禽呼肠弧
肉鸭感染呼肠孤病毒与鸭疫里默氏菌病例的诊治体会
肉鸭感染呼肠孤病毒与鸭疫里默氏菌病
例的诊治体会
徐兴胜，王思媛，刘婷，吴珮榕，贺晚秋，陈瑾，李继祥*
（西南大学动物科学学院重庆荣昌402460）文章编号院1004-2342渊2019冤06-0045-02中图分类号院杂834文献标识码：B
呼肠孤病毒（Reovirus）在家禽和其他禽类中非
常普遍，容易分离到病毒及检测到血清抗体，但主
要关注其对鸡的危害，因为从其他禽类分离的病毒
大多是不致病的[1]。近年来，雏番鸭呼肠孤病毒感染
导致严重发病、死亡的病例较多，也有文献报道肉
雏鸭感染该病毒导致以脾脏坏死为主要病变特征
的疾病。鸭疫里默氏菌的血清型复杂且缺乏交叉免
疫保护，极易产生耐药性，在临床中存在严重的多重耐药性，难以筛选到有效抗菌药物。该细菌主要
感染1~8周龄鸭，也可以感染鹅、鸡及野鸟，以纤维素性渗出性炎症为主要病变特征。该细菌感染，俗
称鸭传染性浆膜炎，发病率高、病死率高，是我国养
鸭业中最重要的细菌性传染病。本文就15日龄杂交肉鸭呼肠孤病毒与鸭疫里默氏菌继发或并发感
染病例的诊治及体会报道如下。1发病情况及初步诊治
2019年8月，重庆市荣昌区某养鸭专业户杂交肉鸭5000余只，用肉鸭全价饲料饲喂，2日龄注射
鸭病毒性肝炎二价抗体。8日龄个别鸭发病，表现为
精神沉郁、采食量下降、羽毛杂乱无章、伏地、垂头，
部分出现腹泻，呈黄绿色；9日龄时出现死亡，主要
病变是脾脏萎缩、坏死，部分病死鸭表现为心包中有淡黄色粘稠积液、肝轻微肿大。用氟苯尼考与抗病毒中药治疗，用药后仍然每天新增发病鸭150只
左右，至15日龄时已死亡500余只。解剖15日龄死亡鸭5只，均表现为脾脏坏死，其中3只有不同
程度的纤维素性心包炎、肝周炎和气囊炎。采集肝
和脾用于病毒检测，将脑组织划线接种巧克力营养
琼脂平板分离细菌。
根据发病情况及病理剖检情况，初步诊断为鸭
传染性浆膜炎及呼肠孤病毒感染，建议处理措施包
括：（1）实施隔离饲养，将病重鸭直接淘汰；（2）场地
及用具彻底清扫，用150mg/L的二氧化氯进行消毒；（3）多维和阿莫西林饮水，3次/d，连用3d；（4）
番鸭养殖要点 番鸭主要病毒病及其防控要点 - 养鸭技术
番鸭养殖要点番鸭主要病毒病及其防控要点-养鸭技术
番鸭又称瘤头鸭、全番、正番或红鼻番，多分布在我国福建、浙江、广东等长江以南地区。近几十年,我国番鸭产业快速发展。由于番鸭品种的自身特点及各种新疫病的不断出现如水禽呼肠孤病毒病和坦布苏病毒病,造成番鸭养殖的技术要求越来越高。下面具体来了解一下：番鸭养殖要点番鸭主要病毒病及其防控要点。一、雏番鸭呼肠孤病毒病俗称番鸭“花肝病”或“肝白点病”，是由番鸭呼肠孤病毒引起的高发病率和高死亡率的传染病。1997年开始在我国流行，发病日龄小，发病率高，病死率高，耐过鸭成为僵鸭。诊断要点：雏鸭怕冷，常挤成一堆，番鸭精神委顿，全身乏力、脚软或拐脚。肛门周围有白色或淡绿色稀粪。剖检见肝脏、脾脏肿大或稍肿大，表面和切面有弥漫性、大小均匀、灰白色坏死点，脾脏的白色坏死点比肝脏上的白点略大，发病后期雏鸭见心包膜严重。成年鸭未见发病。防控要点：可在番鸭1日龄时注射番鸭呼肠孤病毒病弱毒疫苗。发病鸭使用氟苯尼考、阿莫西林等广谱抗生素药物防治细菌病的继发感染，饮水中添加保肝护脾的药物和提高免疫力的药物（如黄芪多糖）来改善病情。及时隔离淘汰发病鸭，做好雏鸭的保温工作，特别是在冬季防止病鸭聚集，对行走困难的发病鸭加强护理，必要时可以人工辅助给食。二、新型鸭呼肠孤病毒病俗称“鸭出血坏死性肝炎”，是2005年以来在我国出现的一种新疫病。发病日龄小（以5～10日龄居多），病死率高，易感宿主广，番鸭、半番鸭、麻鸭、樱桃谷鸭、北京鸭等都易感。种鸭感染该病后，雏鸭的发病率特别高。诊断要点：精神沉郁，突发死亡。死亡鸭肝脏和脾脏出现不规则坏死和出血，心肌出血和法氏囊出血，肾脏出血。防控要点：淘汰带毒种鸭（父母代）。种鸭免疫灭活苗，使后代雏鸭有母源抗体保护。加强雏鸭的饲养管理，饲喂电解多维，做好保温工作，减少应激。对死亡率高的鸭群可用禽干扰素或植物血凝素进行治疗。三、番鸭病毒性肝炎病毒性肝炎是一种传播迅速、死亡率高的烈性传染病，主要侵害3周龄以内的雏鸭，1周龄内死亡率高达95%以上。各品种鸭均易感，一年四季可发，冬、春季节多发。诊断要点：突然发病，发展迅速，精神沉郁，食欲废绝，濒死鸭运动失调，身体倒向一侧，似游泳状，死亡鸭呈角弓反张姿势。成年鸭不易感染。剖检病变主要见肝脏肿大、质脆呈土黄色，表面有条状或点状新鲜出血点或血斑。防控要点：种鸭接种疫苗，其后代雏鸭获得母源抗体，从而保护雏鸭度过易感危险期，避免该病发生，是最有效的预防措施。2～5日龄雏鸭注射雏鸭病毒性肝炎弱毒疫苗。发病鸭用高免卵黄或者血清制剂进行颈部皮下紧急注射，重病鸭间隔12～36小时重复注射1次。及时隔离淘汰发病鸭，鸭舍彻底清洗和消毒，在饮水中补充维生素和矿物质。选购雏鸭时了解种鸭是否接种过病毒性肝炎疫苗。四、雏番鸭细小病毒病俗称“三周病”，仅番鸭发病，以腹泻、喘气为主要特征。该病从20世纪80年代开始流行，主要侵害7～21日龄雏番鸭，发病率为27%～62%，病死率为22%～43%。随着番鸭日龄的增大，发病率、死亡率逐渐降低。诊断要点：病鸭精神委顿、羽毛蓬松、蹲伏于地、张口呼吸、喙部发紫、拉灰白色或淡绿色稀粪。剖检主要见胰腺上布满针尖大小的白色坏死点，肠道炎症伴有不同程度的充血和出血。防控要点：雏番鸭1～2日龄注射雏番鸭细小病毒病弱毒疫苗。已感染发病的雏番鸭用高免血清或卵黄抗体皮下注射，结合抗生素综合防治，治愈率较高。五、雏番鸭小鹅瘟该病是一种急性、高发病率和高死亡率传染病。发病日龄多为5～26日龄，主要感染雏鹅和雏鸭。病鸭精神沉郁，采食减少，拉水样稀粪。成年鸭不易感染。诊断要点：病死率高，腹泻，小肠外观肿胀，十二指肠肠内黏膜出血，部分病死鸭在小肠和盲肠内均可见“香肠样”的肠栓塞。无番鸭“三周病”的张口呼吸症状，发病率和死亡率比“三周病”更高。防控要点：1～2日龄番鸭免疫接种小鹅瘟弱毒疫苗或番鸭细小病毒—小鹅瘟二联苗。发病鸭注射小鹅瘟高免血清或高免卵黄，使用抗病毒中药（如黄连）、肠道消炎药（如庆大霉素）进行配合治疗。六、高致病性禽流感该病是由高致病性禽流感病毒引起的急性、烈性传染病。近年来，水禽的发病率和致死率逐渐升高。各日龄、各品种鸭均易感，其中番鸭易感性最高，危害性大。发病肉鸭可见顽固型咳嗽、张口呼吸、采食量显著下降、精神沉郁、体温升高，有的病鸭可见神经症状（扭颈、转圈），发病率和死亡率高。蛋鸭常突发该病，出现采食量下降、产蛋量下降或停止、产异形蛋。诊断要点：病死率高，有神经症状。剖检见喉头黏液、气管出血及干酪样栓塞、内脏器官及肠道出血、卵巢变性及卵黄性腹膜炎、心肌条状坏死和胰腺透明样液化性坏死灶。防控要点：选择水禽专用的禽流感疫苗做好H5亚型禽流感疫苗的强制免疫，肉鸭在5～6日龄和14日龄各免疫1次。加强饲养管理，如冬、春季节的保温防潮，夏季的防暑降温，饲养环境的卫生消毒。发现疑似疫情，要向当地兽医主管部门报告，经确诊后进行封锁、扑杀、消毒。七、鸭瘟又名鸭病毒性肠炎，是一种急性、热性、败血性传染病，病原为疱疹病毒属鸭瘟病毒。该病一年四季可发，对不同大小、性别和品种的鸭都有易感性，以番鸭、麻鸭易感性较高。诊断要点：感染鸭体温升高至42～44℃，饮水增多，采食量减少，双脚麻痹，流泪，眼睑四周湿润。部分病鸭头部皮下水肿。严重腹泻，粪便为绿色稀粪。剖检见食道黏膜有灰黄色假膜覆盖，肝脏表面有大小不等的灰黄色坏死点或点状出血点，腺胃黏膜、肠道、小肠淋巴环出血，泄殖腔黏膜存在假膜和出血斑。防控要点：该病治疗效果不佳，故重在预防。疫区或疫区周围的鸭群，要定期注射鸭瘟弱毒疫苗，在25～30日龄免疫1次，种鸭产前二次免疫。发生鸭瘟时，对健康鸭群或疑似感染鸭紧急接种4～5倍剂量鸭瘟疫苗，发病鸭用鸭瘟高免血清进行治疗。对被病鸭污染的鸭舍、运动场、用具等应彻底进行消毒。商品番鸭养殖要点:1、雏番鸭饲养管理：（1）5周龄以内小番鸭称为雏番鸭。番鸭育雏一般采用人工给温或自温，环境温度要求如下：1周龄为27℃、2周龄24℃、3周龄22℃、4周龄20℃、5周龄18—20℃，具体施温要根据小番鸭行为和分布情况进行调节。（2）饲料要求采用全价颗粒饲料，0—3周龄颗粒直径不大于1.5mm，代谢能12.14—12.56兆焦／千克、粗蛋白19.5—22%。周龄以后全价饲料颗粒直径3.5—4mm，4代谢能11.70—12.56兆焦／千克，粗蛋白17—19%。（3）出壳菌鸭要求先饮水后开食，第1次饮水不超过出壳后24小时，先饮用0.1%高锰酸钾溶液或百毒杀溶液1—2天，然后在饮水中加适量氟呱酸类或强力霉素等药物，以增强体质和预防疾病。（4）饲养雏鸭的场地要垫上稻草或塑料布，并勤更换。鸭舍光线要充足，夜间人工光照到4周龄后完全自然光照。2、中鸭饲养管理：5—10周龄番鸭，消化能力增强，采食量大，耐粗饲，除每天增加全价饲料用量外，还应补充青草、青菜等青绿饲料，育肥到10周龄时，公番鸭体重达3.5—4千克，母番鸭1.5—2千克即可上市。管理上应将番鸭公母分开分群饲养，每群100—300只为宜，每一平方米可养5—8只。此阶段番鸭开始换羽，易出现啄癖，应注意断啄和遮光。番鸭有旱鸭之称，大群饲养也只需小面积水池或水盆供其饮水即可，但一定要注意饮水的清洁卫生，且不可间断。
一例樱桃谷肉鸭H9亚型禽流感和呼肠孤病毒混合感染的病例报告
一例樱桃谷肉鸭H9亚型禽流感和呼肠孤病毒混合感染的病例报告
作者：张青林 郭海祥 等
来源：《兽医导刊》 2019年第5期
张青林 郭海祥 薛素强 孙建涛 王政富/ 广州市华南农大生物药品有限公司
2017 年11 月北方某鸭场7 200羽樱桃谷肉鸭群（22 日龄）发生疾病，开始出现零星死亡，发病第5 天，日死亡率超过2%。鸭群主要表现为精神沉郁、采食量下降、软脚，拉白/ 绿色稀粪，伴有明显的呼吸道症状。经病原学和血清学诊断，确诊为H9 亚型禽流感和呼肠孤病毒混合感染。
一、现场及鸭群基本情况
该批肉鸭10 日龄脱温后转入半地面、半网床栏舍内饲养（饲养密度为4 ～ 5 羽/m2），现场察看发现栏舍内地面潮湿泥泞，饮水浑浊（图1）。22 日龄时开始出现零星死亡，发病第5 天，日死亡率已超过2%。鸭群精神沉郁、采食量下降、软脚；可见多数鸭有打喷嚏现象；栏舍内可见白/ 绿色稀粪。经问询得知鸭群1 日龄接种鸭病毒性肝炎活疫苗后，未再免疫其他疫苗。
二、解剖病变
现场剖检病死鸭，发现胸腺肿大出血；脾脏肿大出血、坏死；肝脏肿大，个别表面有白色纤维素性渗出物；胰脏呈褐色，有坏死灶，个别有胰脏边缘出血；肺脏水肿、出血，肾脏肿胀。
三、临床和实验室诊断
根据鸭群的临床症状、解剖病理变化和免疫背景分析，初步诊断为H9 亚型禽流感感染，暂不排除有腺病毒、呼肠孤病毒等其他病毒感染的可能。
采集病死鸭病变的肝脏、脾脏、胰腺肺等组织，送实验室做研磨处理和核酸提取，做PCR/RT-PCT 鉴定H9 亚型禽流感（AIV-H9）、腺病毒（FADV）和呼肠孤病毒（DRV）。同时采集鸭群血样品，送实验室分离血清，做AIV-H9 抗体检测。
病原学检测结果显示：所采集病料核酸鉴定为AIV-H9 阳性（图2）、DRV 阳性（图3）、腺病毒阴性（图4）。血清学检测结果显示：AIV-H9平均抗体5.63 log2，且整体度良好（表1）。
病毒性关节炎和其它呼肠孤病毒感染
病毒性关节炎和其它呼肠孤病毒感染
禽呼肠孤病毒可引起鸡和其它家禽发病。
一、 临床诊断
（一）、流行病学特点：自然发病多见于4~7周龄或更大些的鸡，发病率可达100%，但死亡率不足6%；潜伏期1~11天。由于病毒长期存在于盲肠扁桃体和跗关节内，病毒通过呼吸道和消化道排毒造成接触感染，偶然也可蛋传。
（二）、临床症状：
1、 病毒性关节炎/腱鞘炎 4~7周龄肉仔鸡感染后的主要症状为两侧性胫和跗关节部位的腱增粗，致腱运动障碍和有时由于腱断裂引起跛行。1~7日龄雏鸡可见肝炎、心肌炎和脾炎。
2、 吸收障碍综合症 1~3周龄雏鸡患吸收障碍综合症时出现：色素沉着减少，羽毛异常，骨质疏松、生长不平衡、粪中有未消化的饲料和死亡率升高。病变包括腺喂肿大，卡他性肠炎和引起跛行的腱鞘炎；组织病理学变化有腺胃炎、心肌炎、法氏囊萎缩、胰腺炎、肠炎和肠绒毛萎缩等。
二、 类症鉴别
吸收障碍综合症
呼肠孤病毒可引起前胃炎、生长迟缓以及羽毛异常，淡然这些症状也可由其它病因引起。网状内皮增生症病毒或霉菌毒素、细小病毒和杯状病毒等也可导致类吸收障碍综合症。
鸡胚病变与致细胞病变 许多病毒均可致鸡胚死亡，但与呼肠孤病毒的差异在于难易程度之不同。在CAM上，痘病毒和传染性喉气管炎病毒产生的痘斑与呼肠孤病毒相似，而单层细胞上，痘病毒、疱疹病毒和腺病毒等均可产生独特的细胞病变和包涵体。因此，呼肠孤病毒的确诊需要做进一步的理化和血清学试验。
三、 防治
（一）、毒株变异 在日本，已报道禽呼肠孤病毒有5个血清型，它们是从粪便、泄殖腔拭子和气管中分离出来的。在美国，已分离出4个血清型。虽然禽呼肠孤病毒的致病性尚待进一步研究，但所有分离毒株脚垫接种能使2周龄雏鸡发生关节炎或腱鞘炎。禽呼肠孤病毒不能凝集人的O型红血球，而人呼肠孤病毒则不能在鸡胚卵黄囊中生长，这是他们的区别。
（二）、疫苗毒株特征 1.活苗 大多数呼肠孤病毒疫苗株均由S113
禽呼肠孤病毒C-98、T-98分离株S2基因的克隆及序列分析
畜牧与饲料科学 Ａｎｉｍａｌ Ｈｕｓｂａｎｄｒｙ ａｎｄ Ｆｅｅｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ２０１３，３４（１）：１８—２２
禽呼肠孤病毒Ｃ一９８、Ｔ一９８分离株
２基因的克隆及序列分析
何建文 ，党 娟 ，关平原 ，一，李平安 ．一，高 魁 （１．内蒙古农业大学兽医学院，内蒙古呼和浩特０１００１８；２．农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室，内蒙古呼和浩 特０１００１８；３．内蒙古鄂尔多斯市东胜区兽医局，内蒙古东胜区０１７０００）
摘要：参考ＧｅｎＢａｎｋ中禽呼肠孤病毒１７６株（ＡＲＶ １７６）ｓ２基因设计引物．对禽呼肠孤病毒内蒙古地区分离 株Ｃ一９８和禽呼肠孤病毒天津地区分离株Ｔ一９８进行总ＲＮＡ的提取，以其为模板，应用ＲＴ—ＰＣＲ方法扩增 病毒Ｓ２基因的ｃＤＮＡ片段，将纯化的ｃＤＮＡ片段克隆到ｐＥＡＳＹ—Ｔ１栽体后进行序列测定。结果表明．获得 的ＡＲＶ Ｃ一９８和ＡＲＶ Ｔ一９８的．ｓ２基因全长为１ ３２４ ｂｐ，包括１５ ｂｐ的５ 非编码区和５８ ｂｐ的３ 非编码区，阅 读框位于５ 端第１６位核苷酸和第１ ２６６位核苷酸之间。ＡＲＶ Ｃ一９８和ＡＲＶ Ｔ一９８分离株Ｓ２基因的核苷酸同 源性很高，达到了９９．８％，将Ｃ一９８、Ｔ一９８株的Ｓ２基因核苷酸序列和参考毒株的Ｓ２基因序列进行同源性分 析，结果表明，ＡＲＶ Ｃ一９８和ＡＲｖ Ｔ一９８分离株的Ｊｓ２基因与参考毒株ＡＲＶ １７６、ＡＲＶ ９１８、ＡＲＶ ９１９、ＡＲＶ １７３３、ＡＲＶ ＧＸ２０１０、ＡＲＶ Ｓ１１３３和ＤＲＶ ＹＪＬ Ｓ２基因的核苷酸同源性最高，在９９．２％一９９．８％之间；与参考毒 株ＡＲＶ １３８和ＡＲＶ ＡＶＳ—Ｂ Ｓ２基因的核苷酸同源性在９２．１％一９４．１％之间：与参考毒株ＡＲＶ ６０１ＳＩ、ＡＲＶ ９１６ 和ＡＲＶ １０１７—１ Ｊｓ２基因的核苷酸同源性在８７．３％～８７．８％之间；与参考毒株ＤＲＶ ０９１、ＤＲＶ Ｓ１２和ＤＲＶ Ｓ１４ Ｊｓ２基因的核苷酸同源性在７７．３％～７８．２％之间；与参考毒株ＭＲＶ ３、ＭＲＶ ３一ｉｉｎ一１和ＭＲＶ ３一Ｔ３Ｄ ５２基因的 核苷酸同源性最低，在２．４％一５．５％之间。遗传进化树分析显示：ＡＲＶ Ｃ一９８和ＡＲＶ Ｔ一９８分离株与参考毒株 共分为４个遗传进化分支 关键词：禽呼肠孤病毒；Ｓ２基因；ＲＴ—ＰＣＲ；克隆；序列分析 中图分类号：￥８５２．６５９．４ 文献标识码：Ａ 文章顺序编号：１６７２—５１９０（２０１３）０１—００１８一Ｏ５
禽呼肠孤病毒C-98分离株M1基因的克隆及序列分析
试验研究 禽呼肠孤病毒Ｃ一９８分离株 Ｍ１基因的克隆及序列分析 祁海波 ，关平原 ，乌日罕 ，钟 罡。，特木尔巴根 ，马立峰 ，于富丽 ，李瑞纲 （１．内蒙古农业大学动物科学与医学学院，内蒙古呼和浩特０１００１８；２．内蒙古动物疫病预防与控制中心，内 蒙古呼和浩特０１００１０；３．内蒙古家畜改良工作站，内蒙古 呼和浩特０１００１０） 禽呼肠孤病毒（ａｖｉａｎ ｒｅｏｖｉｒｕｓ，ＡＲＶ）广泛存在 于世界范围内的肉鸡群中，临床上主要引起鸡关 节炎、腱鞘炎、吸收障碍综合征、矮小综合征和呼 吸道病等多种疾病。鸡感染ＡＲＶ后机体的免疫功 能降低，对其他病原微生物的易感性增加，致使鸡 群死亡率增加，给养禽业带来巨大的经济损失 ］。 该试验扩增并测定了禽呼肠孤病毒内蒙古分 离株ＡＲＶ Ｃ一９８ Ｍ１的基因序列，应用ＤＮＡｓｔａｒ软件 将测定序列与参考毒株序列进行了核苷酸及其推导 的氨基酸序列同源性的比较和分析，以期对内蒙古 分离株ＡＲＶ Ｃ一９８的遗传进化关系有更深的认识。 １禽呼肠孤病毒概况 ＡＲＶ的基因组是双股分节段ＲＮＡ，有１０个基 因片段，依次为Ｌ（Ｌｌ、Ｌ２、 ）、Ｍ（Ｍ１、Ｍ２、Ｍ３）和Ｓ （Ｓ１、Ｓ２、Ｓ３、Ｓ４）。其编码的病毒蛋白也相应分为 组 （ １、 、 ）、 组（ １、 、 ２Ｃ、 Ｎ、ＩｘＮＳ）和 组 （ｃｒｌ、ｏｒ２、ｏｒ３、ｃｒＮＳ和Ｐ１０、Ｐ１７）共１４种蛋白质 。其 ｄｓＲＮＡ基因组电泳图谱表现为多态性，可能导致不 同病毒株编码同一蛋白的基因节段在电泳条带中的 顺序发生互换０ ］，尤其多节段的ＲＮＡ病毒更易发 生遗传变异，同自然界中禽流感病毒株之间会出现 基因交换和基因重组现象一样。由于这些特点，ＡＲＶ 容易发生变异，能够导致新的毒株的出现。Ｋｏｏｐｍａｎ 等报道了波兰和荷兰出现新血清型和新致病特点的 ＡＲＶ一肠炎型呼肠孤病毒，能与已有ＡＲＶ的阳性血 清发生不对称交叉反应 ］。 收稿日期：２００８—０３．１７ 基金项目：内蒙古自然科学基金资助项目 （２０ｏ３Ｏ８０２Ｏ４０５）。 作者简介：祁海波（１９８１一），女，在读硕士研究生， 主要研究方向为动物传染病学。 通讯作者：关平原（１９６１一），男，教授，博士，主要研 究方向为动物传染病学。Ｅ—ｍａｉｌ：ｇｐｙｎｍ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｒｎ．ｃｎ。 ＠ 堕黪 摘要：参考ＧｅｎＢａｎｋ发表的禽呼肠孤病毒 Ｍ１基因序列设计２对引物（Ｍ１—１、Ｍ１－２）Ｏ 应用ＲＴ－ＰＣＲ扩增禽呼肠孤病毒内蒙古分 离株Ｃ一９８的Ｍ１基因序列。将纯化的目的 基因片断与ＰＭＤ１９－Ｔ栽体连接并转化 ＤＨ５ａ感受态细胞，将经鉴定为阳性的重组 菌送生物工程公司测序。结果表明，ＡＲＶ Ｃ一９８株ＭＩ基因片段长２ ２８３ ｂｐ，具有完 整的开放性阅读框架，鳊码７３２个氨基酸 残基的 ｌ蛋白。ＡＲＶ Ｃ一９８分离株Ｍ１基 因与ＡＲＶ参考毒株Ｍ１的核苷酸同源性为 ８９．１％～９９ ７％，与哺乳动物Ｍ１基因序列÷ 同源性较低，约为２８％。 。 关键词 禽呼肠孤病毒；克隆 序歹 分析；ｌＭｌ基因 中圈分类号．Ｓ８５ ６５９．４ ｊ文献标识码：Ａ 文章顺序编号：１６７２—５１９０（２￣８）０３－００２６－０３ 目前，对ＡＲＶ Ｍ组基因的研究主要集中在 Ｍ２和Ｍ３上，对Ｍ１的分子生物学研究较少。Ｍ１ 基因全长２ ２８３ ｂｐ，编码内壳蛋白 １。Ｍ２基因全 长２ １５８ ｂｐ，编码外壳蛋白 ２，它与病毒吸附宿主 细胞和转录酶的激活有关。 ２Ｃ和 ２Ｎ是 ２的 十四（烷）酰化及水解产生的Ｃ端和Ｎ端的片段， 其切割位点在 ２蛋白Ｎ末端４２和４３位氨基酸 之间。Ｍ３基因全长１ ９９６ ｂｐ，编码非结构蛋白 ＩｘＮＳ。 ＮＳ呈弱酸性，含有１０个半胱氨酸。ＩｘＮＳ在 病毒颗粒聚集中起着关键的作用，形成病毒的复 制起点，是病毒复制和组装的必要条件 一］。 ２材料与方法 ２．１毒株与菌株：ＡＲＶ Ｃ一９８分离株，由内蒙古农 业大学动物传染病教研室分离保存；Ｅ．ｃｏｌｉ ＤＨ５ｅｔ 菌株，由内蒙古大学生命科学学院惠赠。 畜牧与饲料维普资讯 １ ２ ３ ４ １００ ２５０ ５００ ７５０ １０ｏＯ ２０ｏＯ １．空白对照； ２．ＡＲＶＣ一９８ Ｍ１～１ＰＣＲ 产物； ３．ＡＲＶＣ＿９８Ｍ１—２ＰｃＲ产物； ４．ＤＬ２０００ ＤＮＡ Ｍａｒｋｅｒ。 图１ ＡＲＶＣ一９８ Ｍ１—１、Ｍ１—２ Ｔ—＿ＰＣＲ扩增结果 １ ２ ３ ４ １００ ２５０ ５００ ７５０ １０００ ２Ｏｏ０ １ＡＲｖｃ一９８Ｍ１—１Ｐ（Ｒ产物；２ＡＲＶＣ－９８Ｍ１－ ２ ＰＣＲ产物；３．空白对照；４．ＤＬ２Ｏｏ０ ＤＮＡ Ｍａｒｋｅｒ 图２ ＡＲＶＣ一９８重组质粒ＰＣＲ鉴定 ２．２ 试剂：Ｅｘ Ｔａｑ ＤＮＡ聚合酶、ＡＭＶ反转录酶、 ＤＬ２０００ ＤＮＡ Ｍａｒｋｅｒ、ＰＭＤ１９一Ｔ载体、质粒提取试 剂盒、ＤＮＡ胶回收试剂盒、限制性内切酶ＸｂａＩ、 ＳａｌＩ等购自大连宝生物工程有限公司。 ２．３ 参考毒株序列：ＡＲＶ Ｓ１ １３３，登录号： ＡＹ６３９６１０；ＡＲＶ １７６，登录号：ＡＹ５５７１８９；ＡＲＶ １３８，登录号：ＡＹ５５７１８８；ＡＲＶ １７３３，登录号： ＡＹ６３９６１２；ｌＡＲＶ ２４０８，登录号：ＡＹ６３９６１３；ＡＲＶ ＯＳ１６１，登录号：ＡＹ６３９６１９；ＡＲＶ ９１８，登录号： ＡＹ６３９６１７；ＡＲＶ １０１７—１，登录号：ＡＹ６３９６１１；ＭＲＶ Ｔ１Ｌ，登录号：ＡＦ４６１６８２；ＭＲＶ Ｔ２Ｊ，登录号： ＡＦ１２４５１９；ＭＲＶ Ｔ３Ｄ，登录号：ＡＦ４６１６８２。均由 ＧｅｎＢａｎｋ获得。 ２．４引物的设计与合成：根据ＧｅｎＢａｎｋ发表的 ＡＲＶ Ｍ１基因序列设计２对引物，由大连宝生物工 程有限公司合成。引物如下： Ｍ１—１ 上游：５ 一ＧＣＴｍ℃ＴＣＧＡＣＡＴＧＧＣＣＴＡ一３ 下游：５ 一ＴＣＣＡＡＡＧＣＡＴＣＡＣＣＣＡＣＡＴＣ一３ Ｍ１—２上游：５ 一ＡＧＣＴＣＡＣＧＴＣＡＡＣＴＧＴＡＴＣＣ一３ 下游：５ 一ＧＡＴＧＡＧＴＡＴＣＴＣＡＡＧＡＣＧＡＣ一３ ２．５病毒ＲＮＡ提取：按试剂盒说明书进行。 ２．６ ＲＴ—ＰＣＲ的扩增：ＲＴ—ＰＣＲ反应条件为：４２ ｏＣ 作用４５ ｒａｉｎ，９４ ｏＣ作用３ ｍｉｎ，９４ ｏＣ作用３０ ｓ，５４ ｏＣ 作用４５ ｓ，７２ ｏＣ作用１２０ ｓ，３５个循环，７２ ｃＣ延伸 １０ｍｉｎ。取１Ｏ ＬＰＣＲ产物与２ Ｌ上样缓冲液？昆 合、加样，１％的琼脂糖凝胶１００ Ｖ电泳３０ ｍｉｎ，在 紫外凝胶成像仪上观察结果。 ２．７ Ｍ１基因克隆与鉴定：将目的基因片断切胶回 试验研究 。 ． ： １００ ２５０ ５００ ７５０ １０ｏＯ ２０ｏＯ １ ２ ３ ４
养鸡技术讲座：第六十四讲 禽呼肠孤病毒感染（上）
养鸡技术讲座：第六十四讲 禽呼肠孤病毒感染（上）
潘光炎
【期刊名称】《甘肃畜牧兽医》
【年(卷),期】1994(024)006
【摘 要】养鸡技术讲座第六十四讲禽呼肠孤病毒感染（上）甘肃农业大学兽医系潘光炎呼肠孤病毒（ＴｈｅＲｅｏｖｉｒｕｓｅｓ）是呼吸道肠道孤儿病毒（ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｅｎｔｅｒｉｃｏｒｐｈａｎｖｉｒｕｓ）的缩写，可分为两个主要的群，即哺乳动物来源和禽类来源。这两个...
【总页数】3页(P27-29)
【作 者】潘光炎
【作者单位】无
【正文语种】中 文
【中图分类】S858.312.6
【相关文献】
1.养鸡技术讲座：第六十七讲 禽病毒性肾炎 [J], 朱其太;张运凤
2.规模化肉鸡场鼻气管鸟杆菌、禽呼肠孤病毒和禽偏肺病毒感染状况的血清学调查
[J], 付岳林;刘聚祥;崔明仙;白晓;李连敏;吕建国;张诚;陈立功;郝丹;王学静
3.σA蛋白表位在鸭和禽呼肠孤病毒感染中的血清学诊断技术应用 [J],
4.禽呼肠孤病毒感染DF1细胞后干扰素刺激基因在转录水平表达量的动态变化 [J],
王盛;张民秀;谢志勤;邓显文;万丽军;谢芝勋;谢丽基;罗思思;范晴;张艳芳;曾婷婷;黄娇玲
5.养鸡技术讲座第六十五讲禽呼肠孤病毒感染（下） [J], 潘光炎
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略鸡新城疫、传染性支气管炎、传染性法氏囊病、呼肠孤病毒感染四联灭活疫苗产品说明书和标签
附件2(略)
鸡新城疫、传染性支气管炎、传染性法氏囊病、呼肠孤病毒感染四联灭活疫苗产品说明书和标签
一、鸡新城疫、传染性支气管炎、传染性法氏囊病、呼肠孤病毒感染四联灭活疫苗说明书
兽用
【兽药名称】
通用名 鸡新城疫、传染性支气管炎、传染性法氏囊病、呼肠孤病毒感染四联灭活疫苗
商品名 禽必威®大四联
英文名 Newcastle Disease，Infectious Bronchitis，Infectious Bursal Disease and Reovirus
Vaccine，Inactivated
汉语拼音 Ji Xinchengyi、Chuanranxingzhiqiguanyan、Chuanranxingfashinangbing、
Huchanggubingduganran Silian Miehuoyimiao
【主要成分与含量】 含灭活的鸡新城疫病毒Clone 30株，每羽份至少含50PD50或1/50羽份至少能刺激产生4log2HI单位抗体；含灭活的传染性支气管炎病毒M41株，每羽份至少能诱导产生6.0log2HI单位抗体；含灭活的传染性法氏囊病病毒D78株，每羽份至少能刺激产生12.5log2VN单位抗体；含灭活的呼肠孤病毒1733株和2408株，每羽份至少能诱导产生5.0log2VN单位抗体。
【性状】 乳白色乳剂。
【作用与用途】 用于预防鸡新城疫、传染性支气管炎、传染性法氏囊病和呼肠孤病毒感染。
【用法与用量】 适用于种鸡的加强接种，肌肉或颈下部皮下注射，每只0.5ml。免疫种鸡的子代通过母源抗体获得被动免疫力。
接种的最佳时间和方法在很大程度上取决于当地的具体情况。因此，接种前应征求当地兽医的意见。
【不良反应】 如按说明书正确接种健康鸡，应无严重不良反应。有时在接种部位出现微肿，可持续数周，若接种时严格执行无菌操作，则不会造成永久性的组织损害。
【注意事项】
变异型高致病性鹅源禽呼肠孤病毒的分离和鉴定
变异型高致病性鹅源禽呼肠孤病毒的分离和鉴定
钱金涵;朱亭帆;王强;马陈淑;秦爱建;金文杰
【期刊名称】《中国兽医杂志》
【年(卷),期】2024(60)2
【摘 要】为了探究2020年江苏省扬州市江都区某鹅场发生的1起以肝脏和脾脏出血为典型病变特征的急性传染病病因,本试验采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测病死鹅肝脏和脾脏研磨液中禽呼肠孤病毒(ARV)的感染情况,将聚合酶链反应(PCR)阳性病料进一步进行病毒的分离、鉴定、血凝性和致病性测定及遗传进化分析。结果显示,鸡胚中分离的病毒为ARV,将其命名为ARV-JSJD-2020;该病毒分离株接种鸡胚24 h后即可致其死亡;能感染Vero细胞产生细胞病变;没有血凝活性;鸡胚半数致死量(ELD50)为10^(-4.166)/0.2 mL;动物回归试验中雏鹅24 h即出现死亡现象,肝脏主要病变为局灶性坏死;σC基因序列分析显示,该分离株分类上属于水禽源呼肠孤病毒分支,但与目前疫苗株的亲缘关系较远。结果表明,本试验分离得到的ARV-JSJD-2020可以为后续鹅源ARV的防控和疫苗的研发提供参考依据。
【总页数】8页(P1-8)
【作 者】钱金涵;朱亭帆;王强;马陈淑;秦爱建;金文杰
【作者单位】扬州大学兽医学院;扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室;江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;扬州大学动物疾病检测与技术服务中心
【正文语种】中 文 【中图分类】S855.3
【相关文献】
1.一株鹅源呼肠孤病毒的分离鉴定及致病性研究2.禽呼肠孤病毒鸡源分离株的鉴定与人工感染试验3.一株基因V型禽呼肠孤病毒的分离鉴定与致病性研究4.一起鹅源番鸭呼肠孤病毒的分离鉴定5.鹅源番鸭呼肠孤病毒的分离鉴定
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规模化肉鸡场鼻气管鸟杆菌、禽呼肠孤病毒和禽偏肺病毒感染状况的血清学调查
3规模化肉鸡场鼻气管鸟杆菌、禽呼肠孤病毒和
禽偏肺病毒感染状况的血清学调查
付岳林1，崔明仙1，白晓1，李连敏2，吕建国3，张诚1，陈立功1*，郝丹4，王学静5*，刘聚祥1（1.河北农业大学动物医学院/农业部动物疫病病原生物学华北科学观测实验站071001；2.石家庄市牧工商开发总公司050000；3.唐山市畜牧工作站063003；4.河北省畜牧兽医学会050000；5.河北省畜牧兽医研究所071000）摘要：为了解规模化肉鸡场鼻气管鸟杆菌(Ornithobacteriumrhinotracheale，ORT)、禽呼肠孤病毒（AvianReovirus，ARV)和禽偏肺病毒（Avianmetapneumovirus，aMPV）的感染情况，用ELISA方法对2017年冬季和2018年春季自河北唐山地区动态采集的肉鸡血清进行了ORT、ARV和aMPV抗体检测。结果表明：唐山地区规模化肉鸡场在冬、春两季均存在ORT、ARV和aMPV这3种病原的混合感染，尽管冬、春两季肉鸡群3种抗体水平存在动态差异，但两季均各出现了2次ORT感染、2次ARV感染和1次aMPV感染。应引起相关部门和人员高度重视。关键词：肉鸡；鼻气管鸟杆菌；禽呼肠孤病毒；禽偏肺病毒；血清学调查
鼻气管鸟杆菌(Ornithobacteriumrhinotracheale,ORT)感染是禽类的接触性传染性疾病，该病以呼吸困难、生长障碍及严重的纤维素性化脓性肺炎和气囊炎为特征，且易继发或并发新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、鸡传染性贫血病毒、大肠杆菌和败血支原体等病原的感染，导致感染禽的死亡率增高、生长减缓，给养禽业造成了严重的经济损失[1-2]。禽呼肠孤病毒（AvianReovirus,ARV)为呼肠孤病毒科、正呼肠孤病毒属的成员，该病毒感染可引起鸡多种病症，包括病毒性关节炎/腱鞘炎、矮小综合征、呼吸道疾病、免疫抑制性疾病和吸收障碍综合征[3-6]。现已公认副黏病毒科、肺病毒亚科、偏肺病毒属的禽偏肺病毒（Avianmetapneumovirus,aMPV）感染可引起鸡肿头综合征和禽鼻气管炎[7]，感染鸡群主要表现眶下窦及眶周肿大和呼吸道症状。本研究对唐山地区规模化肉鸡场进行了ORT、ARV和aMPV的血清学调查，了解该地区肉鸡ORT、ARV和aMPV的感染情况，以期指导生产。1材料与方法1.1材料2017年冬季和2018年春季自河北唐山地区某规模化肉鸡场采集血清共184份。该规模化肉鸡场未免疫过ORT疫苗、ARV疫苗和aMPV疫苗。检测ORT抗体、ARV抗体和aMPV抗体用的ELISA试剂盒均为美国IDEXX公司产品。1.2方法严格按照1.1中3种ELISA检测试剂盒操作说明对采集的血清进行检测、阳性判定及抗体效价计算。对数据分别按照季节、日龄进行分析。2结果2.1冬季肉鸡ORT、ARV和aMPV抗体检测结果冬季不同日龄的的商品肉鸡血清检测ORT抗体、ARV抗体和aMPV抗体结果见表1和图1。检测结果表明，冬季肉鸡1~7日龄血清的ORT平均抗体滴度呈上升趋势，7~14日龄呈下降趋势，14~21日龄呈急剧上升趋势，21~35日龄ORT平均抗体滴度呈下降趋势，表明该鸡群在养殖过程中出现了2次不同程度的ORT感染。1~7日龄的ARV平均抗体滴度呈上升趋势，7~28日龄ARV抗体水平呈下降趋势，28~35日龄ARV抗体水平呈缓慢上升趋势，表明该鸡群在养殖过程中出现了2次不同程度的ARV感染。1~21日龄，商品肉鸡aMPV平均抗体滴度呈下降趋势，21~28日龄aMPV抗体水平呈缓慢上升趋势，28~35日龄aMPV抗体平均滴度又逐渐下降，表明该鸡群在养殖过程中出现了1次aMPV的轻度感染。