模型组的比较珋曾依泽项目园凿缘凿怨凿员圆凿员远凿合计云值孕值对照组员援园园园依园援员远怨员援园圆愿依园援员愿猿员援园员员依园援员缘愿员援园源远依园援员远愿园援怨愿苑依园援员圆源员援园员缘依园援员缘远园援圆园怨园援怨圆猿模型组员援园园园依园援员猿愿▲园援缘怨源依园援员圆圆△▲园援源苑圆依园援员愿源△▲园援猿缘园依园援员员园△▲园援圆苑圆依园援园愿圆△园援缘猿愿依园援圆愿愿源苑援圆圆园园援园园园合计员援园园园依园援员缘园园援愿员员依园援圆远愿园援苑源圆依园援猿圆猿园援远怨愿依园援猿愿猿园援远圆怨依园援猿愿员园援苑苑远依园援猿猿圆员愿援缘猿愿园援园园园云值园援园园园原远援圆怨猿原苑援园圆圆原员园援怨怨圆原员缘援员苑远圆远猿援园远猿云越员怨援缘远圆孕值员援园园园园援园园园园援园园园园援园园园园援园园园园援园园园孕越园援园园园摇主效应，交互效应；△与园凿比较孕约园郾园员；▲与员远凿比较孕约园郾园员圆援员援猿摇血生化结果摇模型员远凿组月哉晕、粤蕴栽、粤杂栽水平升高，栽郧降低，与对照组比较差异有统计学意义（孕约园郾园缘）；模型员圆、怨、缘凿组生化指标未见明显变化，与对照组比较差异无统计学意义（孕跃园郾园缘），见表圆。圆援员援源摇血常规及病理组织切片结果摇模型组小鼠血液中白细胞总数（宰月悦）、淋巴细胞总数（蕴再）、中性粒细胞总数（郧砸）、单核细胞总数（酝韵）、红细胞总数（砸月悦）、血小板总数（孕造贼）、血红蛋白（匀遭）、红细胞平·圆圆·广东医学摇圆园员圆年员月第猿猿卷第员期摇郧怎葬灶早凿燥灶早酝藻凿蚤糟葬造允燥怎则灶葬造摇允葬灶援圆园员圆，灾燥造援猿猿，晕燥援员
复合刺激对亚健康大鼠模型耐疲劳能力及血清SOD、MDA的影响
复合刺激对亚健康大鼠模型耐疲劳能力及血清SOD、MDA的影响
目的：观察复合刺激对亚健康大鼠模型耐疲劳能力及其血清SOD、MDA的影响。方法：采用游泳运动、睡眠剥夺和夹尾刺激等复合因素制造亚健康大鼠模型，检测动物体重、进食量、耐疲劳能力及血清SOD、MDA等指标的变化。结果：模型组动物体重低于正常组，饮水量、进食量均明显少于正常组，5 min内不动时间明显多于正常组，血清SOD活性明显低于正常组，MDA明显高于正常组。结论：复合因素造模法兼顾了亚健康的成因和表现，模型动物的宏观表现和微观指标均具备亚健康的基本特征，该造模方式具有一定的科学性和合理性。
标签：复合刺激；亚健康；耐疲耐；SOD；MDA
亚健康的防治是目前中西医共同关注的问题。缺乏公认的动物模型是制约亚健康研究深入开展的关键问题之一。过劳、睡眠障碍、精神压力过大既是亚健康的诱发因素，又是亚健康的主要表现。因此，课题组采用游泳运动、睡眠剥夺和夹尾刺激等复合因素作用于Wistar大鼠，以模仿亚健康的成因和症状。为了明确其微观机制，正确评价该造模方式的科学性与合理性，课题组又开展了进一步研究。
1 材料与方法
1.1 实验动物 清洁级健康雄性Wistar大鼠，3月龄，雌雄各半，体重（200±20）g，由华中科技大学同济医学院实验动物学部提供，合格证号：1016152。适应性饲养1周后，进行游泳运动初筛，剔除不擅游泳者，完全随机法分为正常组（10只）、模型组（10只）。
1.2 主要仪器及试剂 SOD试剂盒，批号20101113，南京建成生物试剂公司；MDA试剂盒，批号20071017，南京建成生物试剂公司；80-2型离心机，上海手术器械厂；752型紫外光栅分光光度计，山东高密分析仪器厂；YC-300L型医用冷藏箱，中科美菱；FM50型制冰机，北京长流科学仪器公司。
1.3 动物模型的建立 采用应激和运动致疲劳相结合制造动物模型。①运动造模 参考文献［1］稍加改变。制作160 cm×80 cm×60 cm的注水鼠箱，水深30
慢性疲劳综合征动物模型的建立及对血管内皮功能的影响
慢性疲劳综合征动物模型的建立及对血管内皮功能的影响
高怀林;吴以岭;朱慧明;贾振华;李娟;袁国强;吴相春;魏聪;王宏涛
【期刊名称】《中国中医基础医学杂志》
【年(卷),期】2009(015)012
【摘 要】目的:研制慢性疲劳综合征(Chronic Fatigue Syndrome,CFS)动物模型,并观察其血管内皮功能的变化.方法:将Wistar大鼠随机分为正常组与模型组,采用负重力竭游泳的方法建立CFS动物模型并进行评价,检测血管内皮形态及功能变化.结果:模型组大鼠行为出现改变,产生了心理与体力的疲劳状态,基本符合或类似于CFS的临床表现;模型组大鼠光镜、电镜均显示有内皮细胞损伤,血浆内皮素(ET)和血管性假血友病因子(VWF)明显升高(P<0.01);血清一氧化氮(NO)下降(P<0.05).结论:采用负重力竭游泳制作的CFS大鼠模型与CFS发病机制和临床表现基本符合;模型大鼠存在血管内皮功能障碍,为CFS及"过劳死"的防治提供了实验依据.
【总页数】4页(P904-906,919)
【作 者】高怀林;吴以岭;朱慧明;贾振华;李娟;袁国强;吴相春;魏聪;王宏涛
【作者单位】河北医科大学附属以岭医院,石家庄,050091;国家中医药管理局,心脑血管络病重点研究室,石家庄,050035;国家中医药管理局,心脑血管络病重点研究室,石家庄,050035;国家中医药管理局,心脑血管络病重点研究室,石家庄,050035;国家中医药管理局,心脑血管络病重点研究室,石家庄,050035;河北医科大学附属以岭医院,石家庄,050091;国家中医药管理局,心脑血管络病重点研究室,石家庄,050035;国家中医药管理局,心脑血管络病重点研究室,石家庄,050035;国家中医药管理局,心脑血管络病重点研究室,石家庄,050035;国家中医药管理局,心脑血管络病重点研究室,石家庄,050035
【正文语种】中 文
多重应激建立慢性疲劳综合征动物模型的研究
基金项目:国家自然科学基金项目(30270635)资助。通讯作者:李可基,Email:smnkjl@;Tel:010-82801575技术方法多重应激建立慢性疲劳综合征动物模型的研究尹喜玲1肖颖2李可基21北京大学第三医院运动医学研究所(北京100083)2北京大学公共卫生学院营养与食品卫生系摘要目的:采用多重应激刺激建立慢性疲劳综合征动物模型,为筛选治疗慢性疲劳综合征的有效药物提供工作平台。方法:SD大鼠应用束缚加跑台、悬吊加游泳和束缚加游泳等不同组合应激。给以人参水煎剂观察药物反应。结果:3个模型组大鼠的体重和食物利用率明显降低;悬吊游泳组和束缚游泳组大鼠血清睾酮水平较对照组降低737%和565%(P<005),皮质醇水平升高516%和529%(P<005),睾酮/皮质醇(T/C)比值分别下降877%和787%(P<005)。人参能够明显改善动物各系统的功能状态。结论:悬吊或束缚加游泳多重应激的动物表现出与人类慢性疲劳综合征的主要临床症状相似的症状,实验组大鼠灌服人参后症状有缓解。关键词慢性疲劳综合征;应激;睾酮;皮质醇;人参AnimalModelforChronicFatigueSyndromeinRatsYinXiling1,XiaoYing2andLiKeji21InstituteofSportsMedicine,TheThirdHospital,PekingUniversity,Beijing,China1000832DepartmentofNutritionandFoodHygiene,CollegeofPublicHealth,PekingUniversity,Beijing,China100083AbstractObjectiveAnimalmodelwasdevelopedforchronicfatiguesyndrome(CFS)bymulti-stresstoprovideaplatformforscreeningeffectiveremedialdrugsfortreatingCFS.MethodsSDratswereadminis-teredwithdifferentmulti-stress,i.e.,immobilization-running,suspension-swimming,paredwithcontrolgroup,insuspension-swimminggroupandimmobilization-swimminggroup,theserumtestosteronelevelwasdecreased7374%and5646%respectively,theserumcortisollevelwasincreased5155%and5292%respectively,andtheT/Cratiowasdecreased8766%and7874%respectively(P<005).Panaxim-provedthefunctionofeverysysteminratsdistinctly.ConclusionThemodelforCFSbyphysicalstress(swim-ming)combinedwithmentalstress(suspensionorimmobilization)inratsshowedsimilarclinicalsymptomsofCFSandpredictivevaliditytoPanax.Keywordschronicfatiguesyndrome,stress,testosterone,cortisol,ginseng慢性疲劳综合征(ChronicFatigueSyndrome,CFS)是现代节奏紧张的生活方式下出现的一组以长期疲劳(包括体力疲劳和脑力疲劳)为突出表现的全身性症候群[1,2],已经成为当代影响人类健康的一个主要问题。针对CFS的治疗,国内外对植物药的作用非常重视,一些研究证实人参是有效的植物药之一[3]。在目前有关CFS的研究中,建立较理想的CFS动物模型是研究得以深入的关键[4]。关于CFS的动物模型,一些学者采用慢性束缚、电击、社会隔离等中枢应激的方式造模,还有一些学者采用452中国运动医学杂志2005年7月第24卷第4期ChinJSportsMed,July2005,Vol.24,No.4病毒感染模型。CFS的病因及发病机制目前尚无确切定论,据认为与长期精神压力大、体力超负荷等多重应激密切相关[5,6]。患者除表现为慢性疲劳外,常伴有食欲不振、体重下降、免疫功能受损、性功能低下,以及神经精神症状等。因此,用于CFS治疗药物的开发与研究,更好的动物模型应结合中枢和体力多重应激因素,并且能够在免疫、内分泌和代谢等多个系统出现病理性反应。此外,模型还应对公认有效的药物有症状缓解反应。为此,本研究突破以往侧重单因素造模的方式,采用躯体应激和心理应激相结合的方法建立慢性疲劳综合征动物模型,为CFS治疗药物的筛选提供工作平台。1材料与方法1.1动物及分组不同应激组合模型实验:成年健康雄性Sprague-Dauley(SD)大鼠30只,由北京大学医学部实验动物中心提供,体重20010g,室温(222)下单笼饲养,光-暗周期为12h,自由饮食。适应7天后按体重随机分为:空白对照组(n=7),束缚跑台组(n=7),悬吊游泳组(n=8)和束缚游泳组(n=8)。药物反应试验:成年健康雄性SD大鼠36只,适应7天后按体重随机分为:空白对照组、模型对照组(束缚游泳组)和模型给药组,每组12只。1.2实验方法1.2.1空白对照组:不给予任何应激刺激,饲养条件与模型组相同。1.2.2束缚跑台组:上午束缚,下午进行跑台训练,连续12天。束缚每3天循序加量1次,时间分别为1h、15h、2h、25h。跑台训练前3天为适应性训练,每天完成10m/min10min的跑台运动,以后为力竭性训练,每天完成10m/min10min的运动后,加速至20m/min20min、30m/min30min、40m/min40min,并依次不断递增跑速,直至大鼠力竭。力竭判断标准:连续给大鼠施加声、光、机械刺激后,大鼠不能继续跑动,下跑台后伏地喘息,暂时无逃避反应。1.2.3悬吊游泳组:上午悬吊,下午进行负重游泳,连续12天。悬吊每3天循序加量1次,时间分别为1h、1.5h、2h、25h。游泳训练前3天适应性游泳30min,以后为力竭性训练,负重3%。力竭标准:游泳动作明显失调,不能再坚持。沉入水下10s不能回到水面。1.2.4束缚游泳组:束缚和游泳的方式、时间同上。1.2.5模型给药组:给予束缚和游泳刺激的同时,每天给予人参水煎液灌胃,1ml/100g体重,每ml含人参生药量02g,对照组给予等量生理盐水。1.3取材模型实验于实验第1、4、8天上午快速取尾血,室温静置1h后4低温离心,3000r/min15min,取血清于-20冰箱中贮存备用。实验结束后10%水合氯醛麻醉动物,腹主动脉取血4ml分装普通试管和抗凝管,低温离心后取血清和血浆-20冻存备用。取睾丸、脾、胸腺、肾上腺,称重后液氮速冻。1.4指标观察和测定一般情况:(1)观察记录实验前后大鼠的精神状态;(2)实验期间隔天称量并记录体重和饲料1次。食物利用率(%)=体重增加量(g)/摄食量(g)100%,脏器体重指数=脏器重量(mg)/体重(g)。血清睾酮(T)和皮质醇(C)采用放射免疫法测定,睾酮放免试剂盒购自天津德普生物技术有限公司,皮质醇试剂盒购自中国北京北方原子能研究所。严格按试剂盒说明书操作,复管测定。1.5统计方法数据以均数标准差表示,采用SPSS11.5forwindows软件包进行单因素方差分析。2结果2.1不同应激组合模型的实验结果2.1.1不同实验组大鼠一般情况的变化2.1.1.1一般情况观察空白对照组大鼠神态安静,时而活泼好动,皮毛光洁整齐,眼睛有神;而各模型组大鼠在实验后期神态倦怠,眼神黯淡无光,毛发稀疏,体型瘦弱,反应能力明显降低,尤以悬吊游泳组和束缚游泳组为甚。游泳过程中由于疲劳衰竭而死亡大鼠2只,悬吊游泳组和束缚游泳组各1只。
术后疲劳综合征动物模型的研究
术后疲劳综合征动物模型的研究
【关键词】 疲劳
摘要：目的：建立并评价肝部分切除致大鼠术后疲劳综合征实验动物模型(Postoperative Fatigue，POF大鼠模型)。方法： 根据POF的发病特征与临床表现，模仿手术的全过程，切除大鼠的部分肝脏，观察手术前后大鼠的行为学改变、营养学指标变化及小肠粘膜应激损伤等，建立并评价POF大鼠模型。结果：不同比例肝部分切除术后大鼠出现不同程度的术后疲劳综合征表现：眯眼、动物体力下降、活动不能、出现抑郁倾向；松毛、竖毛及毛发无光泽；肛周、眼周及鼻周污物附着并表现为体温低、肌肉寒颤及四肢冰冷等，对针刺足跖的敏感性反应降低；同时在营养学指标、小肠粘膜应激损伤等发生变化。其中以70%肝切组大鼠变化最为明显。结论： 肝部分切除致大鼠术后疲劳综合征实验动物模型的建立，其最适合的切肝量为70%，该模型可作为今后POF研究的药理实验动物模型。
关键词： 手术后疲劳；动物模型；肝脏；大鼠
Study on the Postoperative Fatigue
Animal Model
Abstract:Objective:To establish and
assess the model of post operative
fatigue syndrom (POF) by partial
resection of the liver in :The rat model
of POF was developed by the partial
resection of the liver and those
behavioral changes prior and post to
operation，the disorder of nutritive
intake after operation，stress reaction，(pathological change of mucous membrane
心力衰竭小鼠模型的建立方法
心力衰竭小鼠模型的建立方法
哎呀，咱今儿就来说说心力衰竭小鼠模型的建立方法。你想想啊，这小鼠就像是个小实验台，咱得在它身上捣鼓出心力衰竭的状态来，这可不是件容易事儿，但咱得试试不是？
先得选好小鼠呀，这就跟挑选手下一样，得挑个健康活泼的，不然一开始就病恹恹的，那后面还咋搞。然后呢，得给它来点刺激，就像生活中突然来了个大挑战。比如说，可以通过手术的办法，给它的心脏来点小“折腾”，让它的心脏工作起来不那么顺畅。
这就好比一辆汽车，本来跑得好好的，咱给它的发动机动点手脚，让它没那么有力气跑了。或者呢，用些药物去影响它的心脏功能，就像给它的心脏喝了杯“迷魂汤”一样，让它晕乎起来。
还有哦，得时刻关注着这些小鼠的状态。它们就像咱的宝贝疙瘩，咱得知道它们啥时候不舒服了，啥时候心力衰竭的症状出来了。这就需要咱细心观察，就像妈妈观察孩子有没有生病一样。要是不仔细，那可就白忙活啦。
咱建立这个模型可不是为了好玩，是为了研究心力衰竭这个大难题呀。就好像我们要去攻打一个坚固的城堡，这个小鼠模型就是我们的先锋队，得先探出个究竟来。通过研究这些小鼠，我们能知道心力衰竭是怎么发生的，怎么发展的，然后才能找到更好的办法去对付它。 你说这是不是很重要？这就像我们在黑暗中摸索，这个小鼠模型就是那点亮光，能给我们指引方向呢。而且，建立这个模型也不是一次就能成功的，可能得试很多次，就像我们学走路，得摔很多跤才能走稳一样。
咱可不能怕失败，要勇往直前。这些小鼠也是为了科学在做贡献呀，它们可是大功臣呢！咱得好好对待它们，让它们的付出有价值。
总之呢，心力衰竭小鼠模型的建立方法虽然复杂，但咱有决心，有耐心，肯定能做好。让我们一起为了攻克心力衰竭这个难题而努力吧！这是多么有意义的事情呀，难道不是吗？
一种干燥综合征小鼠模型的造模方法
一种干燥综合征小鼠模型的造模方法
引言
干燥综合征是一种以眼部干涩、口干、全身乏力及关节疼痛等表现为主的自身免疫性疾病。为了深入研究干燥综合征的发病机制以及探索治疗方法，科研人员提出了一种干燥综合征小鼠模型的造模方法。本文将介绍该方法的具体步骤和操作要点。
实验材料和设备
1.4-8周龄的雌性C57BL/6小鼠。
2.放置冰片的无菌培养皿。
3.满足标准的实验室动物饲养设备。
4.干冰盒。
实验方法
第一步：准备工作
1.将小鼠放置在无菌环境下，并确保其适应环境至少一周。
2.准备好实验所需的材料和设备。
第二步：制备试剂
1.准备好人工合成的干燥综合征自身抗体，浓度为1mg/ml。
2.制备盐水溶液，浓度为0.9%。
第三步：造模操作
1.用放置在冰上的冰片麻醉小鼠，待小鼠完全麻醉后，移至培养皿中。
2.使用注射器，将人工合成的干燥综合征自身抗体以0.2ml/10g的剂量注射到小鼠腹腔内。
3.每隔两天，重复一次注射操作，连续注射14天。 4.在注射期间，每次注射后将小鼠恢复到温暖的环境中，并观察其行为变化。
5.在注射结束后，让小鼠自由饮用盐水溶液以保持其体液平衡。
结果分析
行为观察
在注射过程中，小鼠可能表现出口干、眼干、活动减少等症状，这与干燥综合征患者的临床表现相似。
病理检测
可以通过检测小鼠的泪液分泌量、唾液分泌量以及相关器官组织的病理学变化，来评估小鼠是否成功建立了干燥综合征模型。
结论
通过上述干燥综合征小鼠模型的造模方法，可以成功模拟干燥综合征的临床表现和病理变化。此模型可为研究干燥综合征的发病机制和寻找治疗方法提供有力的实验性依据。
参考文献
1.SmithK.G.,JonesR.B.,BurnsS.M.,etal.RatmodelsofANCA-associatedvasculitis.ArthritisResTher,2011,13(6):207.
2.小鼠实验动物模型制备方法标准操作规程，中国实验动物学杂志，2014，22(6)：590-591.
中医运动性疲劳动物模型制作步骤及方法
中医运动性疲劳动物模型制作步骤及方法
(1)采用劳倦因素与大黄、芒硝泻下药物建立脾气虚动物模型
复制方法 选用Wister雄性大鼠，体重为180～200g。将大黄、芒硝、标准饲料按0.85：0.15：9.0的比例均匀混合后制成药化饲料。实验动物在每日喂食药化饲料的同时，于每天上午8：00～12：00在劳倦装置振荡器上(振动荡243次/min、振幅为36mm)振动4h，造模周期为21d。观察大鼠的外观表现、粪便、体重、食量、拉尿及排便等情况，并可取血测定红细胞C3b受体、IgG、IgM含量；取脾脏测定T细胞亚群、TL22活性、NK活性、淋巴细胞转化率。
(2)采用劳倦过度与番泻叶建立脾气虚动物模型
复制方法 选用昆明种小白鼠，体重为20～30g，采用番泻药结合游泳运动建立模型。每天进行1次游泳训练，时间为2～5min，以身体下沉为度，且施100％番泻叶煎剂0.5ml/只。建模第4日，实验动物出现眯眼、懒动、扎堆、排条状软便、毛散而无光泽，并出现明显的胆怯状态。建模第8日处死，取血测定红细胞C3b受体、IgG、IgM含量；取脾脏测定T细胞亚群、TL-2活性、NK活性、淋巴细胞转化率。
(3)模型特点 在施以泻下的基础上，再给动物加以运动负荷，使其脏腑功能下降、失调和精血不足，是中医运动性疲劳动物模型的特点。在上述2个模型中，动物外观表现和免疫学指标的明显下降均表明动物已呈脾气虚症。
中医慢性疲劳综合征动物模型的建立与评价
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中医慢性疲劳综合征动物模型的建立与评价
作者：余曦明 陈思源 余望贻
来源：《中国医药科学》2014年第02期
[摘要] 目的 建立符合中医特色的慢性疲劳综合征动物模型。 方法 采用中医的形劳、神劳、房劳等复合因素刺激，建立慢性疲劳动物模型。对BALB/c小鼠应用游泳+夹尾+合笼等不同刺激，并对其一般状态和体重进行观察，通过肝糖原、血清乳酸、血清尿素氮等实验室指标检测，与游泳组进行比较。 结果 实验研究表明，模型组小鼠的慢性疲劳行为表现较明显；与正常组相比，模型组小鼠体重和肝糖原水平显著降低，血清乳酸和尿素氮水平显著升高。 结论 中医的形劳、神劳、房劳等复合因素刺激建立的慢性疲劳动物模型，其改变更接近人的慢性疲劳的临床表现，可以作为研究慢性疲劳综合征的动物模型。
[关键词] 中医；慢性疲劳综合征；动物模型
[中图分类号] R332 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2013）24-22-03
慢性疲劳综合征（chronic fatigue syndrome，CFS）是在现代节奏紧张的生活方式下出现的一组以长期疲劳为突出表现的全身性症候群[1]。1988年美国疾病控制与预防中心（centre for
disease control and prevention，CDC）制订CFS诊断标准，以持续或反复发作不少于6个月严重疲劳为特征，伴有头痛、睡眠障碍，注意力和记忆力下降，抑郁、肌肉骨关节疼痛等多种躯体及精神神经症状[2]。1994年CDC将该指标进行了修订，认为CFS是一组以无力、疲劳、睡眠质量差、认知功能下降及一些躯体症状，如反复咽痒、肌肉痛、头痛、关节痛等为特征的临床综合征 [3]，是目前诊断CFS的通用标准。
临床上，CFS患者的物理和实验室检查通常无特异性表现，CFS的病因和病理机制依然是个迷，因此通过实验的方法建立较理想的CFS动物模型是研究得以深入的关键。目前，CFS的发病机制尚不明确，因此从西医动物实验的角度研究CFS很少，仅见个别通过注射病毒而建立的病毒感染模型[4]。然而，研究表明，病毒感染可能只是CFS发病的诱发因素之一，大部分CFS患者在发病前曾有过长期精神刺激、情绪低落、脑力体力过度劳累、生活不愉快及不规律等（即与心理、社会等应激因素有关），发病后常伴有急躁易怒、精神抑郁、紧张、健忘、注意力不集中等精神神经症状以及免疫功能紊乱等，所以病毒感染模型不能客观反映CFS的发病机制及症状特征。因此，有必要继续改进并创造新的具有中医特色的动物模型。本项目通过构建符合中医特色的CFS动物模型，来探讨CFS的病因及发病机制，为临床防治CFS的研究提供重要的实验基础，具有重要的理论意义及应用价值。
小鼠免疫功能检测建立小鼠免疫功能低下模型的研究
小鼠免疫功能检测建立小鼠免疫功能低下模型的研究
小鼠免疫功能检测是评估小鼠免疫系统状态的重要手段之一、小鼠作为常用的动物模型，在研究免疫相关疾病、发展新药和疫苗等方面具有广泛应用。建立小鼠免疫功能低下模型可以为进一步研究免疫功能的途径提供重要参考。本文将介绍建立小鼠免疫功能低下模型的研究。
首先，建立小鼠免疫功能低下模型需要选择合适的免疫抑制方法。常用的方法包括药物免疫抑制、单克隆抗体介导的免疫抑制和基因敲除等。其中，药物免疫抑制是最常用的方法之一、糖皮质激素是目前最常用的免疫抑制药物之一，常用的剂量为每天20-40 mg/kg体重的甲泼尼龙。免疫抑制剂如环孢素A和他克莫司也可以应用于建立免疫功能低下模型。此外，通过单克隆抗体特异性抑制免疫应答也是另一种选择。例如，通过注射CD4或CD8特异性单克隆抗体可抑制小鼠的T细胞功能。此外，基因敲除技术也可以通过敲除免疫相关基因来建立小鼠免疫功能低下模型。
其次，建立免疫功能低下模型后需要对小鼠的免疫功能进行评估。评估免疫功能的方法包括机体免疫指标的检测和特定病原体感染模型的建立。机体免疫指标的检测可以通过检测外周血白细胞数目、淋巴细胞亚群的分布和功能等来评估小鼠的免疫功能。此外，还可以通过ELISA、免疫荧光或流式细胞术等技术检测小鼠体内的免疫球蛋白水平和细胞因子水平等指标。特定病原体感染模型的建立可以通过注射特定病原体来评估小鼠免疫功能。例如，通过感染流感病毒来评估小鼠的免疫功能。
最后，通过研究免疫功能低下模型可以深入了解免疫功能的调节机制，并为疾病的治疗和药物设计提供重要参考。通过建立小鼠免疫功能低下模型，可以在影响免疫功能的基因和通路上进行深入研究，从而揭示免疫功能低下的机制。此外，还可以利用这些模型开展新药和疫苗的研发，评估其免疫功能调节作用。
总之，小鼠免疫功能检测和建立免疫功能低下模型对于研究免疫系统的功能和调节机制具有重要意义。通过评估小鼠免疫功能和建立免疫功能低下模型，可以深入了解免疫功能的调节机制，并为疾病治疗和药物设计提供重要参考。
过度疲劳对小鼠免疫系统影响的研究
临床研究 医学信息
Ｎ０．０８ ２０１１ ・３８８１・
过度疲劳对小鼠免疫系统影响的研究
党凯 秦玲
１．延安大学西安创新学院，陕西西安７１０１００；２．西安市育才中学，陕西西安７１００６１
【摘要】目的：研究过度疲劳对小鼠免疫系统的影响。方法：采取小鼠游泳实验及剥夺其睡眠的方法，使其长期处于超负荷状态，以塑造过度疲劳模型。
采用溶血素法和碳粒廓清法测定过度疲劳对小鼠免疫系统的影响。结果：过度疲劳会使小鼠健康状况下降、死亡率上升；同时使半数溶血值和廓清指数均
有不同程度的下降。结论：①过度疲劳对小鼠一般健康状况、死亡率均有显著影响；②对小鼠脏器指数有极其显著的影响；③对小嚣半数溶血值有显著性影
响；④对小鼠的碳粒廓清指数可能有影响。
【关键词】过度疲劳；免疫系统；溶血素法；碳粒廓清法 ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００６—１９５９．２０１１．０８．４１２ 文章编号：１００６—１９５９（２０１１）一０８—３８８１—０２
亚健康状态（ｓｕｂｈｅａｈｈ ｓｔａｔｅ）是指机体无明确的疾病，却呈现活力降低， 疫球蛋白。
适应力呈不同程度减退的一种生理状态；是人体处于非病非健康并有可能 计算每个样品的半数溶血值（ｍｅｄｉａｎ ｈｅｍｏｌｙｔｉｃ ｖａｌｕｅ，ＨＣ），按下列公式
趋向疾病的状态［ 。 计算每只小鼠样品的半数溶血值：
“亚健康”形成的主要因素有心理 ｊ、社会［４ ３、环境、营养、劳（运）动、生 样品Ｈｃ５ｏ＝（样品吸收度值／羊红细胞半数溶血时的吸收度值）×稀释
活方式与行为 ｊ、生物 Ｊ、服务等诸多方面，每个因素都有特定的内容又相 倍数（１０倍）
互关联。现代人工作节奏快、效率高，体力、脑力长期处于紧张疲劳状态，导 ｆ实验数据处理：将实验组的平均ＨＣ５０值与对照组小鼠的平均ＨＣ ０值，
致机体神经、内分泌、免疫系统功能失调，这些即为“亚健康”状态，以长期极 经ｔ测验来判断其差异是否显著。