针刺对快速老化痴呆模型小鼠SAMP8学习记忆能力的影响_刘金凤
不同电针对快速老龄化痴呆小鼠行为学和海马星形胶质细胞的影响
近年 来 研 究 发 现 ，星形 胶 质 细胞 在 ＡＤ等 以认 知
功 能 障碍 为主要 表现 的神 经 系统退 行性 疾病 中发挥 着
收 稿 日期 ：２０１８—０５—１０
重 要 的作用 。ＡＤ早 期 星形胶 质 细 胞被 广泛 激 活 ，
修 回 日期 ：２０１８—０６—０５ ★ 国家 自然科 学基 金委青年基金项 目（８１６０３６７８）：督脉 电针治疗 ＡＤ双转基 因 Ｊ、鼠不同脑 区神经元凋亡作 用机制 的研 究，负责人 ：唐银 杉；国家
研 究 方 向 ：影 响 针 灸 疗 效相 关 因 素 的研 究 。
［ 删 Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ／Ｍｏｄｅｒｎｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｍａｔｅｒｉａ Ｍｅｄｉｃａ］ ９５３
２０１８ 第 二十 卷 第六 期 ★ｖ０ｌ＿２０ Ｎｏ．６
自然科 学基金委青年基金 项 目（８１５０３６５４）：逆针 灸对老年性痴 呆小鼠“抗衰老基 因”Ｋｌｏｔｈｏ的调控 ，负责人 ：许安 萍。
★★ 通讯 作者 ：唐银杉 ，博士 ，主 治医师 ，研 究方 向：针刺 治疗神 经 系统疾病的 临床与机理研 究 ；邬继红 ，医学硕士 ，教授 ，副主任 医师，硕 士生导师 ，
激 活 的星 形胶 质 细胞可 诱发 多种 炎症 因子释 放 ，加 剧 淀粉样蛋 白（ｂｅｔａ ａｍｙｌｏｉｄ ｐｒｏｔｅｉｎ，Ａ ）沉积并诱导神经 元 功 能 障碍 ｕ ，从 而 改善 认 知 功 能 。因此 星形 胶 质 细 胞 是 调 节 神经 炎症 的重 要 靶点 。基 于此 ，本 实 验拟 从 电针调 节 活化 的星形 胶质 细胞 的表 达来 探讨 针 刺干 预 治疗 ＡＤ的作 用机 制 。
针刺留针与否对血管性痴呆大鼠认知功能及皮层神经元损伤的影响
针刺留针与否对血管性痴呆大鼠认知功能及皮层神经元损伤的影响摘要：目的?^察留针与不留针情况下针刺“百会”配伍“足三里”对血管性痴呆（VD）大鼠认知功能及大脑皮层神经元损伤的影响，探讨留针与否的针刺效应。
方法采用永久性双侧颈总动脉结扎方法建立VD 大鼠模型。
实验大鼠随机分为假手术组、模型组、留针组、不留针组，每组8只。
针刺模型大鼠“百会”+“足三里”后，Morris水迷宫实验检测大鼠空间学习记忆能力，尼氏染色检测大鼠大脑皮层神经元损伤。
结果与假手术组比较，模型组大鼠空间学习记忆能力明显降低，皮层神经元损伤明显；与模型组比较，留针组、不留针组空间学习记忆能力均显著提高，皮层神经元损伤改善；其中，留针组空间学习记忆能力提高更多，皮层神经元损伤改善更明显。
结论针刺可改善VD大鼠空间学习记忆能力和皮层神经元损伤，留针效果更好。
关键词：血管性痴呆；针刺效应；留针；认知功能；皮层神经元；大鼠DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2018.05.014中图分类号：R245 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2018）05-0061-05Effects of Acupuncture Needle Retaining or Not on Cognitive Function andCortical Neurons in Rats with Vascular DementiaLI Tian-ran1，2，YE Yang2，YANG Jing-wen2，XIAO Ling-yong2，WANG Xue-rui2，3，YAN Chao-qun2，SHAOJia-kai2，LIU Cun-zhi41. Tianjin University of Traditional Chinese Medicine，Tianjin 300193，China；2. Acupuncture Center Affiliated to Beijing Hospital of TCM Affiliated to Capital Medical University，Beijing 100010，China；3. Beijing Institute of Traditional Chinese Medicine，Beijing 100010，China；4. Dongfang Hospital，Beijing University ofChinese Medicine，Beijing 100078，ChinaAbstract：Objective To compare the effects of acupuncture needle retaining or not in “Baihui” compatibility “Zusanli” on cognitive function and cortical neurons in rats with vascular dementia （VD）；To discuss the acupuncture effects of acupuncture needle retaining or not. Methods VDmodel was established by permanent bilateral common carotid arteries occlusion. The experimental rats were randomly divided intosham-operation group，model group，needle retaining group，without needle retaining group，with 8 rats in each group. The acupoints “Baihui” and “Zusanli” were used. Morris water maze test was employed to detect the abilities of spatial learning and memory in rats. Nissl’s staini ng and immunofluorescence technique were used to observe the status of cortical neurons. Results Compared with sham-operation group，the abilities of spatial learning and memory decreased significantly and the injuries of cortical neurons were severe. Compared with model group，the abilities ofspatial learning and memory in needle retaining group and without needle retaining group increased significantly and the injuries of cortical neurons were improved，among which，the abilities of spatial learning and memory was increased more，and the injuries of cortical neurons were better improved in the needle retaining group. Conclusion Acupuncture can improve the abilities of spatial learning and memory and cognitive function，and acupuncture needle retaining has better effects.Keywords：vascular dementia；acupuncture effects；needle retaining；cognitive function；cortical neurons；rats基金项目：北京市教育委员会科技计划重点项目（KZ201710025025）通讯作者：刘存志，E-mail：lcz623780@ 血管性痴呆（vascular dementia，VD）是指以缺血缺氧性或出血性脑损伤造成的记忆、认知及行为等脑区低灌注的脑血管疾病所致的严重认知功能障碍综合征。
针刺对快速老化鼠脑、肝细胞核活性基因的影响
针刺对快速老化鼠脑、肝细胞核活性基因的影响温廷益;韩景献;李平;王舒;石学敏;邢来君【期刊名称】《中医杂志》【年(卷),期】2002(43)1【摘要】目的:探讨针刺的分子生物学作用机理。
方法:采用不同月龄快速老化模型鼠(SAM)为研究对象,以“调神益智,平肝通络”为治疗原则,取人中、内关、太冲为主穴,对8月龄的SAMP8进行针刺治疗,以正常老化的SAM R1作增龄性对照,以非针刺SAM P8作对照,用DNA酶Ⅰ作活性基因探针观察脑、肝细胞核活性基因变化情况。
结果:与非针刺组比较,针刺使8月龄的SAM P8脑、肝细胞核活性基因数增加,基因转录水平提高。
结论:证实针刺能在细胞核活性基因转录水平上起作用。
【总页数】2页(P28-29)【关键词】细胞衰老;针灸效应;脑细胞核;肝细胞核;活性【作者】温廷益;韩景献;李平;王舒;石学敏;邢来君【作者单位】天津中医学院第一附属医院;南开大学生命科学院【正文语种】中文【中图分类】R245【相关文献】1.双向电泳分析快速老化痴呆鼠脑蛋白质的异常表达及针刺的影响 [J], 于建春;彭永康;韩景献2.加味温胆汤对日本快速老化模型鼠肝细胞核活性基因的影响 [J], 王平;刘玲;邱幸凡;温廷益;石学敏3.针刺对快速老化鼠线粒体钙离子浓度和活性氧簇的影响 [J], 郝婷婷;付于;邢菁;郭睿婧;刘宇婧4.针刺对快速老化模型小鼠肝抗氧化酶活性及其基因表达水平的影响 [J], 刘一凡;石学敏;韩景献;王舒;李平5.针刺单穴对快速老化模型鼠衰老相关基因表达的影响 [J], 陆明霞;于建春;于涛;王舒;刘庆忠;董承超;韩景献因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
三七总皂苷对快速老化小鼠SAMP8空间探索和学习记忆力的影响
Ａｂ ｔａ ｔ Ｏｂｅｔ ｅ Ｔ ｖｓｇｔ ｔｅｒｌ ｖ ｇ ｆ ｃ ｏ ａａ ｏｏｉｅｅｏｉｅ（ Ｎ ）ｏ ｅｄｓｒｅ ｆｈ ｉｔ ｓ ｆ ｐｃ ｓｒ ｃ ： ｊｃ ｖ ｏ ｎｅｔ ａｅ ｈ ｉ ｉ ｆ ｔ ｆ ｎｘｎｔｇ ｓｎｓ ｉ ｉ ｉ ｅｅ ｎ ｅｅ ｐ ｎ ｄ Ｐ Ｓ ｎｔ ｉ ｄｒ ｅａ ｌｉ ａｅ ｈ ｏ ｏ ｔ ｂ ｉｅ ｏ ｓ ｓａｃ ，ｅｒｉｇａｄｍｅ ｏ Ａ Ｐ ｉ ｌ ｅ ｒ ｉ ａｅ ｅｒｈ ｌ ｎｎ ｎ ｍ ｒ ｉ Ｓ Ｍ ８ｗｔ Ａｚ ｉ ｇｄｓ ｓ．Ｍ ｅｈ ｄ ｈ ｓ ｏ ｒｓ ａ ｒ ｚ Ｍ ａ ｙｎ ｈ ｈ ｍｅ ｅ ｔｏ ｓＴ ｅｔ ｔ ｆ ｅ Ｍｏ ｉｗ ｔ ｅ（ ＷＭ）ｗ ｓ ｓｄｔ ｅ ｍａ ａ ｅ ｕ ｏ
吴登攀 ， 钟振 国 ， 王进 声 ， 王乃平 ， 雯艳 ，吕 良， 泽强 张 屈
（ 西 中 医学 院新药 研究 开 发 中心 ， 广 广西 南 宁 ５ ００ ） ３０ １
摘要 ： 目的 探讨 三七总皂苷 （Ｎ ） Ｐ Ｓ 对快速 老化小鼠 Ｓ Ｍ ８空间学习记忆功能 的改善作 用。方法 采用 Ｍ ｒｓ Ａ Ｐ ｏ ｉ 水迷 宫方 ｒ
法以寻求次数 、 逃避 潜伏期、 原平 台象限比 、 平 台次数等 为指 标观 察其 行 为 学改 变。结 果 Ｐ Ｓ高、 剂量 组在 Ｍｏ ｉ 跨 Ｎ 低 ｒｓ ｒ
水迷 宫测试 中， 逃避 潜伏期 明显低 于空白组 ； 求次数 、 平 台象 限比、 平 台次数 明显增 加 ， 空 白组 比较 有 显著性 差 寻 原 跨 与
Ｉ ｌｕｅ ｅ ｏ ｎｆ ｎｃ ｆ ＰＮＳ ｏ Ａｂｉ ｔｅ ｆ Ｓ ｃ ａ ｃ ｎ ｌ ｉ ｓ ｏ ｐａ ｅ Ｓｅ ｒ ｈ． Ｌｅ ｒ ｉ ｎｄ Ｍ ｅ ｏ ｙ ｉ Ｓ ｉ ａ ｎ ｎｇ ａ ｍ ｒ ｎ ＡＭ Ｐ８ ｗｉｈ ｔ
轻度认知功能障碍的非药物治疗
轻度认知功能障碍的非药物治疗老龄化加速痴呆患病率逐年升高。
使中晚期痴呆治疗效果不佳，早发现诊断早干预治疗，是有医学和经济意义的。
现认为轻度认知功能障碍(MCI)是介于正常老化及痴呆之间过渡状态，其中遗忘型MCI代表AD的超早期阶段[1]。
MCI在老年人中发生率大约5.3﹪，研究MCI重要的意义在于早期识别老年期痴呆高危个体并探索有效干预途径，延迟阻止老年痴呆发生发展。
用于延缓改善认知功能障碍的治疗方案，可大致分为药物和非药物治疗。
鉴于药物治疗有效性尚未有争议及可能存在的不良反应，目前非药物干预的有效性及安全性成为研究的热点。
我们对MCI 的非药物治疗手段的最新研究进展进行综述，使MCI患者的早期干预提供了依据。
1 认知训练是对认知的促进和改善已得到有效证实，目前认知训练具体方法、效果评价指标之间没有统一的标准[2]1.1 传统认知训练指应用人工认知干预方法训练来提高被干预者的认知功能。
MCI患者最易受损的认知功能是记忆力［3］。
现阶段认知训练方式上多采用记忆力训练和益智类活动训练［4-5］。
研究表明,记忆训练可使感受器接受传入性冲动，增加大脑神经细胞突触的信号传递，维持大脑正常代谢，促进大脑的可塑性发展［4］。
Jean等［6］将MCI患者分为两组，试验组接受2月的认知训练，结果显示试验组患者的记忆功能得到提高，且对自我认知功能的满意度也得到明显改善。
Belleville等的研究结果显示对认知功能障碍患者通过6周的情景记忆训练，受试者的认知功能有明显改善。
毛晓红等［7］运用思维导图对MCI老人进行分组训练，6个月时训练组MMSE和ADL表评分与训练前比较有改善，与对照组比较无显著差异；训练1年后，训练组较训练前及对照组就有改善。
徐洪洁［8］通过做一些动脑活动，如看图说话、倒背顺背数字及心算、脑筋急转弯游戏、拼图、图形推理、图片补充等，结果显示MCI患者记忆力、感知觉能力、逻辑思维能力、语言表达能力均有提高。
石学敏院士的醒脑开窍针法
(三) “醒脑开窍”针法对局灶性脑缺血模型大鼠脑 微血管系统机能、形态、能量代谢的影响
系天津市“八五”攻关子课题，获1995年度天津市科技进 步三等奖。
1.目的：从微循环及能量代谢角度探讨针刺机理。
a.对脑血流及软脑膜微血管的自律运动的影响。 b.对微血管形态的影响。 c.对能量代谢的影响。
b.针刺可降低兴奋性氨基酸水平，提高脑及血 浆SOD活性 ，降低LPO含量。
c.针刺可提高脑内乙酰胆硷含量。
d.针刺可提高血浆一氧化氮含量，可能是改善 脑循环的重要因素。
(八) 针刺对快速老化脑萎缩模型小白鼠(SAM-P/10)脑和肝核蛋白质的影响
系国家自然科学基金资助课题。
1.目的：观察醒脑开窍法主穴内关、人中对脑萎缩小鼠脑、肝核
肩贞、肩中俞、肩外俞，痛点刺络拔罐。
(8) 血管性痴呆：针百会、四神聪、
四白、太冲。
太冲
(9) 睡眠倒错：针上星、神门。
4.治疗时间
每日针2 次，10天 为1疗程， 持续治疗 3~5个疗 程。
(三)中风病的诊疗原则
1.诊断原则：中西医双重诊断，除 临床症状和体征外，必须具备脑血 管病的影 像学证据 如CT、MRI。
山东 祛痰开窍法 120 74.17
江苏 活血化瘀法 100 65.00
大连 补气养血法 280 68.00
湖北 补气养血法 256 75.78
合计
1008 68.22
西药组
例数 治愈+显效 %
66
59.10
28
60.00
20
20.00
32
34.28
经颅重复针刺对血管性痴呆模型大鼠认知功能及海马突触超微结构的影响
经颅重复针刺对血管性痴呆模型大鼠认知功能及海马突触超微结构的影响于国强;孙婧妍;关莹;唐祎周;杨添淞;石光煜;冯秋菊;曹燚;吴壮;张良;李红伟【期刊名称】《上海针灸杂志》【年(卷),期】2024(43)1【摘要】目的观察经颅重复针刺对血管性痴呆(vascular dementia, VaD)大鼠认知功能及海马CA1区突触素(synaptophysin, SYN)、微管相关蛋白-2(microtubule associated protein-2, MAP-2)表达的影响。
方法将56只SD大鼠随机分为空白组(14只)和造模组(42只)。
造模组建立VaD模型,将造模成功大鼠随机分为模型组(14只)、常规针刺组(14只)和经颅重复针刺刺激(repetitive transcranial acupuncture stimulation, rTAS)组(14只)。
造模成功后第2天,rTAS组采用经颅重复针刺;常规针刺组仅给予常规针刺手法;模型组与空白组给予以同等条件抓取及固定,不予针刺。
采用水迷宫评价大鼠学习记忆能力,采用旷场实验评价大鼠探索行为和自主活动能力,免疫印迹法检测海马CA1区SYP、MAP-2蛋白表达水平,透射电镜观察海马组织中突触超微结构。
结果与空白组比较,模型组逃避潜伏时间明显增加(P<0.05),穿越平台次数明显减少(P<0.05);与模型组比较,常规针刺组与rTAS组逃避潜伏时间明显减少(P<0.05),穿越平台次数明显增加(P<0.05);与常规针刺组比较,rTAS组逃避潜伏时间与穿越平台次数改变不明显(P>0.05)。
与空白组比较,模型组穿越格子数与后肢站立数明显减少(P<0.05);与模型组比较,常规针刺组与rTAS组穿越格子数与后肢站立数明显增加(P<0.05);与常规针刺组比较,rTAS组穿越格子数与后肢站立数明显增加(P<0.05)。
艾烟对快速老化模型小鼠脑内氨基酸类神经递质含量的影响
艾烟对快速老化模型小鼠脑内氨基酸类神经递质含量的影响目的观察艾烟对快速老化模型小鼠（SAMP8）脑内氨基酸类神经递质的影响，探讨艾烟的抗衰老作用效应及机制。
方法将70只SAMP8随机分为模型组和6个艾烟干预组。
另外选取10只正常老化小鼠（SAMR1）作为正常组。
艾烟干预分为低、中、高3个浓度，干预时间分别为15 min和30 min，每日干预1次，共28 d。
采用高效液相色谱法测定各组小鼠脑内谷氨酸（Glu）、天冬氨酸（Asp）、γ-氨基丁酸（GABA）含量。
结果模型组小鼠脑内Asp和Glu含量高于正常组，GABA低于正常组。
艾烟干预各组小鼠脑内Asp和Glu含量均低于模型组，GABA含量高于模型组，或与模型组相当。
不同浓度、时间艾烟干预对Asp和Glu的影响无差异。
中浓度30 min的艾烟干预可最大程度提高SAMP8脑内GABA。
结论艾烟干预可降低SAMP8脑内过高的Glu、Asp含量，升高过低的GABA含量，通过调整脑内氨基酸的异常代谢达到抗衰老的效应。
标签：艾灸；艾烟；氨基酸类神经递质；抗衰老；小鼠艾灸疗法是中医学主要疗法之一，应用范围十分广泛。
保健强壮、养生延年是艾灸的主要作用之一。
研究表明艾灸可通过提高免疫、调整内分泌、改善代谢等途径达到抗衰老的效应[1-3]。
艾灸作用除温热刺激、光、辐射等物理效应外，还存在艾燃烧生成物（即艾烟）的药用化学作用[4]。
目前对于艾灸机制研究多数集中于温热效应，对艾烟的效应研究尚不充分。
本实验选用快速老化模型小鼠（SAMP8）作为干预对象，通过观察艾烟对SAMP8脑内氨基酸类神经递质含量的影响，探讨艾烟抗衰老的作用效应，以期为艾灸疗法的作用机理研究提供参考。
同时，实验采用2×3析因设计，比较不同浓度及不同时间的艾烟干预下SAMP8脑内氨基酸类神经递质含量，探讨艾烟干预的适宜参数。
1 实验材料1.1 动物本实验选用清洁级6月龄雄性SAM小鼠80只，购自天津中医药大学第一附属医院动物中心，许可证号：SCXK（津）2008-0001。
头穴丛刺对血管性痴呆大鼠学习记忆功能神经递质和海马神经元突触结构的影响
照《 实验动物穴位 图谱》 取大 鼠的额区 、 顶前 区、 顶 区， 留针 ６
小时 ， １小时捻转 １ 次， 频率为 ２ ０ ０ ｒ ／ ｍ ｉ ｎ左右 ， 每次持续捻转
３分钟 ， 共治疗 ４周 ； 阳性 对照组 ， 取百会 、 大椎 ， 留针 ３ Ｏ分 钟， １ ０分钟捻转 １次 ， 百会穴 捻转频 率为 ２ ０ ０ ｒ ／ ｍ ｉ ｎ左右 ， 每
型 Ｊ 。大 鼠术前 １ ２小时禁 食 ， ４小时禁 水。用 １ ０ ％ 水合 氯
醛（ ３ ． ５ ｍ ｌ ／ ｋ ｇ ） 腹腔注射麻 醉 ， 仰卧 固定 ， 沿颈正 中切开 ， 分离 双侧颈 总动脉 ， 套以… ０’ 号丝 线双 重结扎 ， 缝 合。术 中大 鼠
２ ． ３ ． ２ 海马组织 Ａ ｃ ｈ 、 Ｄ Ａ、 ５一 Ｈ Ｔ的检测
丛刺 可改善 Ｖ Ｄ 大鼠学习记忆 能力， 其作 用可能 与减 少海 马神 经元 突触损 伤和增加 神 经递质 的释放 有
关。
主题词 痴 呆 ， 血 管性／ 针灸疗法 学习／ 针灸效应 记 忆／ 针灸效应 海马／ 针 灸效应 海马／ 超微结构
头穴丛刺 大 鼠
血管性痴呆 （ Ｖ Ｄ） 是 由各种脑血管疾病引起 的脑 功能障 碍而产生 的获得性 智 能损 害综 合征 ， 为 一种慢 性进 行 性疾
中国中医药科技 ２ ０ １ ３年 ９月第 ２ ０卷第 ５期 Ｓ ｅ ｐ ． ２ ０ １ ３ Ｖ ｄ ． ２ ０ Ｎ ｏ ． ５
・ ４ ４ ９・
头 穴 丛刺 对 血 管 性痴 呆 大 鼠学 习记 忆 功 能 神 经 递 质 和海 马神 经 元 突触 结构 的 影 响
杨俊 丽 郭文 海 李海涛 张 婷 张 良 别 、 荣 张 淼 赵 慧 寇 吉友 薛玉满
二苯乙烯苷对SAMP8小鼠学习记忆能力的改善作用_刘玲
2012 年 10 月
第 14 卷
第 10 期
中国现代中药
Modern Chinese Medicine
Oct. 2012
Vol. 14
No. 10
统计学意义（ P ＜ 0. 05 或 0. 01 ） 。 3. 4 可视平台试验 试验发现 SAMR1 组、石杉碱甲组、TSG 组的逃 避潜伏期和 SAMP8 组比较 （ P ＞ 0. 05 ） ， 差异无统计 学意义，即小鼠感觉、 视觉或运动功能方面的差异 未对其空间学习记忆产生明显的影响 。见图 3 。
· 12·
2012 年 10 月
第 14 卷
第 10 期
中国现代中药
Modern Chinese Medicine
Oct. 2012
Vol. 14
No. 10
重给药。SAMP8 对 照 组、 SAMRl 对 照 组： 0. 9% 氯 －1 化钠溶液 20 mL·kg ； 阳性药组： 石杉碱甲 0. 02 mg ·kg g·kg ； TSG 低剂量组： TSG 0. 033 g·kg ； TSG －1 中剂量组： TSG 0. 1 g·kg ； TSG 高剂量： TSG 0. 3 。 以上各组每日灌胃给药 l 次， 连续 45 d。 喂养结束后采用 Morris 水迷宫测试空间学习记忆能 力的改变。 2. 2 行为学测试 2. 2. 1 隐蔽平台试验（ hidden platform trial） 每天在 固定时间将小鼠面向池壁分别从入水点放入水中 ， 记录其在 100 s 内寻找到平台的时间 （ 逃避潜伏期 escape latency） ， 操 作 轻 柔， 避 免 不 必 要 的 应 激 刺 激。历时 5 d，每天 3 次，入池位置为平台对面象限 及所邻 2 个象限的池壁中点。 本实验将最大潜伏期 设为 100 s，如果小鼠在 100 s 未找到平台， 则由实 验者用手牵引其至平台上， 停留 30 s， 逃避潜伏期 记成 100 s。采用每天第 1 次的水迷宫训练数据作为 ［6 ］ 评价小鼠记忆力的指标 。 为避免小鼠直接看见平 台，在水中加入碳素墨水，每 3 d 换 1 次水。 2. 2. 2 探索试验 （ probe trial ） 隐蔽平台试验结束 24 h后，撤除平台， 任选 1 个入水点将小鼠放入水 中，记录其 100 s 游泳轨迹， 计算其在原平台象限 游泳时间和穿越原平台次数。 2. 2. 3 反向试验（ reversal trial） 将平台位置移至对 面象限，其余操作同隐蔽平台试验，训练 3 d。 2. 2. 4 可 视 平 台 试 验 （ visible platform trial ） 最后 1 d，让平台位置露出水面 1 cm，其余操作同隐蔽平 台试验。 2. 3 统计学处理 应用 SPSS Statistics17. 0 软件进行数据处理， 数 据以均数 ± 标准差表示， 组间比较用单因素方差分 析（ Analysis of variance ， ANOVA ） 检 验， P ＜ 0. 05 为有统计学意义。 3 结果与分析
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针刺对快速老化痴呆模型小鼠SAMP8学习记忆能力的影响刘金凤1，栗振杰1，徐思思1，张莹1，孙金平1，聂坤2，张雪竹2（1.天津中医药大学研究生院，天津300193；2.天津中医药大学第一附属医院针灸研究所，天津300193）
摘要：目的:研究“益气调血，扶本培元”针法对快速老化痴呆模型小鼠SAMP8学习记忆能力的影响。方法:选取SAMP8小鼠，分为SAMP8对照组、针刺组、非穴组，并设SAMＲ1对照组。针刺组采用“益气调血，扶本培元”针法，针刺
膻中、中脘、气海及双侧血海、足三里;非穴组取双侧胁下两个固定非经非穴点。应用Morris水迷宫观测各组小鼠空间参考记忆能力的变化，分析针刺对SAMP8小鼠认知功能的影响。结果:“益气调血，扶本培元”针法能有效改善SAMP8小鼠的认知能力。关键词：针刺;“益气调血，扶本培元”针法;痴呆;Morris水迷宫中图分类号：Ｒ749．16文献标志码：B文章编号：1000－1719（2013）06－1256－03
EffectofLearningandMemoryAbilitiesofＲapidAgingDementiaSAMP8MicebyAcupuncture
LIUJinfeng1，LIZhenjie1，XUSisi1，ZHANGYing1，SUNJinping1，NIEKun2，ZHANGXuezhu2（1.GraduateSchoolofTianjinUniversityofTraditionalChineseMedicine，Tianjin300193，China；2.AcupunctureInstituteofTheFirstAffiliatedHospitalofTianjinUniversityofTraditionalChineseMedicine，Tianjin300193，China）
Abstract：Objective：ToresearchtheeffectoftheabilitiesoflearningandmemoryoftherapidagingdementiaSAMP8micebyacupuncturemethodofYiqitiaoxueFubenpeiyuan．Methods：SAMP8miceweredividedintoSAMP8controlgroup，acupuncturegroupandnon－acupointgroup，andSAMＲ1controlgroup．TheacupuncturegroupusedYiqitiaoxueFubenpeiyuanacupunturemethod，Danzhong，Zhongwan，Qihai，andbilateralXuehaiandZusanli；non－acupointgrouptookbilateralribstwofixednon－acupoints．ThechangesofspatialreferencememorycapacityofmiceineachgroupwereobservedbyMorriswatermaze．TheeffectofacupunctureoncognitivefunctioninSAMP8micewasevaluated．Ｒesults：YiqitiaoxueFubenpeiyuanacupuncturemethodcaneffectivelyimprovethecognitiveabilityofSAMP8mice．Keywords：acupuncture；Yiqitiaoxue，Fubenpeiyuanacupuncturemethod；dementia；Morriswatermaze
收稿日期：2012－12－20基金项目：国家自然基金课题（81202739）；国家自然基金课题（81072882）；教育部博士点课题（20111210120004）；天津市
教委课题（20080217）作者简介：刘金凤（1986－），女，天津人，硕士研究生，研究方向：脑血管疾病。通讯作者：张雪竹（1972－），女，研究员，博士，研究方向：脑血管疾病。
阿尔兹海默病（Alzheimer'sdisease，AD）是老年人脑功能失调的一种表现，是以获得性智力衰退和行为人格变化为特征的一种病症，严重危害老年人的身体健康和生活质量。临床研究发现，应用“益气调血，扶本培元”针法治疗AD疗效显著［1］。Morris水迷宫实
验（Morriswatermaxe，MWM）由英国科学家ＲichardMorris于1981年首次设计使用以来，已成为一种研究
空间学习和记忆的标准模式，能较准确地反映动物的空间参考记忆能力，被广泛应用［2］。本研究选用快速
老化痴呆模型小鼠SMAP8作为研究对象，以正常老化鼠SAMＲ1为对照，观察“益气调血，扶本培元”针法对SMAP8鼠行为学的影响。1材料与方法
1.1动物选择及分组选取健康雄性8月龄SAMP8小鼠24只，随机分为对照组、针刺组、非穴组。选取8月龄同源SAMＲ1小鼠8只为对照组，均为雄性，由天津中医药大学第一附属医院实验动物中心提供。
1.2仪器Morris水迷宫由圆形水池、平台和记录系
统3部分组成。水池直径90cm，高50cm。随意将水池分为4个象限。实验开始前，水池注水30cm深，水温保持在（24±1）℃。圆柱形平台直径9cm，高28cm，置于任一象限中央，平面没于水面下1cm。摄像
头置于水池中央的上方约2m处，自动采集动物游泳轨迹图像，所收集信号直接输入计算机，由图像自动采集和分析系统（中国医学科学院药物研究所提供）自动分析和处理。1.3穴位选择及针刺方法针刺采用“益气调血，扶
本培元”针法，取穴为膻中、中脘、气海、血海（双）和足三里（双），穴位定位根据中国针灸学会实验针灸研究所制定的《动物针灸穴位图谱》。针刺方法：膻中、中脘、气海和足三里分别施捻转补法30s，血海施捻转泻法30s。非穴组取双胁下两个固定非穴位点，行平补平泻手法105s。均每日针刺1次，持续15d，第7天休息一次。SAMＲ1和SAMP8对照组进行相同时间和程度的捉抓刺激。1.4数据统计所有计量数据用均数±标准差（珋x±s）表示，用SPSS17.0统计软件进行统计处理。隐蔽
平台实验、反向实验、探索实验的数据用单个重复测量因素的方差分析；组间同一天数据比较用单因素方差分析；可见平台实验数据用方差分析；搜索策略用秩和检验。
·6521·辽宁中医杂志2013年第40卷第6期2行为学检测2.1隐蔽平台实验将平台至于第三象限中央，平台中点距池壁22.5cm，且位置不变。训练时将动物面朝池壁轻轻放入水中，记录小鼠从入水至找到平台的游泳路线的长度，形态及找到平台的时间（逃避潜伏期）等。试验前1d，让动物试游，每次时间为60s，如果时限内找不到平台，由实验者将小鼠放到平台上10s以熟悉环境，上下午各一次。实验时，小鼠在限定时间内找不到平台也将其放在平台上10s，并将潜伏期记为60s。每次训练后用干毛巾将小鼠擦干，以防止低体温造成的应激。此部分实验于实验的第1～5天进行，上下午各两次，且入水点随机改变，但同一天内上下午入水点的次序相同。2.2反向实验将平台至于第一象限中央，平台中点距池壁22.5cm，其他条件及方法同隐蔽平台实验。此部分实验于实验的第6～8天进行。2.3空间探索实验此实验穿插于隐蔽平台实验和反向实验中，隐蔽和反向实验结束后即撤离平台，入水点选取第二象限，游泳时间为60s，记录小鼠在原平台处停留时间以及穿越次数等，隐蔽和反向实验的第一天不进行此实验。2.4可视平台实验为排除感觉、视觉或运动功能障碍对空间学习记忆的影响，实验的第9天进行可视平台试验。让平台位置露出水面2cm，并将平台包成绿色，其余操作同隐蔽平台试验，上下午各一次。3结果
在隐蔽平台实验中，表1示，SAMＲ1的逃避潜伏期明显低于SAMP8对照组（P＜0.01）；针刺组的逃避潜伏期从第3天起低于SAMP8对照组和非穴组（P＜0.05）；SAMP8对照组和非穴组比较无统计学意义
（P＞0.05）。从搜索策略看，各组之间有差异（P＜0.05），第1天各组主要表现为边缘式；第3天各组搜
索策略多表现为以趋向式为主，SAMＲ1组和针刺组多能以趋向式顺利找到平台，而SAMP8对照组和非穴组仅有部分能以趋向式顺利找到平台，其余小鼠表现为随机式；第5天，SAMＲ1组和针刺组小鼠多能在相对较短时间内以趋向式找到平台，部分表现为直线式，而SAMP8对照组仍以随机式和趋向式并见，部分能找到
平台，非穴组以趋向式为主，部分小鼠能找到平台。在反向平台试验中，表2示，SAMＲ1组小鼠的逃避潜伏期第7、8天明显低于SAMP8对照组（P＜0.05），并随时间有缓慢下降的趋势；SAMP8对照和非
穴组潜伏期时间在7、8天明显延长（P＜0.05），一直处于较高时间线，提示这两组存在明显再学习记忆的损伤，针刺组逃避潜伏期明显短于SAMP8对照组及非穴组（P＜0.05），而与SAMＲ1组比较无显著性差异（P＞0.05），提示“益气养血，扶本培元”针法明显提高
了SAMP8小鼠的再学习能力，且具有腧穴相关的特异性；SAMP8对照组和非穴组比较无统计学意义（P＞0.05）。从搜索策略看，各组之间有差异（P＜0.05）。表1各组小鼠在隐蔽平台实验中逃避潜伏期结果比较（珋x±s）
组别第1天第2天第3天第4天第5天SAMＲ1（n=8）13.39±3.4916.00±5.8613.07±4.0820.61±5.9419.48±11.05对照（n=8）42.27±11.39
＊＊36.70±14.57＊＊37.66±14.39＊＊33.60±6.90＊＊52.49±6.66＊＊
针刺（n=8）36.10±9.2430.14±11.9921.17±13.1535.39±12.0432.55±18.90非穴（n=8）44.78±14.9048.28±13.9043.65±13.1151.57±9.1153.80±8.90注：与SAMＲ1组比较，*P＜0.05，＊＊P＜0.01；与针刺组比较，P＜0.05，P＜0.01。表2各组小鼠在反向平台实验中逃避潜伏期结果比较（珋x±s）
组别第6天第7天第8天SAMＲ1（n=8）43.80±9.3528.23±9.6228.89±13.37对照（n=8）44.93±14.2449.79±10.90＊＊33.39±10.66
*
针刺（n=8）40.63±12.9433.89±10.0229.13±9.65非穴（n=8）44.75±12.0850.05±6.5748.73±10.92注：与SAMＲ1组比较，*P＜0.05，＊＊P＜0.01；与针刺组比较，P＜0.05，P＜0.01。在探索实验中，表3～5示，与SAMＲ1组小鼠比较，SAMP8对照组小鼠的第一次穿越时间明显延长，穿越次数较少，在原平台象限和中环区域的游泳距离