抗环瓜氨酸肽抗体(Anti-CCP)测定试剂盒(电化学发光免疫分析法)产品技术要求北京联众泰克
抗环瓜氨酸肽抗体（Anti-CCP）测定试剂盒（电化学发光免疫分析法）
适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人体血清样本中抗环瓜氨酸肽抗体（Anti-CCP）的含量。
1.1包装规格：50人份/盒、100人份/盒。
1.2主要组成成分
试剂盒由磁分离试剂（M）、试剂a（Ra）、试剂b（Rb）和定标品（Anti-CCP-Cal）（选配）组成。组成及含量见下表：
注：1、定标品靶值批特异，详见靶值单。
2、试剂盒条码卡内含主校准曲线。
2.1 外观
2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；
2.1.2 磁分离试剂摇匀后应为棕色含固体微粒的均匀悬浊液，无明显凝集、无絮状物；
2.1.3 其它液体组分应澄清，无异物，沉淀物或絮状物；
2.1.4 包装标签应清晰、无磨损、易识别。
2.2 空白限 应不大于7.0U/mL。
2.3 准确度
将已知浓度的Anti-CCP标准溶液加入到血清中，其回收率应在(85%～115%)范围内。
2.4 线性
在[10.0，500] U/mL范围内，线性相关系数（r）应不小于0.9900。
2.5 精密度
2.5.1 重复性
在试剂盒的线性范围内，检测高低两个水平的样品，检测结果的变异系数（CV）应不大于8%。
2.5.2 批间差
在试剂盒的线性范围内，用3个批号试剂盒分别检测高低两个水平的样品，检测结果的变异系数（CV）应不大于15%。
2.6 效期末稳定性
本产品效期为15个月，试剂盒在2～8℃下保存至有效期末进行检测，检测结果应符合2.1、2.2、2.3、2.4、2.5.1的要求。
2.7 溯源性
依据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械 生物样品中量的测量 校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求提供抗环瓜氨酸肽抗体（Anti-CCP）定标品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容，定标品溯源至企业工作校准品。
单独检测抗环瓜氨酸肽抗体以诊断类风湿关节炎
９４－－——
文章编号：１００７—４２８７（２０１４）Ｏ１—００９４—０４ Ｃｈｉｎ Ｊ Ｌａｂ Ｄｉａｇｎ，Ｊａｎｕａｒｙ，２０１４，Ｖｏｌ １８，Ｎｏ．１
单独检测抗环瓜氨酸肽抗体以诊断类风湿关节炎
葛艳玲 ，宋 慧 ，赵育靖
（北京积水潭医院１．检验科；２．风湿免疫科，北京１０００３５）
摘要：目的 分别评价单独和联合检测抗环瓜氨酸肽抗体（ａｎｔｉ—ＣＣＰ）和类风湿因子（ＲＦ）等临床指标在诊断类风 湿关节炎（ＲＡ）中的作用。方法 速率散射比浊法检测ＲＦ；酶联免疫吸附试验（ＥｕｓＡ）检测ａｎｔｉ—ＣＣＰ；间接免疫荧光 法检测抗角蛋白抗体（ＡＫＡ）和抗核周因子抗体（ＡＰＦ）。结果 ａｎｔｉ—ＣＣＰ的敏感性与ＲＦ相比无显著性差异（Ｐ＞ ０．０５），但特异性显著高于ＲＦ（Ｐ＜０．０５）。敏感性明显高于ＡＫＡ和ＡＰＦ（Ｐ＜Ｏ．０５），特异性与这些指标相比无显著 性差异（Ｐ＞０．０５）。与ａｎｔｉ—ＣＣＰ相比，检测ａｎｔｉ—ｃｃＰ／ＲＦ时，不能明显提高敏感性（Ｐ＞０．０５），特异性却显著下降（Ｐ ＜Ｏ．０５）。检测ａｎｔｉ—ＣＣＰ／ＡＫＡ或ａｎｔｉ—ＣＣＰ／ＡＰＦ的敏感性和特异性均无显著变化（Ｐ＞０．０５），检测ａｎｔｉ—ＣＣＰ／ＲＦ／ ＡＫＡ／ＡＰＦ，特异性显著下降（Ｐ＜Ｏ．０５）。联合ａｎｔｉ—ｃｃＰ＋ＲＦ、ＡＫＡ、ＡＰＦ检测，特异性与单独检测ａｎｔｉ—ＣＣＰ相当（Ｐ ＞Ｏ．０５），但敏感性均显著下降（Ｐ＜Ｏ．０５）。结论 单独检测ａｎｔｉ—ＣＣＰ对于诊断ＲＡ优于单独检测ＲＦ，且联合ａｎｔｉ— ＣＣＰ与ＲＦ、ＡＫＡ、ＡＰＦ并不能显著提高敏感性和特异性。推荐采用单独检测ａｎｔｉ—ＣＣＰ代替ＲＦ作为诊断ＲＡ的实验 室指标。 关键词：抗环瓜氨酸肽抗体（ａｎｔｉ—ＣＣＰ）；类风湿因子（ＲＦ）；类风湿关节炎（ＲＡ） 中图分类号：Ｒ５９３．２２ 文献标识码：Ａ Ｕｓｅ ｏｆ Ａｎｔｉ—Ｃｙｃｌｉｃ Ｃｉｔｒｕｌｌｉｎａｔｅｄ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ａｎｔｉｂｏｄｙ（ａｎｔｉ－ＣＣＰ）Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ ｆｏｒ Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ＧＥ Ｙａｎ—ｌｉｎｇ ，ＳＯＮＧ Ｈｕｉ。，ＺＨＡＯ Ｙｕ—ｊｉｎｇ ．（１，Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ；２，Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｊｉｓｈｕｉｔａｎ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００３５，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓ ｏｆ ｕｓｉｎｇ ａｎｔｉ—ＣＣＰ ａｓ ｔｈｅ ｓｉｎｇｌｅ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｐａｒａｍｅｔｅｒ ｆｏｒ ＲＡ ｄｉ— ａｇｎｏｓｉｓ，ｖｅｒｓｕｓ ｔｏ ｕｓｅ ａｎｔｉ—ＣＣＰ，ＲＦ，ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ｉｎ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ．Ｍａｔｅｒｉａｌ ａｎｄ ｍｅｔｈｏｄｓ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ＲＦ ｗａｓ ｍｅａｓ— ｕｒｅｄ ｂｙ ｒａｔｅ ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ ｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｙ ｍｅｔｈｏｄ；ａｎｔｉ—ＣＣＰ ｌｅｖｅｌ ｗａｓ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｂｙ ＥＬＩＳＡ：ｌｅｖｅｌ ｏｆ ＡＫＡ ａｎｄ ＡＰＦ ｗｅｒｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｂｙ ｉｎｄｉｒｅｃｔ ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ａｓｓａｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｆｏｒ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ＲＡ，ｔｈｅｒｅ’ｓ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｉｎ ｓｅｎｓｉ— ｔｉｖｉｔｙ ｂｅｔｗｅｅｎ ａｎｔｉ ＣＣＰ ａｎｄ ＲＦ（Ｐ＞０．０５），Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ｏｆ ａｎｔｉ—ＣＣＰ ｉｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ＲＦ（Ｐ＜ ０．０５）．Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｔｏ ＡＫＡ ａｎｄ ＡＰＦ，ｔｈｅ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ａｎｔｉ—ＣＣＰ ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ ｉｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ（Ｐ＜０．０５），ｗｉｔｈ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｉｎ ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ．Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｔｏ ｕｓｉｎｇ ａｎｔｉ—ＣＣＰ ａｌｏｎｅ，ｔｏ ｕｓｅ ｂｏｔｈ ａｎｔｉ—ＣＣＰ ａｎｄ ＲＦ ｆｏｒ ＲＡ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ， ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ ｏｆ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ，ｗｈｅｒｅａｓ ｔｈｅ ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ｄｒｏｐｐｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ．Ｔｏ ｕｓｅ ａｎｔｉ—ＣＣＰ ｉｎ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｅｉｔｈｅｒ ＡＫＡ ｏｒ ＡＰＦ．ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｂｏｔｈ ｔｈｅ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ．Ａｎｔｉ— ＣＣＰ ｉｎ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ＲＦ，ｗｉｔｈ ＡＫＡ，ａｎｄ ｗｉｔｈ ＡＰＦ，ｃｏｍｐａｒｅｄ ｔｏ ａｎｔｉ—ＣＣＰ ａｌｏｎｅ，ｈａｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ （Ｐ＜Ｏ．０５）．Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ａｎｔｉ—ＣＣＰ ａｌｏｎｅ，ｗｈｅｎ ａｎｔｉ—ＣＣＰ ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ ｗ３ｓ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｗｉｔｈ ａｌｌ ｔｈｒｅｅ ｏｔｈｅｒ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ （ＲＦ，ＡＫＡ，ａｎｄ ＡＰＦ），ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｉｎ ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ，ｂｕｔ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ（Ｐ＜ ０．０５）Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ａｎｔｉ—ＣＣＰ ｌｅｖｅｌ ａｌｏｎｅ ｆｏｒ ＲＡ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｉｓ ｍｏｒｅ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｔｈａｎ ＲＦ ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ；ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ａｎｔｉ— ＣＣＰ ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ ｗｉｔｈ ＲＦ，ＡＫＡ。ａｎｄ ＡＰＦ ｄｉｄ ｎｏｔ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｍｐｒｏｖｅ ｔｈｅ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ．Ｗｅ ｒｅｃｏｍｍｅｎｄ ｔｈａｔ ａｎｔｉ—ＣＣＰ ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ ａｌｏｎｅ ｉｓ ｓｕｆｆｉｃｉｅｎｔ ａｎｄ ｃａｎ ｒｅｐｌａｃｅ ＲＦ ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ ｆｏｒ ＲＡ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ａｎｔｉ—ｃｙｃｌｉｃ ｃｉｔｒｕｌｌｉｎａｔｅｄ ｐｅｐｔｉｄｅ ａｎｔｉｂｏｄｙ（ａｎｔｉ—ＣＣＰ）：ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ｆａｃｔｏｒ（ＲＦ）；ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ（ＲＡ）
C-肽(C-P)测定试剂盒(化学发光法)产品技术要求科美
C-肽（C-P）测定试剂盒（化学发光法）
D-适用范围：本试剂盒用于定量测定人血清中C-肽（C-P）的含量。
1.1规格
96测试 48测试 主要成分
96孔/块×1
块 48孔/块×1块 C-P单克隆抗体、微孔板
6mL/瓶×1瓶 3mL/瓶×1瓶 C-P单克隆抗体、酶
冻干品；
0.5 mL/瓶×6
瓶 冻干品；
0.5mL/瓶×6
瓶 C-P抗原、蛋白,包括6个浓度水平，定值见标签。
6mL/瓶×1瓶 3mL/瓶×1瓶 鲁米诺、缓冲液
6mL/瓶×1瓶 3mL/瓶×1瓶 过氧化物、缓冲液
30mL/瓶×1瓶 30mL/瓶×1瓶 表面活性剂、缓冲液
2 张 1 张
1 份 1 份
2.1外观
C-P试剂盒组分齐全、完整；溶液无混浊，无沉淀或絮状物；微孔板包装袋无破损、漏气现象。
2.2 准确性
用C-P试剂盒同时测定国家标准品（150553）和校准品，以国家标准品为标准，试剂盒校准品的实测值与标示值之比应在0.90～1.10的范围内。
2.3 剂量反应曲线的线性
在（0.11～15.0ng/mL）浓度范围内，用双对数或其他适当的数学模型拟合，剂量反应曲线的相关系数（r）的绝对值应不小于0.9900。
2.4 空白检测限
应不大于0.05ng/mL。
2.5精密度
2.5.1分析内精密度 测定QC血清，变异系数(CV)应小于15.0%。
2.5.2分析间精密度
测定QC血清，变异系数(CV)应小于20.0%。
2.6批间差
用三个批号的试剂盒，分别测量同一质控血清，C-P试剂盒批间变异系数(CV)应小于20.0%。
2.7 质控血清测定值
用C-P试剂盒测定质控血清，结果应在允许的质控范围内。
2.8 特异性
2.8.1与胰岛素(INS)的交叉反应
检测浓度为150μI U / mL的INS，测定值应不大于0.05ng/mL。
2.8.2与促卵泡生成激素(FSH)的交叉反应
检测浓度为1.0 μg/mL的FSH，测定值应不大于0.05ng/mL。
抗环瓜氨酸肽抗体临床意义
1 抗环瓜氨酸肽抗体
抗环瓜氨酸肽抗体是风湿自身抗体系统的一种，类风湿关节炎（RA）具有高特异性的瓜氨酸相关自身抗体系统包括AKA、APF、AFA、抗CCP抗体，这些抗体对早期RA诊断具有较好的特异性。这些指标越高患风湿的可能性也越大。
1概述
抗环瓜氨酸肽抗体（CCP）是环状聚丝蛋白的多肽片段，是以IgG型为主的抗体，对类风湿性关节炎（RA）具有很好的敏感性和特异性，且抗CCP抗体阳性的RA病人骨破坏较抗CCP抗体阴性者严重。
类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）是一种常见的慢性自身免疫性疾病。在全世界大约有1%的人罹患此病。RA能引起关节的疼痛、僵直及肿胀。在发病2年内即可能出现不可逆的骨关节损伤，并可引起多种并发症，如神经系统疾病、心包炎、淋巴腺炎等。因此，及早诊断RA及给予缓解病情的药物治疗，对控制病情非常重要。1998年，国外，首次报道的抗环瓜氨酸肽抗体（anti-cyclic cirullinated peptide antibodies,抗CCP抗体）的检测，对RA具有较高的敏感性和特异性，是RA新的血清标志物。
2生物学特性
1998年Schellekens和Girbal Neuhause等根据filaggrin的cDNA序列合成的多肽证实瓜氨酸残基是类风湿关节炎特异的抗中间丝相关蛋白（filaggrin）抗体识别表位的必需组成。通过对基因文库中各个序列号的filggrin氨基酸序列进行分析，合成了一条以瓜氨酸代替精氨酸的20个左右氨基酸残基的肽链。并通过一定的试验显示了瓜氨酸是RA患者血清中抗filaggrin相关抗体识别的主要组成性抗原决定簇成分。在2000年，Schellekens将一条由19个氨基酸残基组成的瓜氨酸肽链中的两个丝氨酸替换为半胱氨酸，形成与β-转角具有相似结构的二硫键，合成环瓜氨酸肽（cyclic citrullinated
peptide,CCP）。采用环瓜氨酸肽为抗原基质用ELISA法检测RA患者血清中的抗环瓜氨酸肽抗体，敏感性和特异性均有明显提高。
抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体检测在诊断早期类风湿关节炎中的应用价值
《当代医药论丛》Contemporary Medical Symposium 2020 年 第 18 卷 第 18 期 ·检测与诊断·132
·检测与诊断·
抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体检测在诊断早期类风湿关节炎中的应用价值
刘月皎，张宪波
（江苏省中医院检验科，江苏 南京 210029）
[摘要]目的：探讨抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体检测在诊断早期类风湿关节炎（RA）中的应用价值。方法：选取2019年10月至12月期间江苏省中医院风湿病科收治的92例RA患者、92例非RA患者和同期在该院接受健康体检的92例体检者纳入本次研究。将其中的92例RA患者作为试验组，将其中的92例非RA患者作为对照1组，将其中的92例体检者作为对照2组。对三组研究对象均进行血清抗CCP抗体检测。然后，比较三组研究对象的检测结果。结果：试验组患者抗CCP抗体的阳性检出率高于对照1组患者和对照2组体检者，P＜0.05。对这276受检者进行血清抗CCP抗体检测的灵敏度为85.87%，特异度为97.83%，准确率为93.84%，阴性预测值为95.18%，阳性预测值为93.26%。结论：抗CCP抗体对RA具有高度的特异性和灵敏度，是早期筛查RA和鉴别诊断RA的有效自身抗体指标。[关键词]早期；类风湿关节炎；抗环瓜氨酸肽抗体；诊断
[中图分类号]R446.6 [文献标识码]B [文章编号]2095-7629-（2020）18-0132-02
类风湿关节炎（RA）是一种病因尚未明确的以关节
炎性病变为基本病理改变的慢性全身性疾病，属于自身免
疫性疾病。该病患者以手足多关节发生慢性、对称性、侵
袭性、多滑膜关节炎和关节外病变为主要临床表现，病情
严重时其可出现关节僵硬、畸形及功能丧失等临床表现[1]。
由于RA的病因、病机不明，无法彻底根治该病，故目前临
床上治疗该病时主要以缓解患者的炎性症状、降低其骨质
被破坏的程度、保护其关节肌肉的功能为主[2]。有研究表
明，对RA患者的病情进行早期诊断和治疗对改善其预后具
抗环瓜氨酸肽抗体测定试剂盒(胶乳增强免疫比浊法)体外诊断试剂临床协议
第 1 页 共 4 页 抗环瓜氨酸肽抗体测定试剂盒（胶乳增强免疫比浊法）体外诊断试剂临床试验协议书
甲方：****生物科技有限公司（以下简称“甲方”）
乙方：****医院（以下简称“乙方”）
抗环瓜氨酸肽抗体测定试剂盒（胶乳增强免疫比浊法）临床试验，目的是与已批准上市的同类产品针对临床样本进行比较研究试验，证明试验用体外诊断试剂与已批准上市的同类产品等效，是由****生物科技有限公司发起的一项临床试验，生物技术有限公司作为临床研究合同组织（CRO）,在申办方****生物科技有限公司的授权委托下对该项目进行管理和监查。为确保临床试验工作顺利进行，双方在平等互利、充分表达各自意愿的基础上经协商，达成如下协议：
研究题目：抗环瓜氨酸肽抗体测定试剂盒（胶乳增强免疫比浊法）临床试验
申办方：****生物科技有限公司（以下简称“甲方”）
一、双方约定
（一）本项临床试验将遵循国家食品药品监督管理局《中华人民共和国民法通则》、《中华人民共和国合同法》、遵循CFDA2014年颁布的《体外诊断试剂临床试验技术指导原则》（总局2014第16号通告）、《药物临床试验质量管理规范》、世界医学会《赫尔辛基宣言》、国际医学科学组织委员会《人体生物医学研究国际伦理指南》等各项规定。
（二）根据临床试验方案，乙方计划完成临床观察病例 111 例，其中阳性例数大于30%。由于临床试验可变因素很多，临床试验方案规定的试验完成日期为预期试验进度。临床研究方案预期的临床研究进度和完成日期，对乙方不具备法律约束力。
（三）临床研究的数据由甲方负责交统计单位进行处理和统计分析。数据统计处理后，统计分析报告交乙方按规定格式完成本试验中心研究报告。
（四）临床试验过程中，双方应保持密切联系，双方均应在 3 个工作日内回应对方的要求，共同研究、协商处理临床试验中发生的问题。因试验发生副作用和严重不良事件、疗效不佳等原因，提前终止本项临床试验，应及时通知对方。甲方必须负责做好善后工作。乙方不承担任何责任与后果。
电化学发光法检测抗环瓜氨酸肽抗体的临床应用评价
・检验技术与方法・ 国际检验医学杂志２０１３年１１月第３４卷第２１期Ｉｎｔ Ｊ Ｌａｂ Ｍｅｄ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ ２０１３，Ｖｏ１．３４，Ｎｏ．２１
电化学发光法检测抗环瓜氨酸肽抗体的临床应用评价
李珍萍 ，郭庆昕 ，林宜昭 （１．福建省德化县医院检验科，福建德化３６２５００；２．泉州市正骨医院检验科，福建泉州３６２０００） 摘 要：目的 比较增强化学发光酶联免疫分析（ＥＣＩ ＩＡ）法和酶联免疫吸附测定（ＥＩ ＩｓＡ）法检测抗环瓜氨酸肽（ＣＣＰ）抗体 的相关性，评价ＥＣＬＩＡ定量检测试剂盒的性能。方法 将８７例类风湿关节炎（ＲＡ）患者作为ＲＡ组；另选择强直性脊柱炎患者 ３５例，干燥综合征患者５例，骨性关节炎患者２５例，系统性红斑狼疮患者３例，痛风患者１２例作为疾病对照组；正常对照组为健 康体检人群。将疾病对照组和正常对照组儿童的血清舍为对照组，分别采用ＥＩ ＩｓＡ检测试剂盒及ＥＣＩ ＩＡ检测２１５份血清标本 的抗ＣＣＰ抗体。结果 ＥＣＩ ＩＡ法试剂盒的敏感度为７１．２６ ，特异９７．６６ ；ＥＩ ＩＳＡ法试剂盒敏感度为６８．９７ ，特异性９６．８８ 。 分两种方法测定２１５份血清标本，２种方法检测均为阳性的患者有６１例，均为阴性的有１４７例。二者检测结果的总体符合率为 ９６．７４ 。２种方法间有显著相关性（Ｐ＜０．００５）。结论 ＥＣＩ ＩＡ法检测抗ＣＣＰ抗体试剂盒与ＥＩ ＩＳＡ法试剂盒检测结果的相关 性良好。 关键词：抗环瓜氨酸肽抗体； 酶联免疫吸附测定； 增强化学发光酶联免疫分析； 评价 ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３—４１３０．２０１３．２１．０４３ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７３ ４１３０（２０１３）２１ ２８８２—０２
类风湿关节炎（ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ，ＲＡ）是一种以关节软 骨慢性进行性侵蚀为早期特征的全身性自身免疫性疾病，以慢 性、对称性、多滑膜关节炎和关节外病变为主要临床表现。滑 膜炎持续反复发作可导致关节内软骨和骨的破坏，继而引起关 节畸形而成为该病的标志。目前，ＲＡ的治疗策略主要是改善 疾病早期的关节侵蚀，因而早期诊断显得尤为重要。抗环瓜氨 酸肽（ｃｙｃｌｉｃ ｃｉｔｒｕｌｌｉｎａｔｅｄ ｐｅｐｔｉｄｅ，ＣＣＰ）抗体是目前临床使用最 广泛的ＲＡ早期诊断的自身抗体。第１代抗ＣＣＰ抗体检测采 用酶联免疫吸附测定（ｅｎｚｙｍｅ—ｌｉｎｋｅｄ ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ ａｓｓａｙ， ＥＩ ＩｓＡ）法，但是该方法具有检测灵敏度、精密度都相对较低， 较难采用仪器自动化，整个检测过程所需时间较长，手工影响 因素较多等缺点。近年出现的增强化学发光酶联免疫分析 （ｅｎｈａｎｃｅｄ ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ ｅｎｚｙｍｅ ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ，ＥＣＩ ＩＡ） 检测抗ＣＣＰ抗体的全自动检测试剂盒，弥补了ＥＩ ＩＳＡ法检测 的不足，实现了灵活、快速，检测试剂稳定，易于质量控制等优 点。本研究拟评价ＥＣＬＩＡ法全自动试剂的性能，为该试剂的 临床应用提供技术支持。 １资料与方法 １．１一般资料 所有病例均来自２０１１年１２月至２０１２年７ 月于泉州市正骨医院风湿科门诊和住院患者，其中，ＲＡ患者 ８７例（ＲＡ组），其中，男２３例，女６４例；年龄２９～７５岁，平均 （４８．６－－４－１５．６）岁，均符合１９８７年美国风湿协会修订的ＲＡ分 类标准。另选择强直性脊柱炎患者３５例，干燥综合征患者５ 例，骨性关节炎患者２５例，系统性红斑狼疮患者３例，痛风患 者１２例作为疾病对照组，均符合相应国际诊断标准，其中，男 ４２例，女３８例；年龄１９～６７岁，平均（４Ｏ．１±２０．６）岁。正常 对照组选择德化县医院健康体检人群，其中，男２６例，女２２ 例；年龄１８～７２岁，平均（４５．１±１６．７）岁。疾病对照组和正常 对照组患者的血清作为对照组。 １．２标本采集 所有研究对象均于清晨空腹用真空采血管抽 取静脉血４ ｍＬ，并于３０ ｍｉｎ内以３ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心１０ ｍｉｎ，分 离血清后置于一４５。Ｃ冰箱保存，一次溶解后测定。 １．３主要试剂与仪器抗ＣＣＰ抗体ＥＬＩＳＡ法检测试剂盒由 德国欧蒙医学实验诊断有限公司提供，批号为Ｅ１１２５１７ＡＤ，在 瑞 ＴＥＣＡＮ酶标仪上检测。ＥＣＩ ＩＡ法抗ＣＣＰ抗体检测试剂 由罗氏诊断产品有限公司提供，批号为１６９６８０１，在瑞士罗氏 （Ｒｏｃｈｅ）公司Ｅｌｅｃｓｙｓ２０１０全自动电化学发光免疫分析仪上 检测。 １．４结果判定 数据检测结果定性判断标准参照试剂说明 书，≥１７ Ｕ／ｍＬ为阳性，＜１７ Ｕ／ｍＬ为阴性。 １．５统计学处理 采用ＳＰＳＳ１７．０软件进行统计学分析，计 数资料用 检验，率比较采用ｘ 检验，相关分析应用Ｐｅａｒｓｏｎ 相关系数法，以“一０．０５为检验水准，以Ｐ％０．０５为差异有统 计学意义。 ２结 果 ２．１ ＥＣＩ ＩＡ法和ＥＩ ＩｓＡ法检测抗ＣＣＰ抗体的灵敏度和特异 性收集８７例ＲＡ患者血清，评价２种试剂盒的灵敏度及特 异性。ＥＣＬＩＡ法试剂盒的敏感度为７１．２６ ，特异性９７．６６ ； ＥＬＩＳＡ法试剂盒敏感度为６８．９７ ，特异性９６．８８ ，见表１。 表ｌ ＥＣＩ ＩＡ法和ＥＩ ＩＳＡ法检测抗ＣＣＰ抗体的 灵敏度和特异性
人生长激素(hGH)测定试剂盒(电化学发光免疫分析法)产品技术要求北京联众泰克
人生长激素(hGH)测定试剂盒（电化学发光免疫分析法）
适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人体血清样本中人生长激素（hGH）的含量。
1.1包装规格：50人份/盒、100人份/盒。
1.2主要组成成分
试剂盒由磁分离试剂（M）、试剂a（Ra）、试剂b（Rb）和定标品（hGH-Cal）（选配）组成。组成及含量见下表：
注：1、定标品靶值批特异，详见靶值单。
2、试剂盒条码卡内含主校准曲线。
2.1 外观
2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；
2.1.2 磁分离试剂摇匀后应为棕色含固体微粒的均匀悬浊液，无明显凝集、无絮状物；
2.1.3 其它液体组分应澄清，无异物，沉淀物或絮状物；
2.1.4 包装标签应清晰、无磨损、易识别。
2.2 空白限 应不大于0.03 ng/mL。
2.3 准确度
用hGH国家标准品（150534）进行检测，其测量结果的相对偏差应在±10%范围内。
2.4 线性
在[0.10，50.0]ng/mL范围内，线性相关系数（r）应不小于0.9900。
2.5 精密度
2.5.1 重复性
在试剂盒的线性范围内，测定高、低两个水平的样品，检测结果的变异系数（CV）应不大于8%。
2.5.2 批间差
在试剂盒的线性范围内，用3个批号试剂盒分别检测浓度为高、低两个水平的样品，检测结果的变异系数（CV）应不大于15%。
2.6特异性
测定浓度不低于2000mIU/L的泌乳素样本，其测定结果不大于0.5ng/ml。
2.7效期末稳定性
本产品效期为15个月，试剂盒在2～8℃下保存至有效期末进行检测，检测结果应符合2.1、2.2、2.3、2.4、2.5.1的要求。
2.8 溯源性
依据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械 生物样品中量的测量 校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求提供人生长激素（hGH）定标品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容，定标品溯源至国家标准品（150534）。
电化学发光法测定血清抗环瓜氨酸肽抗体的临床应用
见代实用医学２０１３年１２月第２５卷第１２期 曼不动杆菌同源性及碳青酶烯酶的研究［Ｊ］． 中国抗感染与化疗杂志，２００６，６（４）：２３１－２３５． 【２】郭玲娇，李招云，张颖，等．鲍曼不动杆菌感 染及耐药性分析［Ｊ］＿中华医院感染学杂 志，２００７，ｌ７（２）：２１６—２１７． 【３】李铁，张嵘，周宏伟等．亚胺培南耐药大肠 埃希菌的耐药机制研究［Ｊ］．中华检验医 学杂志，２００８，３１：１１６７—１１６９ 【４】蔡加昌，周宏伟，陈功祥等．一株耐碳青酶 烯类的阴沟肠杆菌的ＫＰＣ酶检测［Ｊ］．中 华医学杂志，２００８，８８：ｌ３５—１３８ ［５］ＭｃＧｏｗａｎ ＪＥ Ｊｒ．Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｉｎ ｎｏｎｆｅｒｍｅｎ￣ ｉｎｇ Ｇｒａｍ・－ｎｅｇ￣ｉｖｅ ｂａｅｔｅｒｉａ：ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ ｒｅ・－ ｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ ｔｈｅ ｍａｘｉｍｕｍ【Ｊ］．Ａｍ Ｊ Ｉｎｆｅｃｔ Ｃｏｎｔｒｏｌ，２００６，１３６（１）：￥２９一￥３７． ［６］顾兵，童明庆．整合子与细菌耐药［Ｊ】．临床 ・ｌ３８３・ 检验杂志，２００５，２３（３）：２２６—２２９． ［７］ＫｏｌｌｅｆＭＨ，ＦｒａｓｅｒＶＪ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｉｎ ｔｈｅ ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ ｃａｒｅ ｕｎｉｔ［Ｊ］．Ａｎｎ Ｉｎｔｅｒｎ Ｍｅｄ，２００１，１３４（４）：２９８—３ １４ 收稿日期：２０１３．０８ ０６ （本文编辑：姜晓庆） 电化学发光法测定血清抗环瓜氨酸肽抗体的 临床应用 徐克，李素蒴，金珍木，秦冰沁 【摘要】目的探讨电化学发光法测定血清抗环瓜氨酸肽抗体（ＣＣＰ）的临床价值。方法用罗氏ＥＣＬＩＡ测定血 清抗．ＣＣＰ抗体，并评价其重复性、回收率、溶血、脂血及胆红素对检测结果的影响，同时测定类风湿关节炎（ＲＡ） 组、其他风湿病组、正照对照组及１Ｏ例接受肿瘤坏死因子受体融合剂治疗患者的血清动态抗．ＣＣＰ抗体浓度。结 果批内变异和日间变异均＜４％，回收率为９４．８％：胆红素＜４１５￣ａａｏｌ／Ｌ，三酰甘油＜２５．４ｍｍｏｌ／Ｌ，血红蛋白＜ ５ｇ／Ｌ：ＲＯＣ曲线下面积为０．８９８（０．８４５～０．９５２）；对ＲＡ的诊断灵敏度为７９．５％，特异性为９３．１％，阳性似然比ｌ１．５， 阴性似然比０．２２。结论ＥＣＬＩＡ法可以快速、准确及方便的检测出血清抗．ＣＣＰ浓度，在临床ＲＡ患者的诊断、治 疗及预后判断中发挥重要的意义，值得推广应用。 【关键词】 电化学发光法；抗环瓜氨酸肽抗体；类风湿关节炎 ｄｏｉ：１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．１６７１－０８００．２０１３．１２．０３７ 【中图分类号】Ｒ８１８．０２ 【文献标志码】Ａ 【文章编号】１６７１．０８００（２０１３）１２—１３８３—０２ 血清抗环瓜氨酸肽抗体（ＣＣＰ）检测 关节炎７例、结缔组织病１１例、强直性 １．３．１不精密度批内重复性试验，取 用于类风湿关节炎（ＲＡ）的辅助诊断时间 较久，从早期的第１代抗ＣＣＰ到近来的 第２代抗一ＣＣＰ试剂大部分采用酶联免疫 吸附试验（ＥＬＩＳＡ）…，该法以手工操作为 主，存在精密度不佳及需批量检测等缺 点，本研究采用电化学发光免疫分析技术 （ＥｃＬ ）定量测定血清ＣＣＰ浓度，并做 方法学及临床应用评价。现报道如下。 １资料与方法 １．１一般资料收集２０１１年ｌＯ月至 ２０１２年５月浙江省温州市中心医院收 治的ＲＡ患者７８例，均符合１９８７年美 国风湿病学修订的分类标准，其中男ｌ５ 例，女６３例；年龄ｌ８～８０岁，平均５４ 岁。其他风湿免疫疾病５１例，包括干燥 综合征４例、系统性红斑狼疮１３例、骨 作者单位： ３２５０００浙江省温州，温州 市中心医院 通信作者：徐克，Ｅｍａｉｈ ｗｚｘｕｋｅ＠ｓｉｎａ． ｔｏｍ 脊柱炎５例、痛风４例、雷诺氏综合征２ 例及硬皮病５例。正常对照组５Ｏ例，来 自正常健康体检人群。 １．２方法 １．２．１仪器与试剂仪器为ＲＯＣＨＥ Ｅｌ７０全自动电化学发光仪，采用ＲＯＣＨＥ ＣＣＰ电化学发光试剂盒，使用配套的定 标液及质控品，试剂批号：１６１９２０．０１。 １．２．２测定原理采用ＩｇＧ捕获法，待 检标本与生物素化ＣＣＰ以及钌复合物 标记的单克隆抗人ＩｇＧ抗体一起孵育， 当样本中存在特异性ＣＣＰ抗体时，形成 抗原抗体复合体，再加入包被链霉素的 磁珠微粒进行孵育。复合体与磁珠通过 生物素和亲和素的作用结合，通过电磁 作用将磁珠吸附到电极表面，给电极加 以一定的电压使复合体化学发光，经过 光电信号倍增器测量发光强度。最后仪 器软件自动通过定标曲线得到检测结 果，总检测时间１８ｍｉｎ。 １．３方法学评价 高低两种浓度抗．ＣＣＰ血清，各测定２０ 次，计算批内变异系数（ＣＶ）：批间重复 性试验：连续测定１０ ｄ，计算批间ＣＶ。 １．３．２回收试验取１份抗．ＣＣＰ为６８ Ｕ／ｍｌ的血标本，分别加入标准液做回收 试验，计算回收率。 １＿３＿３干扰试验添加胆红素、脂肪乳、 血红蛋白检测该法的抗干扰能力，以偏 差＜１０％判断为无干扰标准。 １．４统计方法采用ＳＰＳＳ １６．０统计软 件进行分析，用抗．ＣＣＰ浓度值做受试者 工作特征（ＲＯＣ）曲线，计算曲线下面积， 并对曲线下面积进行分析探讨其最佳临 界值，确定抗．ＣＣＰ诊断价值最大时的最 佳临界值（Ｓ／ＣＯ）值。尸＜Ｏ．０５为差异 有统计学意义。 ２结果 ２．１方法学评价结果两种浓度抗． ＣＣＰ（分别为２５．１ Ｕ／ｌｎｌ、２３８ Ｕ／ｍ１）的批 内ＣＶ值为１．８％、１．
抗循环瓜氨酸肽抗体的临床意义
抗循环瓜氨酸肽抗体
抗环瓜氨酸肽抗体是风湿自身抗体系统的一种，类风湿关节炎（RA）具有高特异性的瓜氨酸相关自身抗体系统包括AKA、APF、AFA、抗CCP抗体，这些抗体对早期RA诊断具有较好的特异性。这些指标越高患风湿的可能性也越大。
抗环瓜氨酸肽抗体（CCP）是环状聚丝蛋白的多肽片段，是以IgG型为主的抗体，对类风湿性关节炎（RA）具有很好的敏感性和特异性，且抗CCP抗体阳性的RA病人骨破坏较抗CCP抗体阴性者严重。
类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）是一种常见的慢性自身免疫性疾病。在全世界大约有1%的人罹患此病。RA能引起关节的疼痛、僵直及肿胀。在发病2年内即可能出现不可逆的骨关节损伤，并可引起多种并发症，如神经系统疾病、心包炎、淋巴腺炎等。因此，及早诊断RA及给予缓解病情的药物治疗，对控制病情非常重要。1998年，国外，首次报道的抗环瓜氨酸肽抗体（anti-cyclic cirullinated peptide antibodies,抗CCP抗体）的检测，对RA具有较高的敏感性和特异性，是RA新的血清标志物。
1998年Schellekens和Girbal Neuhause等根据filaggrin的cDNA序列合成的多肽证实瓜氨酸残基是类风湿关节炎特异的抗中间丝相关蛋白（filaggrin）抗体识别表位的必需组成。通过对基因文库中各个序列号的filggrin氨基酸序列进行分析，合成了一条以瓜氨酸代替精氨酸的20个左右氨基酸残基的肽链。并通过一定的试验显示了瓜氨酸是RA患者血清中抗filaggrin相关抗体识别的主要组成性抗原决定簇成分。在2000年，Schellekens将一条由19个氨基酸残基组成的瓜氨酸肽链中的两个丝氨酸替换为半胱氨酸，形成与β-转角具有相似结构的二硫键，合成环瓜氨酸肽（cyclic citrullinated peptide,CCP）。采用环瓜氨酸肽为抗原基质用ELISA法检测RA患者血清中的抗环瓜氨酸肽抗体，敏感性和特异性均有明显提高。
抗环瓜氨酸肽(抗-CCP)抗体检测第一次室间质量评价结果报告 (1)
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NCCL-I-04-02-2014 抗环瓜氨酸肽（抗-CCP）抗体检测 第一次室间质量评价结果报告
卫生部临床检验中心 二O一四年五月
2 组织机构：卫生部临床检验中心 能力验证负责人：王治国 联系人：王薇 联系地址：北京市东单大华路一号 邮政编码：100730 联系电话：（010）58115055 传真：（010）65273025 实施机构：卫生部临床检验中心 技术负责人：陈文祥 李金明 联系人：张瑞 邮政编码：100730 联系电话：（010）58115053 传真：（010） 技术专家：李金明、王露楠，张瑞、秦晓光、毛远丽、张正、赵辉 统计专家：王治国 3 目录
一、前言 二、本次质评的特点 1、质评的目的和意义 2、参加实验室的范围（分布） 3、质评测试项目和要求 4、样本情况描述 5、保密性要求 6、日程安排 三、评价原则 四、统计处理结果及结果评价 五、技术分析和建议 附录A、相关文件 A1、样本接收状态确认表 A2、2014年全国抗环瓜氨酸肽（抗-CCP）抗体检测室间质量评价 活动安排及注意事项 A3、全国抗环瓜氨酸肽（抗-CCP）抗体检测结果 附录B、参考文献 4 一、前言 本报告是对NCCL-I-04-02-2014《2014年全国抗环瓜氨酸肽（抗-CCP）抗体检测第一次室间质量评价（又称能力验证）》结果的总结，由卫生部临床检验中心（NCCL）负责起草，中心主任审核并批准发布。 NCCL-I-04-02-2014《2014年全国抗环瓜氨酸肽（抗-CCP）抗体检测第一次室间质量评价计划》由NCCL组织及实施。 二、本次质评的特点 1、目的和意义 全国抗环瓜氨酸肽（抗-CCP）抗体室间质量评价计划，是保证各临床实验室检测质量的重要手段。可以确定参评实验室抗环瓜氨酸肽（抗-CCP）抗体定性检测的能力；发现在检测中存在的共性问题以及某些实验室存在的特殊问题，促进实验室提高检测水平。 2、参加实验室的范围（分布） 本次能力验证共有来自29个省（市、自治区）的共272个实验室参加。每个参试实验室进行唯一性编码，在报告中只出现实验室代码，从而对参试实验室的有关技术信息保密。这些实验室的地区分布情况见表1。 表1 参加实验室分布情况 省（自治区、直辖市） 参加实验室数 全国-参加 272 北京-参加 27 上海-参加 13 天津-参加 4 河北-参加 9 河南-参加 10 山东-参加 11 山西-参加 11 辽宁-参加 8 吉林-参加 4 5 黑龙江-参加 5 内蒙古-参加 6 湖南-参加 2 湖北-参加 9 广东-参加 36 四川-参加 27 安徽-参加 7 甘肃-参加 3 贵州-参加 8 陕西-参加 4 广西-参加 10 江苏-参加 7 浙江-参加 9 江西-参加 4 宁夏-参加 2 福建-参加 11 新疆-参加 3 云南-参加 12 重庆-参加 8 海南-参加 2 2014年度共有272家实验室报名参加本年度抗环瓜氨酸肽（抗-CCP）抗体室间质评活动。本次有258个实验室回报了结果，14家实验室未按时回报结果。 3、检测项目和要求 3.1 本次质评的检测项目是：抗环瓜氨酸肽（抗-CCP）抗体。 3.2 本次能力验证计划在向每个参加实验室发送检测样品的同时，附有给实验室的活动说明“2014年全国抗环瓜氨酸肽（抗-CCP）抗体检测第一次室间质量评价（能力验证）活动安排及注意事项”、“样本接收状态确认表”、“全国抗环瓜氨酸肽（抗-CCP）抗体检测室间质量评价测定结果回报表”。附件内容见附录C。 3.3 检测结果等相关信息参加用户通过访问检验医学信息网（www.clinet. ）通过用户名和密码进入室间质量评价界面，在相应“全国抗环瓜氨酸肽（抗-CCP）抗体检测结果”中填写相应结果及相关方法、仪器和试剂等编码，审核后网络提交，然后再已上报栏进行确认。 4、样本情况描述 6 4.1 本次室间质量评价使用的待测样本，由本中心临床免疫室制备。 样品特性：液体人血清，分装量0.5ml/支 制备要点：选择抗-CCP抗体阳性模式的血清，进行无菌抽滤除纤原，加防腐剂，分装，-20C冻存。 性状：均匀，澄清。 4.2 均匀性和稳定性检验 本次质评样本为液体，所用分装冻存管为本室长期使用，在制备质评样本时，已验证样本的均匀性，故免除均匀性检验。稳定性检验可保证运输过程中的稳定性。且在样品发送后，要求实验室反馈结果数据的最后期限前，我们再次对保存的样品进行了稳定性检验。 5、保密性要求 每个参加实验室被随机分配一个唯一代码，为保证给参加实验室检测的结果保密，本报告中每个参加实验室均以代码表示。 6、计划日程安排 2014年全国抗环瓜氨酸肽（抗-CCP）抗体检测室间质量评价活动全年共进行两次，质评样本一次寄发，第一次活动具体安排如下： 表2 2014年全国临床实验室抗环瓜氨酸肽（抗-CCP）抗体检测活动安排 活动次数 批号 样本建议 测定日期 结果上报 截止日期 质评成绩 下发日期