冻存样本核蛋白提取方法

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2. 样本解冻后，取适量组织样本（细胞样本直接进行第 4 步），加冷 PBS，用组织 匀浆器匀浆①至无明显肉眼可见固体（或用液氮研磨），冰上静置 5 分钟，小心 将上清吸入另一预冷的干净离心管。
3. 在 4℃，1000×g 条件下离心 2-3 分钟，弃上清。 4. 每 100mg 组织样本或 50ul 细胞压积中加入 200μl 冷的提取液 A，高速涡旋振荡
15 秒，置冰上 10 分钟。 5. 再次高速涡旋振荡 5 秒，然后在 4℃，16000×g 条件下离心 5 分钟。 6. 沉淀用 PBS 洗涤一次，然后在 4℃，16000×g 条件下离心 5 分钟，弃上清。 7. 在沉淀中加入 100μl 冷的提取液 B，高速涡旋振荡 15 秒。 8. 置冰上 40 分钟，每隔 10 分钟高速涡旋振荡 15 秒。 9. 在 4℃，16000×g 条件下离心 10 分钟。 10. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。 11. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
取核蛋白。提取过程简单方便，可在 1 小时内完成。制备的核蛋白纯度高，较少交叉污染。 提取的蛋白可用于 Western Blotting、转录活性分析、Gel shift 凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、 酶活性测定等蛋白研究。
使用方法：
1. 提取液制备：每 200ul 冷的蛋白提取液 A 和 B 中分别加入 2ul 蛋白酶抑制剂混 合物，混匀后置冰上备用。
冻存样本核蛋白提取方法
产品组成：
产品组成 规格
提取液 A 提取液 B 蛋白酶抑制剂混合物
BB-3166-1 50T 10ml 10ml 250ul
BB-3166-2 100T 20ml 20ml 500ul
储存条件： 蛋白提取液 2-8℃保存； 蛋白酶抑制剂-20℃保存。
有效期： 一年。
产品简介： 贝博冻存样本核蛋白提取试剂盒适用于从各种经过冻存的细胞和各种实体组织中提
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