胎儿染色体非整倍体(T21、T18、T13)检测试剂盒(高通量测序法)注册技术审查指导原则(2017年第52号)
可编辑范本 附件 胎儿染色体非整倍体（T21、T18、T13） 检测试剂盒（高通量测序法）注册技术 审查指导原则
本指导原则旨在指导注册申请人对胎儿染色体非整倍体（T21、T18、T13）检测试剂盒（高通量测序法）注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门对注册申报资料的技术审评提供参考。 本指导原则是针对该类试剂的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。 本指导原则是对申请人和审查人员的指导性文件，但不包括注册审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行，如果有能够满足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但需要详细阐明理由，并对其科学合理性进行验证，提供详细的研究资料和验证资料，相关人员应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。 本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制定的，随着法规和标准的不断完善，以及科学技术的不断发展，可编辑范本
本指导原则相关内容也将适时进行调整。 一、范围 胎儿染色体非整倍体（Fetal Chromosome Aneuploidies）中的21三体、18三体、13三体（Trisomies 21、Trisomies 18、Trisomies13，即T21、T18、T13）是临床上最常见的染色体非整倍体疾病。其对应的分别为21-三体综合征（又称唐氏综合征，先天愚型或Down综合征）、18-三体综合征（又称Edwards综合征）和13-三体综合征（又称Patau综合征），发病率分别约为1/700、1/6000、1/10000，患儿绝大多数存在严重智力障碍及器官畸形。 产前筛查和产前诊断是为避免产生遗传缺陷患儿提供的手段。常规的产前筛查方法包括：早孕期的超声与血清学联合筛查和中孕期母体血清学筛查。筛查结果为高风险的孕妇经建议经产前诊断进行最终确认，由孕妇知情选择。胎儿染色体异常的产前诊断金标准为介入前产前诊断手术,是指通过绒毛取材术/羊膜腔穿刺术/经皮脐血管穿刺术，取相应细胞采用细胞生物学方法对胎儿染色体进行核型分析。 高通量测序方法检测胎儿染色体非整倍体的原理是：孕妇母体血浆中存在胎儿游离DNA（cell-free DNA，cfDNA），长度约为75bp—250bp，几乎全部来源于胎盘的滋养层细胞，其浓度和孕周密切相关并以一定比例（5%—30%）稳定存在于母体外周血浆中。高通量测序方法通过取母体血浆提取包含正常母体和胎儿可编辑范本
的血浆游离DNA，经文库构建，片段扩增等，最后进行上机测序，通过软件分析数据获得染色体数目评价结果。以检测21三体综合征为例，当对怀有T21胎儿的母体血浆游离DNA数据进行分析时，其21号染色体游离DNA总数会有小比例的升高，通过统计学算法区分这一微小差异来实现利用cfDNA进行胎儿染色体非整倍体的产前筛查。但高通量测序法不能对染色体结构异常进行检测，不能代替传统筛查中的开放式神经管缺陷筛查等。 本指导原则所述的胎儿染色体非整倍体（T21、T18、T13）检测试剂盒（高通量测序法）是指通过高通量测序法检测孕妇外周血血浆中胎儿游离脱氧核糖核酸（DNA），通过分析样本中的胎儿游离DNA的21号、18号及13号染色体数量的差异，预期用于对胎儿染色体非整倍体疾病21-三体综合征、18-三体综合征和13-三体综合征进行产前筛查的检测试剂盒。 本指导原则所述的高通量测序法，是指通过文库构建、片段扩增进而进行上机测序的第二代测序方法，不需要进行片段扩增的第三代、第四代单分子测序方法在文中并未涉及。但高通量测序技术发展迅速，第三代、第四代单分子测序方法在企业内部参考品设置、性能评估或临床评价等处如有适用的方面，可以参照执行。 本指导原则所述检测试剂盒的适用人群为：对孕周为12+0可编辑范本
周及以上的孕妇进行产前筛查，其结果不能代表对孕妇怀有三体胎儿的确认，产前筛查的结果必须要经过产前诊断进行确认。 伦理学原则应遵守国家相关法律法规及行业规定。 二、注册申报资料要求 （一）综述资料 综述资料主要包括产品预期用途、产品描述、有关生物安全性的说明、有关产品主要研究结果的总结和评价以及其他内容。其中，其他内容包括同类产品在国内外批准上市的情况，应着重从方法学及检出限等方面写明拟申报产品与目前市场上已获批准的同类产品之间的主要区别。综述资料应符合《体外诊断试剂注册管理办法》（国家食品药品监督管理总局令第5号，以下简称《办法》）和《关于公布体外诊断试剂注册申报资料要求和批准证明文件格式的公告》（国家食品药品监督管理总局公告2014年第44号，以下简称“公告”）的相关要求。 综述资料应详细阐明检测原理，可配合图示并写明一个完整检测配合使用的全部试剂及耗材名称、生产厂家、货号或注册证书号以及详细的组成成分。 （二）主要原材料的研究资料 主要原材料的研究资料包括企业内部参考品和完成检测所需试剂组成两部分。 1.企业内部参考品应至少包括：阳性参考品、阴性参考品、可编辑范本
检测限参考品、嵌合体参考品，具体要求如下： 1.1阳性参考品：应采用T21、T18、T13胎儿DNA片段按一定比例与正常女性血浆混合的模拟样本。 1.2阴性参考品：应包括采用染色体数目正常胎儿DNA片段按一定比例与正常女性血浆混合的模拟样本，以及采用其他染色体异常胎儿DNA片段按一定比例与正常女性血浆混合的模拟样本。其他染色体异常的阴性参考品由申请人依据常见染色体异常项目并根据对产品的质控要求自行选择。 1.3检测限参考品：应采用T21、T18、T13胎儿DNA片段按不同比例梯度与正常女性血浆混合的模拟样本，如5%、3.5%、2.5%等，建议采用95%（n≥20）的阳性检出率作为最低检测限确定的标准。 1.4嵌合体参考品：由申请人按照对产品的质控要求自行设定模拟T21、T18和T13嵌合体的组成比例，如70%异常，30%正常；30%异常，70%正常等。 T21、T18、T13及其他染色体异常胎儿DNA片段可由流产组织或羊水细胞、细胞系等来源制备。 申请人应详细说明企业内部参考品的组成、详细说明制备及检定方法、胎儿DNA片段浓度确认方式和所占比例的选择依据。组成各项企业内部参考品的样本应为不同来源。 2.完成全部检测流程所需试剂一般应至少包括：血浆游离可编辑范本
DNA提取纯化试剂、文库构建试剂、文库定量试剂、测序试剂、阴性质控品、阳性质控品以及与之配合使用的测序芯片和数据分析软件。具体要求如下： 2.1血浆游离DNA提取纯化试剂：无论申报产品中是否包含，申请人均应提交配合使用的提取纯化试剂的原理、详细组成成分、生产厂家、货号及第一类医疗器械备案凭证编号的相关资料。性能方面需对该试剂提取的DNA片段长度范围准确性及纯度要求，提取效率、重复性及抗干扰能力进行评估。 2.2文库构建试剂、文库定量试剂、测序试剂：文库构建试剂对片段化的DNA进行缺口补平及相应部分5’端磷酸化（如需）和3’端去磷酸化（如需），之后使用连接酶加上用于测序和分析的标签和接头，构建成可以用来测序上机的标准文库；文库定量试剂通过PCR扩增及与标准品曲线的比对，用于定量测定文库浓度，为后续均一化文库进行上机测序做准备，同时能够评估文库构建的质量。文库定量时应明确对文库质量、片段大小及浓度要求，应提供分析图谱，对其中参数进行解释说明（如是否有杂峰，产生的原因，是否对最终结果产生影响等）。文库定量不限于上述方法，也可采用其他方法进行，如荧光染料法、Qubit定量等；测序试剂用于对均一化的文库进行片段扩增，通过基因测序仪捕捉扩增过程中碱基的变化引起的信号变化来达到读取序列的目的。 可编辑范本
以上三种试剂一般由：相应功能的酶（末端修复酶、DNA连接酶、缺口修复酶DNA聚合酶等）、核苷酸序列（引物、接头序列、标签序列、文库定量标准品）、缓冲液及dNTP组成。具体要求如下： 2.2.1酶：应提交纯度、活性及功能性试验资料。例如：文库构建过程包括但不限于末端修复酶、DNA连接酶、缺口修复聚合酶等，所选择的酶应当具有末端突出削平、缺口补平、标签或接头连接、DNA聚合酶活性。 2.2.2核苷酸序列：应提交相应的序列组成和纯度信息，序列准确度；引物设计应提交引物设计原则及选择对比依据。 2.2.3缓冲液：应明确详细的组成及各盐浓度选择对比的依据。 2.2.4 dNTP：包括dATP、dGTP、dCTP、dTTP，应提交对纯度、浓度等的详细验证资料。 2.3阴、阳性质控品：须能够监控DNA片段提取到最终测序结果全过程，因此应当由阴、阳性（T21、T18和T13）胎儿DNA片段按已知比例与正常女性血浆基质混合组成。 2.4测序芯片：应详细阐明芯片进行片段扩增的原理及结构，明确使用芯片型号，并对同一次测序芯片上样的样本间精密度进行评价。 2.5数据分析软件：举例介绍原始数据质量评估、数据处理可编辑范本
和筛选的方法，明确数据筛选依据以及使用的算法。 2.6提交不同原材料对于最终测序数据质量影响的评估材料。由于各测序平台的技术侧重点不同，数据质量评估的项目可能存在差异，需考虑包括但不限于以下方面：文库浓度、文库片段大小、单样本总序列数（数据量）、唯一比对率、单次检测的GC gap（最高GC值与最低GC值的差值）等。 2.7除上述资料，申请人还应提交主要原材料的筛选依据及试验资料。如为自制，则应提交：制备方法、质量要求、质量检测方法、对比筛选的试验资料等；如为外购，则应提交：外购证书、质量要求、质量检测方法、对比筛选的试验资料等。其中，对比筛选的试验资料应包括筛选过程中的数据、图谱、对比图表等信息。 （三）主要生产工艺及反应体系的研究资料 1.主要生产工艺包括配制工作液、半成品检定、分装和包装。配制工作液的各种原材料及其配比应符合要求，原材料应混合均匀，配制过程应对关键参数进行有效控制。所提交申报资料中应包括主要生产工艺介绍和生产工艺流程图，后者需标明关键工艺质控步骤，并详细说明该步骤的质控方法及质控标准。 2.反应体系研究指完成检测所涉及到的最佳反应条件的选择确定过程，包括对提取纯化步骤、游离DNA片段的末端修复、接头及标签连接、文库定量、片段扩增、测序反应的反应条件及
无创DNA疾病演示课件
人类起源与迁徙研究
1 2
人类起源研究
通过分析古代人类遗骸中的无创DNA，可以追溯 人类的起源和早期迁徙路线，揭示人类演化的历 史。
人类迁徙研究
无创DNA技术可用于研究人类在不同地理区域的 迁徙和扩散过程，揭示人类文明的传播和交流。
3
人类遗传多样性研究
通过分析不同地区和族群的无创DNA数据，可以 研究人类遗传多样性的分布和演变，为人类学和 社会学研究提供重要依据。
04
无创DNA在医学领域应用
遗传性疾病筛查与诊断
染色体异常筛查
遗传性疾病风险评估
通过检测孕妇外周血中胎儿游离DNA ，评估胎儿染色体异常风险，如唐氏 综合征等。
结合家族史和基因变异信息，评估个 体患某种遗传性疾病的风险。
单基因遗传病诊断
针对特定基因变异导致的遗传性疾病 ，如苯丙酮尿症、地中海贫血等，进 行无创DNA检测以实现早期诊断。
原理
孕妇外周血中存在一定量的胎儿游离DNA，这些DNA片段主要来自胎盘滋养层 细胞。通过高通量测序技术对这些DNA片段进行测序和分析，可以间接获取胎儿 的遗传信息，从而判断胎儿是否存在染色体异常或遗传性疾病。
02
无创DNA技术发展历程
早期研究阶段
1997年，Lo等首次报道在孕妇外周血 中存在胎儿游离DNA。
相较于传统的产前诊断方法，如羊水穿刺 、脐血取样等，无创DNA检测具有无创 、安全、准确率高等优势。
在试管婴儿等辅助生殖技术中，无创 DNA检测可用于胚胎植入前的遗传学筛 查，提高成功率。
无创DNA定义及原理
定义
无创DNA检测，又称无创产前基因检测，是一种利用孕妇外周血中的胎儿游离 DNA（cell-free DNA, cfDNA）进行遗传学分析的方法。
SWOT分析报告(1)
分析报告一：市场分析报告基因检测是通过血液、其他体液或细胞对DNA进行检测的技术，是取被检测者脱落的口腔黏膜细胞或其他组织细胞，扩增其基因信息后，通过特定设备对被检测者细胞中的DNA分子信息作检测，分析它所含有的各种基因情况，从而使人们能了解自己的基因信息，预知身体患疾病的风险，从而通过改善自己的生活环境和生活习惯，避免或延缓疾病的发生。
中国基因检测行业发展现状分析与发展趋势预测报告（2016-2020年）可以为药物治疗提供指导。
截至**应用最广泛的基因检测是新生儿遗传性疾病的检测、遗传疾病的诊断和某些常见病的辅助诊断。
截至**有1000多种遗传性疾病可以通过基因检测技术做出诊断。
据中国调研报告网发布的中国基因检测行业发展现状分析与发展趋势预测报告（2016-2020年）显示，基因检测行业在我国起步比较早，近年来发展迅猛，未来发展前景不可估量。
中国大约有1/5人口需要疾病易感基因检测，有3亿人口。
市场销售额估计有几千亿元人民币，这一产业足以成就5-10个超10亿元的大型基因检测企业，千万元以上的相关企业将多达50个。
而**年以来，我国关于基因检测行业的监管政策频出，行业将走向规范化运行。
中国基因检测行业发展现状分析与发展趋势预测报告（2016-2020年）是对基因检测行业进行全面的阐述和论证，对研究过程中所获取的资料进行全面系统的整理和分析，通过图表、统计结果及文献资料，或以纵向的发展过程，或横向类别分析提出论点、分析论据，进行论证。
中国基因检测行业发展现状分析与发展趋势预测报告（2016-2020年）如实地反映了基因检测行业客观情况，一切叙述、说明、推断、引用恰如其分，文字、用词表达准确，概念表述科学化。
中国基因检测行业发展现状分析与发展趋势预测报告（2016-2020年）揭示了基因检测市场潜在需求与机会，为战略投资者选择恰当的投资时机和公司领导层做战略规划提供准确的市场情报信及科学的决策依据，同时对银行信贷部门也具有极大的参考价值二：本公司简介1.乐土精准医疗是由乐土投资集团投资，顶尖海归和本土人才创办的、旨在为中国广大健康人群及肿瘤、心血管疾病、慢性病（如糖尿病、高血等）、自身免疫病等人群提供最优质的分子诊断分析，以及世界领先的精准个体化治疗方案和健康管理的高端服务型技术企业。
已公开医疗器械技术审评报告(截止2022年11月3日)
序号报告名称1肺结核X射线图像辅助评估软件（CQZ2100859） (2022-10-18) 2血流导向密网支架（CQZ2200163） (2022-10-17)3抗栓塞脑保护装置（JQZ2100198） (2022-10-17)4动脉导管未闭封堵器（JQZ2100128） (2022-10-14)5颅内动脉瘤手术计划软件（CQZ2200052） (2022-10-09)6可吸收丝素修复膜（CQZ1900597） (2022-10-09)7活性生物骨（CQZ1800521） (2022-10-08)8Septin9/SDC2/BCAT1基因甲基化检测试剂盒（PCR-荧光探针法）（CSZ2000117） (2022-09-28)9集成膜式氧合器（CQZ2200020） (2022-09-22)10质子治疗系统（CQZ2201112） (2022-09-22)11优美莫司涂层冠状动脉球囊扩张导管（CQZ2101008） (2022-09-15)12慢性青光眼样视神经病变眼底图像辅助诊断软件（CQZ2100700） (2022-08-29) 13磁共振成像系统（CQZ2200057） (2022-08-26)14磁共振引导放射治疗系统（JQZ2100193） (2022-08-24)15医用粘合剂（CQZ2000627） (2022-08-22)16脑炎/脑膜炎多重病原体核酸联合检测试剂盒（封闭巢式多重PCR熔解曲线法）（JSZ2000041） (2022-08-04)17人ASTN1、DLX1、ITGA4、RXFP3、SOX17、ZNF671基因甲基化检测试剂盒（荧光PCR法）（CSZ1900359） (2022-08-03)18吻合口加固修补片（CQZ2101436） (2022-07-27)19可吸收再生氧化纤维素止血颗粒（JQZ1900407） (2022-07-26)20肠息肉电子结肠内窥镜图像辅助检测软件（CQZ2100679） (2022-07-21)21血管内超声诊断仪（CQZ2101190） (2022-07-21)22一次性使用血管内超声诊断导管（CQZ2101183） (2022-07-21)23耳鼻喉双源锥形束计算机体层摄影设备（CQZ2101063） (2022-07-18)24肿瘤组织起源基因分析软件（CQZ2100831） (2022-07-12)25植入式左心室辅助系统（CQZ2101495） (2022-07-12)26伽玛射束立体定向放射治疗系统（CQZ2101158） (2022-07-11)27肿瘤组织起源基因检测试剂盒（PCR荧光探针法）（CSZ2100184） (2022-07-10) 28基因测序仪（CQZ2000825） (2022-07-10)29经导管人工肺动脉瓣膜系统（CQZ2101043） (2022-07-04)30冷冻消融设备（CQZ2100618） (2022-06-22)31一次性使用冷冻消融球囊导管(CQZ2100525) (2022-06-21)32腹腔内窥镜手术系统（CQZ2100982） (2022-06-16)33消化道内窥镜用超声诊断设备（CQZ2100792） (2022-05-31)34牙体牙髓手术导航系统（CQZ2000544） (2022-05-20)35磁共振成像系统（JQZ2100674） (2022-05-19)36正电子发射X射线计算机断层成像系统（CQZ2101122） (2022-05-18) 37胸主动脉支架系统（CQZ2100441） (2022-05-17)38一次性使用血管内成像导管（CQZ2100508） (2022-05-16)39血管内成像设备（CQZ2100509） (2022-05-16)40患者程控充电器（CQZ2100435） (2022-05-16)41胚胎植入前染色体非整倍体检测试剂盒（半导体测序法）（CSZ2100118） (2022-05-11)42经导管植入式无导线起搏系统（JQZ2100419） (2022-05-10)43人类SFRP2和SDC2基因甲基化联合检测试剂盒(荧光PCR法)（CSZ2100018） (2022-05-10)44一次性使用外周血管内冲击波导管（JQZ2100248） (2022-05-06)45血管内冲击波治疗设备（JQZ2100255） (2022-05-06)46一次性使用冠脉血管内冲击波导管（JQZ2100332） (2022-04-29)47六项呼吸道病原菌核酸检测试剂盒（多重荧光PCR法）（CSZ2000253） (2022-04-28) 48一氧化氮治疗仪（CQZ2100409） (2022-04-22)49脊髓神经刺激测试电极（CQZ2100918） (2022-04-18)50膝关节置换手术导航定位系统（CQZ2100988） (2022-04-18)51膝关节置换手术导航定位系统（CQZ2100812） (2022-04-18)52髂静脉支架系统（CQZ2100691） (2022-04-18)53髋关节置换手术导航定位系统（CQZ2100751） (2022-04-02)54磁共振成像系统（CQZ2100331） (2022-04-01)55α 和 β地中海贫血基因检测试剂盒（联合探针锚定聚合测序法）（CSZ2200011）(2022-03-31)56非衍生化氨基酸、肉碱、腺苷、溶血卵磷脂和琥珀酰丙酮测定试剂盒（串联质谱法）（CSZ1900199） (2022-03-23)57心外科生物补片（CQZ2000859） (2022-03-11)58SDC2和TFPI2基因甲基化联合检测试剂盒（荧光PCR法）（CSZ2100044） (2022-03-11)59一次性使用经支气管内窥镜热蒸汽治疗导管（JQZ1900456） (2022-03-10) 60热蒸汽治疗设备（JQZ2000082） (2022-03-10)61颅内出血CT影像辅助分诊软件（CQZ2100676） (2022-03-04)62头孢他啶/阿维巴坦浓度梯度琼脂扩散药敏条（浓度梯度琼脂扩散法）（JSZ2000066）(2022-03-02)63一次性使用前列腺热蒸汽治疗器械（JQZ2100549） (2022-02-28) 64热蒸汽治疗设备（JQZ2100548） (2022-02-28)65移动式头颈磁共振成像系统（CQZ2100663） (2022-02-24)66白血病相关15种融合基因检测试剂盒（荧光RT-PCR法）（CSZ1900374） (2022-02-24)67消化道振动胶囊系统（CQZ2000892） (2022-02-22) 68支架定位系统（CQZ2100582） (2022-02-08)69SHOX2/RASSF1A/PTGER4基因甲基化检测试剂盒（PCR-荧光探针法）（CSZ1900370） (2022-01-29)70病人监护仪（JQZ2000545） (2022-01-28)71醛酮还原酶1B10测定试剂盒（时间分辨荧光免疫分析法）（CSZ1900208） (2022-01-24)72幽门螺杆菌23S rRNA基因与gyrA基因突变检测试剂盒（荧光PCR法）（CSZ1900183） (2022-01-24)73放射性粒籽植入专用穿刺针（CQZ2100235） (2022-01-20)74腹腔内窥镜手术系统（CQZ2100611） (2022-01-19)75双通道植入式脑深部电刺激脉冲发生器套件（CQZ2000668） (2022-01-14)76植入式脑深部电刺激延伸导线套件（CQZ2000664） (2022-01-14)77双通道可充电植入式脑深部电刺激脉冲发生器套件（CQZ2000666） (2022-01-14) 78植入式脑深部电刺激电极导线套件（CQZ2000667） (2022-01-14)79植入式脊髓神经刺激延伸导线（CQZ2100259） (2022-01-04)80神经外科手术导航定位系统（CQZ2100686） (2022-01-04)81植入式脊髓神经刺激电极（CQZ2100434） (2022-01-04)82植入式脊髓神经刺激电极（CQZ2100257） (2022-01-04)83植入式脊髓神经刺激器（CQZ2100255） (2021-12-31)84植入式可充电脊髓神经刺激器（CQZ2100250） (2021-12-31)85弓形虫IgG抗体检测试剂盒（微柱凝胶法）（CSZ1900130） (2021-12-29)86外视镜（JQZ2000399） (2021-12-28)87直管型胸主动脉覆膜支架系统（CQZ2100077） (2021-12-24)88幽门螺杆菌抗原检测试剂（乳胶法）（CSZ2000282） (2021-12-24)89经导管主动脉瓣膜系统（JQZ2000564） (2021-12-20)90分支型术中支架系统（CQZ2100306） (2021-12-13)91四肢关节磁共振成像系统（CQZ2100038） (2021-12-03)92结核分枝杆菌复合群核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）（CSZ2000178） (2021-11-29)93人工角膜（CQZ2000878） (2021-11-29)94X射线计算机体层摄影设备（CQZ2100312） (2021-11-24)95磁共振成像系统（CQZ2000957） (2021-11-22)96植入式左心室辅助系统（CQZ2000745） (2021-11-19)97电子腹腔内窥镜（CQZ2000720） (2021-11-17)98种植体配套用基台及螺钉（JQZ2000287） (2021-11-09)99血液透析滤过器及配套管路（JQZ1800468） (2021-11-05)100冠状动脉OCT定量血流分数计算软件（CQZ2000940） (2021-11-04)101半导体激光治疗仪（CQZ2000875） (2021-11-04)102生物疝修补补片（CQZ2100193） (2021-11-02)103持续葡萄糖监测系统（CQZ2100164） (2021-10-29)104持续葡萄糖监测系统（CQZ2100236） (2021-10-29)105乙型肝炎病毒(HBV)核酸测定试剂盒(PCR-荧光探针法)（CSZ2000265） (2021-10-28)106胚胎植入前染色体非整倍体检测试剂盒(可逆末端终止测序法)（CSZ2000181） (2021-10-22)107腹腔内窥镜手术设备（CQZ2000895） (2021-10-18)108球囊扩张血管内覆膜支架系统（JQZ1900385） (2021-10-15)109医用电子直线加速器（CQZ2100678） (2021-09-29)110水动力治疗设备（CQZ2000503） (2021-09-19)111一次性使用清创水动力刀头（CQZ2000502） (2021-09-19)112领扣型人工角膜（CQZ2100080） (2021-09-13)113口腔种植手术导航定位设备（CQZ2100174） (2021-09-09)114经导管主动脉瓣膜及可回收输送系统（CQZ2000829） (2021-08-26)115机械解脱弹簧圈（CQZ2100023） (2021-08-10)116内窥镜用超声诊断设备（CQZ2100037） (2021-08-09)117软性亲水接触镜（JQZ2000345） (2021-08-03)118单髁膝关节假体（CQZ2000741） (2021-08-03)119腔静脉滤器（CQZ2000534） (2021-08-02)120颅内药物洗脱支架系统（CQZ2000931） (2021-07-26)121冠状动脉CT血流储备分数计算软件（CQZ2000746） (2021-07-23)122陡脉冲治疗仪（CQZ2000840） (2021-06-29)123呼吸道病原菌核酸检测试剂盒（恒温扩增芯片法）（CSZ1900198） (2021-06-25) 124自膨式动脉瘤瘤内栓塞系统（JQZ2000307） (2021-06-25)125抗PD-L1 (SP142)兔单克隆抗体试剂（免疫组织化学法）（JSZ1800102） (2021-06-17)126经导管主动脉瓣系统（CQZ2100025） (2021-06-17)127三维电子腹腔内窥镜（CQZ2000577） (2021-05-28)128全自动医用PCR分析系统（CQZ2000607） (2021-05-27)129紫杉醇洗脱PTCA球囊扩张导管（CQZ2000445） (2021-04-26) 130周围神经套接管（CQZ1900677） (2021-04-26)131临时起搏器（CQZ2000553） (2021-04-20)132经导管主动脉瓣系统（CQZ2000676） (2021-04-15)133冠状动脉CT血流储备分数计算软件（CQZ2000604） (2021-04-12)134幽门螺杆菌23S rRNA基因突变检测试剂盒（PCR-荧光探针法）（CSZ1900343）(2021-03-25)135儿童手部X射线影像骨龄辅助评估软件（CQZ2000273） (2021-03-15)136乙型肝炎病毒核酸测定试剂盒（RNA捕获探针法）（CSZ1900102） (2021-03-10) 137一次性使用血管内成像导管（CQZ2000090） (2021-03-05)138一次性使用电子输尿管肾盂内窥镜导管（CQZ2000218） (2021-02-25)139骨科手术导航定位系统（CQZ2000065） (2021-01-21)140髂动脉分叉支架系统（CQZ1900697） (2020-12-29)141锚定球囊扩张导管（CQZ1900274） (2020-12-22)142药物洗脱外周球囊扩张导管（CQZ1900540） (2020-12-15)143椎动脉雷帕霉素靶向洗脱支架系统（CQZ1800661） (2020-12-15)144X射线计算机体层摄影设备（CQZ2000449） (2020-11-23)145肺结节CT影像辅助检测软件（CQZ2000139） (2020-11-23)146注射用重组人凝血因子VIII剂量计算软件（JQZ1900118） (2020-11-12)147周围神经修复移植物（CQZ1800612） (2020-11-09)148KRAS基因突变及BMP3/NDRG4基因甲基化和便隐血联合检测试剂盒（PCR荧光探针法-胶体金法）（CSZ2000050） (2020-11-02)149冠脉CT造影图像血管狭窄辅助分诊软件（CQZ2000143） (2020-10-27) 150药物洗脱PTA球囊扩张导管（CQZ1900646） (2020-10-21)151记忆合金钉脚固定器（CQZ1900718） (2020-10-16)152压力微导管（CQZ1900721） (2020-09-22)153血流储备分数测量设备（CQZ1900723） (2020-09-22)154取栓支架（CQZ1900672） (2020-09-01)155磁共振引导放射治疗系统（JQZ1900468） (2020-08-19)156胎儿染色体非整倍体（T21、T18、T13）检测试剂盒（半导体测序法）（CSZ1900377） (2020-08-17)157髋关节镀膜球头（CQZ1800334） (2020-08-11)158糖尿病视网膜病变眼底图像辅助诊断软件（CQZ1900653） (2020-07-31)159糖尿病视网膜病变眼底图像辅助诊断软件（CQZ1900668） (2020-07-31) 160镍钛合金紫杉醇洗脱血管支架（JQZ1800416） (2020-07-14)161丝素蛋白膜状敷料（CQZ1800141） (2020-06-24)162经导管二尖瓣夹及可操控导引导管（JQZ1800437） (2020-06-09)163经导管主动脉瓣膜系统（JQZ1900166） (2020-06-04)164肿瘤电场治疗仪（JQZ1900408） (2020-04-30)165药物球囊扩张导管（CQZ1800451） (2020-04-26)166等离子手术设备（CQZ1900229） (2020-04-26)167RNF180/Septin9基因甲基化检测试剂盒（PCR荧光探针法）（CSZ1900136） (2020-04-24)168心血管光学相干断层成像设备及附件（CQZ1900458） (2020-04-23)169遗传性耳聋基因检测试剂盒（联合探针锚定聚合测序法）（CSZ1900042） (2020-04-16)170药物洗脱外周血管支架（JQZ1700456） (2020-04-07)171生物可吸收冠脉雷帕霉素洗脱支架系统（CQZ1800274） (2020-02-27) 172氢氧气雾化机（CQZ1900716） (2020-02-02)173人EGFR/KRAS/BRAF/HER2/ALK/ROS1基因突变检测试剂盒（半导体测序法）（CSZ1900047） (2020-01-13)174冠脉血流储备分数计算软件（CQZ1900346） (2020-01-06) 175穿刺手术导航设备（CQZ1800557） (2020-01-06)176结核分枝杆菌特异性细胞因子检测试剂盒 （酶联免疫法）（CSZ1700172） (2020-01-03)177肺动脉支架（CQZ1700575） (2019-12-27)178结核分枝杆菌复合群核酸检测试剂盒（恒温扩增-实时荧光法）（CSZ1900160）(2019-12-13)179核酸扩增检测分析仪（CQZ1900342） (2019-12-13)180正电子发射及X射线计算机断层成像扫描系统（CQZ1900568） (2019-12-13)181结核分枝杆菌特异性细胞免疫反应检测试剂盒（酶联免疫法）（CSZ1900135） (2019-12-09)182胚胎植入前染色体非整倍体检测试剂盒（半导体测序法）（CSZ1900093） (2019-12-02)183一次性使用有创压力传感器（CQZ1900389） (2019-11-27)184冠状动脉造影血流储备分数测量系统（CQZ1900388） (2019-11-27) 185PD-L1检测试剂盒（免疫组织化学法）（JSZ1800126） (2019-11-18)186水通道蛋白抗体（AQP4 Ab）检测试剂盒（酶联免疫法）（JSZ1800016） (2019-09-24)187传送鞘管（JQZ1900154） (2019-09-17)188脱细胞角膜植片（CQZ1800314） (2019-09-02)189甲型/乙型流感及呼吸道合胞病毒核酸联合检测试剂盒（实时荧光PCR法）（JSZ1800082） (2019-08-25)190植入式左心室辅助系统（CQZ1900247） (2019-08-19)191无创血糖仪（CQZ1900180） (2019-08-19)192PD-L1检测试剂盒（免疫组织化学法）（JSZ1800077） (2019-08-14)193一次性使用血管内成像导管（CQZ1800509） (2019-08-06)194经导管主动脉瓣膜系统（CQZ1800004） (2019-06-28)195经导管植入式无导线起搏系统（JQZ1800372） (2019-05-30)196正电子发射及X射线计算机断层成像扫描系统（CQZ1800580） (2019-05-23) 197放射治疗轮廓勾画软件（CQZ1900002） (2019-05-21)198结核分枝杆菌复合群核酸检测试剂盒（恒温扩增荧光法）（CSZ1700171） (2019-05-13)199调强放射治疗计划系统软件（CQZ1800572） (2019-04-28)200左心耳封堵器系统（CQZ1800405） (2019-04-26)201数字乳腺X射线摄影系统（CQZ1800355） (2019-04-25)202左心耳闭合系统（CQZ1700152） (2019-04-23)203腹主动脉覆膜支架及输送系统（CQZ1800050） (2019-03-19)204病人监护仪（CQZ1800519） (2019-03-08)205生物可吸收冠状动脉雷帕霉素洗脱支架系统（CQZ1700369） (2019-02-20) 206胸主动脉覆膜支架系统（CQZ1700331） (2019-02-02)207多孔钽骨填充材料（CQZ1800099） (2018-12-29)208医用直线加速器系统（CQZ1800467） (2018-12-19)209神经外科手术导航定位系统（CQZ1800414） (2018-12-17)210瓣膜成形环（CQZ1700563） (2018-11-30)211医用电子直线加速器（CQZ1800167） (2018-11-21)212人类SDC2基因甲基化检测试剂盒（荧光PCR法）（CSZ1800035） (2018-11-13)213人类10基因突变联合检测试剂盒（可逆末端终止测序法）（CSZ1700127） (2018-11-12)214植入式骶神经刺激电极导线套件（CQZ1800077） (2018-09-26) 215植入式骶神经刺激器套件（CQZ1800078） (2018-09-26)216EGFR/ALK/ROS1/BRAF/KRAS/HER2基因突变检测试剂盒（可逆末端终止测序法）（CSZ1800026） (2018-09-26)217正电子发射断层扫描及磁共振成像系统（CQZ1800201） (2018-08-24) 218全自动化学发光免疫分析仪（CQZ1700087） (2018-08-15)219人EGFR、KRAS、BRAF、PIK3CA、ALK、ROS1基因突变检测试剂盒（半导体测序法）（CSZ1700089） (2018-08-03)220复合疝修补补片（CQZ1600412） (2018-08-02)221人EGFR/ALK/BRAF/KRAS基因突变联合检测试剂盒（可逆末端终止测序法）（CSZ1700157） (2018-07-13)222定量血流分数测量系统（CQZ1800065） (2018-07-07)223中空纤维膜血液透析滤过器（CQZ1700094） (2018-05-24)224脑血栓取出装置（CQZ1700110） (2018-05-04)225丙型肝炎病毒核酸测定试剂盒（PCR-荧光探针法）（CSZ1700055） (2018-04-16) 226miR-92a检测试剂盒（荧光RT-PCR法）（CSZ1600116） (2018-03-23)227血管重建装置（CQZ1600188） (2018-03-13)228风疹病毒IgG抗体检测试剂（荧光免疫层析法）（CSZ1700071） (2018-02-23) 229麻疹病毒IgG抗体检测试剂（荧光免疫层析法）（CSZ1700073） (2018-02-23) 230可吸收硬脑膜封合医用胶（CQZ1600326） (2018-01-19)231人类EGFR突变基因检测试剂盒(多重荧光PCR法)(CSZ1700057） (2018-01-15) 232基因测序仪（CQZ1700334） (2017-12-27)233药物洗脱球囊导管（CQZ1700047） (2017-12-04)234植入式心脏起博器（CQZ1700139） (2017-11-29)。
无创DNA产前检测技术
无创DNA产前检测技术胡博帆一、技术原理无创DNA产前检测，又称为无创产前DNA检测、无创胎儿染色体非整倍体检测等。
无创DNA产前检测技术仅需采取孕妇静脉血，利用新一代DNA测序技术对母体外周血浆中的游离DNA片段（包含胎儿游离DNA）进行测序，并将测序结果进行生物信息分析，可以从中得到胎儿的遗传信息，从而检测胎儿是否患三大染色体疾病。
香港中文大学教授卢煜明在1997年和1998年的工作中发现，母体血液中存在着胎儿的游离DNA。
胎儿染色体异常会带来母体中DNA含量微量变化，通过深度测序及生物信息可分析检测到该变化，为项目提供理论依据。
基于这些早期发现，卢煜明展开了一系列前沿工作来研究这些胎儿游离DNA的特性，证明了使用胎儿游离DNA来诊断遗传性疾病的可行性和实际性，最终开创了利用第二代基因测序来检测唐氏综合症的新途径，并在90多个国家得到了应用。
仅在中国，每年就有超过一百万孕妇接受这项测试。
这种革命性的方法为全球无数的孕妇提供了无创产前诊断。
二、技术应用到2012年以来，该方法能准确检测唐氏综合征（T21）、爱德华综合征（T18）、帕套综合征(T13)三大染色体疾病,且检出率均在90%以上。
无创DNA产前检测的无创伤性可以避免因为侵入性诊断带来流产、感染风险。
而DNA测序技术的成熟性能保证技术的准确率，孕妇在12周以上即可检测，12个工作日出检测结果。
2012年11月20日，美国妇产科学会（ACOG）与美国母胎医学会（SMFM）共同发表委员会指导意见：按照以下适应症，可推荐无创DNA产前检测作为非整倍体高危人群的初筛检测：（1）母亲年龄超过35岁；（2）超声结果显示非整倍体高危；（3）生育过三体患儿；（4）早孕期，中孕期或三联筛查、四联筛查呈现非整倍体阳性结果（5）父母为平衡罗伯逊易位，并且胎儿为13-三体或21-三体高危。
该声明说明在美国妇产科界已经形成行业共识，明确支持无创DNA产前检测可用于高龄、高危人群的初筛。
ｃｆｆＤＮＡ浓度低ＮＩＰＴ检测失败样本的相关因素和妊娠结局分析
《中国产前诊断杂志（电子版）》 ２０２３年第１５卷第３期·论著· ｃｆｆＤＮＡ浓度低ＮＩＰＴ检测失败样本的相关因素和妊娠结局分析杨洁霞 王东梅 侯亚萍 郭芳芳 彭海山 胡听听 吴菁 （广东省妇幼保健院医学遗传中心，广东广州，５１１４４２）【摘要】 目的 探讨分析胎儿游离ＤＮＡ（ｃｆｆＤＮＡ）浓度低无创产前基因检测（ＮＩＰＴ）检测失败样本的相关因素和妊娠结局。
方法 回顾性收集在２０１７年至２０２２年期间在广东省妇幼保健院接受ＮＩＰＴ检测，经两次采集外周血均因ｃｆｆＤＮＡ浓度低ＮＩＰＴ检测失败的样本信息，包括孕妇的临床资料、产前诊断结果、超声结果以及妊娠结局。
评估导致ｃｆｆＤＮＡ浓度低相关因素以及后续残余风险。
结果 两次采血因ｃｆｆＤＮＡ浓度低ＮＩＰＴ检测失败标本３９例，其中双胎１０例（２５．６４％），双胎之一停育／减胎７例（１７．９５％）。
接受介入性产前诊断１３例（３３．３３％），均未检出胎儿染色体异常。
孕期超声发现胎儿发育异常９例（２３．０８％），胎儿宫内发育迟缓６例（１５．３８％）。
所有孕妇均追踪到妊娠结局，其中早产１０例（２５．６４％），自然流产２例（５．１３％）。
结论 对于ＮＩＰＴ检测失败的病例，应明确原因，孕期出现并发症和不良妊娠结局风险增加，应建议接受进一步的遗传咨询、产前诊断和定期超声监测胎儿生长发育。
【关键词】 无创产前检测（ＮＩＰＴ）；ｃｆｆＤＮＡ浓度；检测失败；妊娠结局【中图分类号】 Ｒ７１４．５５ 【文献标识码】 Ａ犇犗犐：１０．１３４７０／ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｊｐｄ．２０２３．０３．００６ 通信作者：吴菁，Ｅｍａｉｌ：ｓｉｎｇｈｗｕ＠１２６．ｃｏｍ犃狀犪犾狔狊犻狊狅犳犮狅狉狉犲犾犪狋犻狅狀犳犪犮狋狅狉狊犪狀犱狆狉犲犵狀犪狀犮狔狅狌狋犮狅犿犲狊犻狀犳犪犻犾犲犱犖犐犘犜狊犪犿狆犾犲狊狑犻狋犺犾狅狑犮犳犳犇犖犃犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀犢犪狀犵犑犻犲狓犻犪，犠犪狀犵犇狅狀犵犿犲犻，犎狅狌犢犪狆犻狀犵，犌狌狅犉犪狀犵犳犪狀犵，犘犲狀犵犎犪犻狊犺犪狀，犎狌犜犻狀犵狋犻狀犵，犠狌犑犻狀犵犌狌犪狀犵犱狅狀犵犠狅犿犲狀犪狀犱犆犺犻犾犱狉犲狀犎狅狊狆犻狋犪犾，犕犲犱犻犮犪犾犌犲狀犲狋犻犮狊犆犲狀狋犲狉，犌狌犪狀犵狕犺狅狌５１１４４２，犆犺犻狀犪【犃犫狊狋狉犪犮狋】 犗犫犼犲犮狋犻狏犲 ＴｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｒｅｌａｔｅｄｆａｃｔｏｒｓａｎｄｐｒｅｇｎａｎｃｙｏｕｔｃｏｍｅｓｔｈａｔｌｅａｄｔｏＮＩＰＴｄｅｔｅｃｔｉｏｎｆａｉｌｕｒｅｗｉｔｈｌｏｗｃｆｆＤＮＡｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ．犕犲狋犺狅犱狊 ＲｅｔｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙｃｏｌｌｅｃｔｔｈｅｓａｍｐｌｅｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆＮＩＰＴｔｅｓｔｓｒｅｃｅｉｖｅｄｉｎＧｕａｎｇｄｏｎｇＷｏｍｅｎａｎｄＣｈｉｌｄｒｅｎＨｏｓｐｉｔａｌｆｒｏｍ２０１７ｔｏ２０２２，ａｎｄｔｈｅｓａｍｐｌｅｓｃｏｌｌｅｃｔｅｄｔｗｉｃｅｆａｉｌｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔＮＩＰＴｄｕｅｔｏｌｏｗｃｆｆＤＮＡｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇｃｌｉｎｉｃａｌｄａｔａｏｆｐｒｅｇｎａｎｔｗｏｍｅｎ，Ｐｒｅｎａｔａｌｔｅｓｔｉｎｇｒｅｓｕｌｔｓ，ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄｒｅｓｕｌｔｓａｎｄｐｒｅｇｎａｎｃｙｏｕｔｃｏｍｅｓ．ＥｖａｌｕａｔｅｔｈｅｆａｃｔｏｒｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｌｏｗｃｆｆＤＮＡｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎａｎｄｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔｒｅｓｉｄｕａｌｒｉｓｋｓ．犚犲狊狌犾狋狊 ３９ｃａｓｅｓｗｅｒｅｄｅｔｅｔｉｏｎｆａｉｌｅｄｂｙＮＩＰＴ，ａｍｏｎｇｔｈｅｍｉｎｃｌｕｄ１０（２５．６４％）ｔｗｉｎｓａｎｄ７（１７．９５％）ｔｗｉｎｓｗｈｏｈａｄｏｎｅｏｆｔｈｅｔｗｉｎｓｖａｎｉｓｈｅｄ．１３（３３．３３％）ｃａｓｅｓｒｅｃｅｉｖｅｄｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎａｌＰｒｅｎａｔａｌｔｅｓｔｉｎｇ，ａｎｄｎｏｆｅｔａｌｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅａｂｎｏｒｍａｌｉｔｙｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄ．Ｄｕｒｉｎｇｐｒｅｇｎａｎｃｙ，ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄｒｅｖｅａｌｅｄ９ｃａｓｅｓ（２３．０８％）ｏｆａｂｎｏｒｍａｌｆｅｔａｌｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｄｅｌａｙｅｄｉｎｔｒａｕｔｅｒｉｎｅｇｒｏｗｔｈｗａｓ６ｃａｓｅｓ（１５．３８％）．Ａｌｌｐｒｅｇｎａｎｔｗｏｍｅｎｗｅｒｅｆｏｌｌｏｗｅｄｕｐｐｒｅｇｎａｎｃｙｏｕｔｃｏｍｅｓ，ｗｈｉｃｈｉｎｃｌｕｄ１０ｃａｓｅｓｏｆｐｒｅｍａｔｕｒｅｂｉｒｔｈ（２５．６４％）ａｎｄ２ｃａｓｅｓｏｆｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓａｂｏｒｔｉｏｎ（５．１３％）．犆狅狀犮犾狌狊犻狅狀狊 ＦｏｒｔｈｅｃａｓｅｓｗｉｔｈｆａｉｌｅｄＮＩＰＴｄｅｔｅｃｔｉｏｎ，ｆｉｒｓｔｌｙ，ｉｔｉｓｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄｔｏｃｌａｒｉｆｙｔｈｅｒｅａｓｏｎｓｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｆａｉｌｕｒｅ．Ｔｈｅｎ，ｄｕｅｔｏｔｈｅｉｎｃｒｅａｓｅｄｒｉｓｋｏｆｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓａｎｄａｄｖｅｒｓｅｐｒｅｇｎａｎｃｙｏｕｔｃｏｍｅｓｄｕｒｉｎｇｐｒｅｇｎａｎｃｙ，ｆｕｒｔｈｅｒＧｅｎｅｔｉｃｃｏｕｎｓｅｌｉｎｇ，ｐｒｅｎａｔａｌｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎａｎｄｒｅｇｕｌａｒｕｌｔｒａｓｏｕｎｄｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇｏｆｆｅｔａｌｇｒｏｗｔｈａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓｈｏｕｌｄｂｅｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄｆｏｒａｌｌｃａｓｅｓ．【犓犲狔狑狅狉犱狊】 Ｎｏｎ ｉｎｖａｓｉｖｅｐｒｅｎａｔａｌｔｅｓｔｉｎｇ（ＮＩＰＴ）；ＣｆｆＤＮＡｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ；Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｆａｉｌｅｄ；ｐｒｅｇｎａｎｃｙｏｕｔｃｏｍｅｓ１３·论著·《中国产前诊断杂志（电子版）》 ２０２３年第１５卷第３期 自从１９９７年Ｌｏ提出发现胎儿游离ＤＮＡ（ｃｅｌｌｆｒｅｅｆｅｔａｌＤＮＡ，ｃｆｆＤＮＡ）以来［１］，基于胎儿游离ＤＮＡ无创产前检测打开了产前筛查新路径，改变了传统产前血清学筛查模式。
孕中期NIPT应用于唐氏综合征筛查的效果分析
孕中期NIPT应用于唐氏综合征筛查的效果分析叶强;韦懿【摘要】目的分析孕中期NIPT应用于唐氏综合征筛查的效果.方法研究选取孕妇998名进行研究,采用NIPT检测所有研究对象,并联合进行血清学检测即使用荧光免疫技术测定孕妇血清AFP、游离的AFP、uE3以及游离β-hCG水平;以血清学和NIPT同时阳性为高风险.进一步进行羊水穿刺检查进行确诊,同时随访新生儿出生后l周的母婴情况.研究使用SPSS 20.0行统计分析.结果研究中受试对象中单纯NIPT检测的高风险检出14例,检出率为1.40％;联合血清学检查高风险的孕妇检出12例,阳性率为1.20％.NIPT联合血清学检测高风险的12例孕妇平均孕周17.5 ±3.2周,孕妇平均年龄26.4±3.0岁;低风险组平均18.1 ±2.0孕周,孕妇年龄为25.2 ±3.2岁;高风险孕妇平均年龄高于低风险组孕妇,P＜0.05.高风险孕妇中10例接受了羊水侵入性产前诊断,经胎儿染色体核型分析,检出胎儿染色体异常的概率为6例,总的异常发生率为0.60％;2例孕妇拒绝羊水穿刺,随访新生儿出生l周情况,未见唐氏综合征患儿出现.NIPT对唐氏综合征的检出阳性预测值为100％.结论孕中期NIPT联合血清学检测应用于唐氏综合征筛查效果优良,值得临床推荐.【期刊名称】《标记免疫分析与临床》【年(卷),期】2018(025)007【总页数】3页(P984-986)【关键词】孕中期;NIPTT;血清学检测;唐氏综合征;筛查【作者】叶强;韦懿【作者单位】自贡市妇幼保健院检验科,四川自贡643000;自贡市妇幼保健院检验科,四川自贡643000【正文语种】中文唐氏综合征严重危害母婴身心健康，孕中期筛查已经成为全球各国各地公认的预防唐氏综合征的方法［1］，传统唐氏筛查主要通过检测母亲的血清生化指标或联合超声测量胎儿颈部透明层的厚度等方法来进行唐氏综合征的筛查［2，3］，随着学科以及相关技术的发展，目前唐氏筛查在我国已成为产前检查的重要项目之一，《高通量测序产前筛查技术管理规范（试行）》中就建议，如果孕妇被检出属于唐氏筛查临界风险，建议孕妇应进行无创胎儿DNA检测（non-invasive prenatal testing，NIPT作为后续检查，NIPT如果检出高风险，随后应行侵入性产前诊断［4，5］。
无创产前基因检测筛查胎儿染色体异常的临床应用价值
㊃论 著㊃D O I :10.3969/j.i s s n .1672-9455.2024.08.013无创产前基因检测筛查胎儿染色体异常的临床应用价值*李华锋,徐从红ә,冯 桐,邱吉刚,李永丽山东省临沂市妇幼保健院医学遗传科,山东临沂276000摘 要:目的 探讨无创产前基因检测(N I P T )筛查胎儿染色体异常的临床应用价值㊂方法 回顾性选取2017年1月至2022年6月在该院医学遗传科因N I P T 提示胎儿染色体异常的952例单胎孕妇的临床资料作为研究对象㊂按照年龄将所有研究对象分为低年龄组(<35岁,467例)与高年龄组(ȡ35岁,485例)㊂对所有研究对象进行核型分析和染色体微阵列分析(C MA ),计算阳性预测值(P P V )㊂随访所有孕妇,随访时间为分娩后3~12个月㊂结果 收集的952例N I P T 胎儿染色体异常的孕妇中,515例为常见染色体非整倍体,244例为性染色体非整倍体(S C A ),193例为其他染色体异常㊂515例常见染色体非整倍体中真性常见染色体三体胎儿397例,P P V 为77.09%;244例S C A 中真性S C A 119例,P P V 为48.77%;193例其他染色体异常中真性染色体异常61例㊂所有孕妇均在预产期3~12个月内进行妊娠结局电话随访㊂952例孕妇失访112例,随访成功率为88.24%㊂随访成功401例已出生胎儿,其中自然分娩261例,剖宫产140例;足月生产378例,早产儿23例;体质量正常儿363例,低体质量儿17例,巨大儿21例;出生健康胎儿396例,出生缺陷胎儿5例㊂结论 N I P T 筛查胎儿常见染色体非整倍体准确性高,可筛查S C A ,但不推荐筛查罕见染色体非整倍体㊂关键词:无创产前基因检测; 核型分析; 染色体微阵列分析; 阳性预测值; 妊娠结局中图法分类号:R 596.2文献标志码:A文章编号:1672-9455(2024)08-1087-05C l i n i c a l a p p l i c a t i o n v a l u e o f n o n -i n v a s i v e p r e n a t a l g e n e t i c t e s t i n gi n s c r e e n i n g fe t a l c h r o m o s o m a l a b n o r m a l i t i e s *L I H u a f e n g ,X U C o n g h o n g ә,F E N G T o n g ,Q I U J i g a n g ,L I Y o n g l i D e p a r t m e n t o f M e d i c a l G e n e t i c s ,L i n y i M a t e r n a l a n d C h i l d H e a l t h H o s pi t a l ,L i n y i ,S h a n d o n g 276000,C h i n a A b s t r a c t :O b j e c t i v e T o i n v e s t i g a t e t h e c l i n i c a l a p p l i c a t i o n v a l u e o f n o n -i n v a s i v e p r e n a t a l g e n e t i c t e s t i n g (N I P T )i n s c r e e n i n g f e t a l c h r o m o s o m a l a b n o r m a l i t i e s .M e t h o d s T h e c l i n i c a l d a t a o f 952s i n g l e t o n p r e gn a n t w o m e n w i t h f e t a l c h r o m o s o m a l a b n o r m a l i t i e s i n d i c a t e d b y N I P T i n t h e D e pa r t m e n t o f M e d i c a l G e n e t i c s o f t h e h o s p i t a l f r o m J a n u a r y 2017t o J u n e 2022w e r e s e l e c t e d r e t r o s p e c t i v e l y a s t h e r e s e a r c h ob j ec t s .A c c o rd i n g t o a ge ,a l l s u b j e c t s w e r e d i v i d e d i n t o l o w a g e g r o u p (<35y e a r s o l d ,467c a s e s )a n d h i g h a g e g r o u p (ȡ35y e a r s o l d ,485c a s e s ).K a r y o t y p e a n a l y s i s a n d c h r o m o s o m a l m i c r o a r r a y a n a l ys i s (C MA )w e r e p e r f o r m e d o n a l l s u b -j e c t s ,a n d p o s i t i v e p r e d i c t i v e v a l u e (P P V )w a s c a l c u l a t e d .A l l p r e g n a n t w o m e n w e r e f o l l o w e d u p fo r 3t o 12m o n t h s a f t e r d e l i v e r y .R e s u l t s A t o t a l o f 952c a s e s o f N I P T p r e gn a n t w o m e n w i t h f e t a l c h r o m o s o m a l a b n o r -m a l i t i e s w e r e c o l l e c t e d ,i n c l u d i n g 515c a s e s o f c o mm o n c h r o m o s o m a l a n e u pl o i d i e s ,244c a s e s o f s e x c h r o m o -s o m e a n e u p l o i d e i s ,a n d 193c a s e s o f o t h e r c h r o m o s o m a l a b n o r m a l i t i e s .A m o n g 515c a s e s o f c o mm o n c h r o m o -s o m a l a n e u p l o i d i e s ,397c a s e s w e r e t r u e t r i s o m y ,a n d t h e P P V w a s 77.09%.A m o n g 244c a s e s o f S C A ,119c a -s e s w e r e t r u e S C A ,a n d t h e P P V w a s 48.77%.T h e r e w e r e 193c a s e s o f o t h e r c h r o m o s o m a l a b n o r m a l i t i e s ,a n d61c a s e s o f t r u e c h r o m o s o m a l a b n o r m a l i t i e s .A l l p r e g n a n t w o m e n w e r e f o l l o w e d u p b y t e l e ph o n e w i t h i n 3t o 12m o n t h s o f t h e e x p e c t e d d a t e o f d e l i v e r y .A m o n g 952p r e g n a n t w o m e n ,112c a s e s w e r e l o s t t o f o l l o w -u p,a n d t h e f o l l o w -u p s u c c e s s r a t e w a s 88.24%.A t o t a l o f 401f e t u s e s w e r e f o l l o w e d u p ,i n c l u d i n g 261c a s e s o f s po n t a -n e o u s d e l i v e r y ,140c a s e s o f c e s a r e a n s e c t i o n ,378c a s e s o f t e r m d e l i v e r y ,23c a s e s o f p r e m a t u r e d e l i v e r y,363c a -s e s o f n o r m a l b i r t h w e i g h t ,17c a s e s o f l o w b i r t h w e i g h t i n f a n t s ,21c a s e s o f m a c r o s o m i a ,396c a s e s o f h e a l t h yb i r t h i n f a n t s ,a n d 5c a s e s o f b i r t hdef e c t s .C o n c l u s i o n N I P T h a s h igh a c c u r a c yi n s c r e e n i n g co mm o n f e t a l c h r o m o s o m a l a n e u pl o i d i e s a n d c a n s c r e e n f o r S C A ,b u t i t i s n o t r e c o mm e n d e d t o s c r e e n r a r e c h r o m o s o m a l a n e -u pl o i d i e s .㊃7801㊃检验医学与临床2024年4月第21卷第8期 L a b M e d C l i n ,A pr i l 2024,V o l .21,N o .8*基金项目:临沂市重点研发计划(2022Y X 0016);临沂市妇幼保健院科研基金项目(Y 202203)㊂ 作者简介:李华锋,男,副主任医师,主要从事遗传与优生方面的研究㊂ ә 通信作者,E -m a i l :1505287299@q q.c o m ㊂K e y w o r d s:n o n-i n v a s i v e p r e n a t a l g e n e t i c t e s t i n g; k a r y o t y p e a n a l y s i s;c h r o m o s o m a l m i c r o a r r a y a n a l y-s i s;p o s i t i v e p r e d i c t i v e v a l u e;p r e g n a n c y o u t c o m e我国出生缺陷总发生率为5.6%[1],染色体畸变是出生缺陷的主要原因之一,在新生儿中的发生率约为0.5%[2],可导致新生儿智力低下㊁发育迟缓㊁颜面部畸形㊁内脏畸形等㊂产前筛查与诊断为预防胎儿出生缺陷的基本措施,目前产前筛查主要包括血清学筛查和无创产前基因检测(N I P T)㊂血清学筛查主要筛查年龄<35岁孕妇所孕胎儿21-三体综合征(T21)㊁18-三体综合征(T18),多数地区为其提供免费筛查服务㊂N I P T除筛查T21㊁T18外,还可筛查出13-三体综合征(T13)及性染色体非整倍体(S C A),可作为辅助性检查来报告其他染色体异常㊂随着测序技术的发展,扩展性N I P T(N I P T-p l u s)可筛查基因组拷贝数变异(C N V)及相关的微缺失/微重复综合征(MM S)[3],但其价格较昂贵㊂针对N I P T能否取代血清学筛查成为出生缺陷的一线筛查技术,以及N I P T-p l u s能否广泛应用于临床筛查C N V均还存在争议[4-5]㊂本研究分析952例N I P T异常的单胎孕妇的产前诊断结果㊁计算阳性预测值(P P V)及随访妊娠结局,探讨N I P T技术在产前筛查中的临床价值,以期为该技术在产前筛查的合理应用提供参考依据,现报道如下㊂1资料与方法1.1一般资料回顾性选取2017年1月至2022年6月在本院医学遗传科因N I P T提示胎儿染色体异常的952例单胎孕妇的临床资料作为研究对象㊂年龄25~46岁,孕周16~22周㊂按照年龄将所有研究对象分为低年龄组(<35岁,467例)与高年龄组(ȡ35岁,485例)㊂本研究通过本院医学伦理委员会审核批准(Q T L-Y X L L-2023045)㊂1.2仪器与试剂广州白云山羊水细胞培养基,L e i-c a G L S120核型扫描仪;T i a n g e n B i o t e c h C o D N A提取试剂盒,美国A f f y m e t r i x C y t o S c a n750K阵列芯片及配套试剂,A f f y m e t r i x G e n e C h i p3000扫描仪㊂1.3方法1.3.1染色体核型分析超声引导下进行羊膜腔穿刺术㊂采集所有研究对象羊水24m L,平均分为3份,其中2份用于常规G带核型分析,按照标准细胞学操作收获核型,使用核型扫描仪进行扫描㊂1.3.2染色体微阵列分析(C MA)1份8m L羊水用于C MA㊂所有操作过程均按照制造商的说明书进行㊂使用A f f y m e t r i x G e n e C h i p3000扫描仪7G进行扫描㊂使用C h r o m o s o m e A n a l y s i s S u i t e C h A S3.2软件进行C MA结果分析㊂1.3.3数据分析染色体核型由2名检测人员根据国际人类细胞基因组命名系统进行独立分析㊂查询相关数据库,所有C N V根据美国医学遗传学会对C N V的解释,将C N V分为5类:致病性拷贝数变异(p C N V)㊁可能致病变异㊁意义不确定变异(V O U S)㊁良性变异和可能良性变异㊂分析N I P T染色体异常类型㊁N I P T染色体异常诊断结果㊁N I P T常见染色体非整倍体核型分析结果㊁N I P T S C A诊断结果及N I P T其他染色体异常诊断结果㊂1.3.4随访对所有孕妇进行电话随访,随访时间为分娩后3~12个月,记录孕妇妊娠结局情况,记录分娩方式㊁孕周㊁胎儿体质量及健康状况等㊂1.4统计学处理采用S P S S26.0统计软件进行数据分析处理㊂计数资料以例数或百分率表示,组间比较采用χ2检验㊂以P<0.05为差异有统计学意义㊂2结果2.1 952例孕妇N I P T胎儿染色体异常类型结果515例为常见染色体非整倍体,其中T21375例, T1893例,T1347例㊂244例为S C A,其中性染色体数目偏多150例,性染色体数目偏少94例㊂193例为其他染色体异常,其中罕见染色体非整倍体151例, N I P T-p l u s提示的C N V异常42例㊂罕见染色体非整倍体中占比最高的为7号染色体三体(22.52%, 34/151),其他为22号染色体三体(15.23%, 23/151)㊁8号染色体三体(10.60%,16/151)等,未收集到有关19号染色体数目异常的病例;N I P T-p l u s提示C N V异常涉及片段大小在2.10~36.90M b,缺失性C N V17例,重复性C N V19例,同时发生缺失性和重复性C N V异常6例㊂2.2 N I P T染色体异常诊断结果在515例常见染色体非整倍体中检测出397例真性常见染色体三体胎儿,P P V为77.09%(397/515),244例S C A检出119例真性S C A胎儿,P P V为48.77%(119/244); 193例其他染色体异常中确诊61例真性染色体异常胎儿,P P V为31.61%(61/193)㊂低年龄组与高年龄组N I P T筛查的T21㊁T18㊁T13㊁S C A及其他染色体异常的P P V比较,差异均无统计学意义(χ2=1.706㊁0.025㊁3.116㊁0.954㊁0.000,P=0.190㊁0.874㊁0.078㊁0.329㊁0.995)㊂见表1㊂表1 N I P T染色体异常诊断结果[%(n/n)]组别n P P V组别n P P V低年龄组46754.18(253/467)高年龄组48566.80(324/485)常见三体20972.25(151/209)常见三体30680.40(246/306) T2115281.58(124/152)T2122386.55(193/223) T183167.74(21/31)T186269.35(43/62) T132623.08(6/26)T132147.62(10/21)性染色体异常14146.10(65/141)性染色体异常10352.42(54/103)其他染色体异常11731.62(37/117)其他染色体异常7631.58(24/76)㊃8801㊃检验医学与临床2024年4月第21卷第8期 L a b M e d C l i n,A p r i l2024,V o l.21,N o.82.3 N I P T常见染色体非整倍体核型分析结果515例常见染色体三体共检出397例真性常见染色体三体胎儿,其中T21317例㊁T1864例㊁T1316例㊂T21的P P V为84.53%(317/375);T18P P V为68.82% (64/93);T13P P V为39.00%(16/41)㊂2.4 N I P T S C A诊断结果确诊的119例S C A胎儿,占比最高的为47,X X Y(32.77%),其次为47, X X X(26.05%)和47,X Y Y(15.97%)㊂性染色体三体胎儿P P V占60.00%(90/150),明显高于45,X的20.21%(19/94),差异有统计学意义(χ2=37.011, P<0.05)㊂见表2㊂2.5 N I P T其他染色体异常诊断结果 N I P T提示的193例其他染色体异常中,共确诊61例真性染色体异常胎儿,其中5例嵌合型罕见染色体非整倍体㊁31例p C N V及25例V O U S㊂151例罕见染色体非整倍体中,嵌合型罕见染色体非整倍体5例(包括3例嵌合型2-三体㊁1例嵌合型22-三体,1例嵌合型9-三体);另检测出p C N V17例㊁V O U S10例,P P V为64.28% (27/42);42例N I P T-p l u s提示的C N V中检出p C N V 14例及相关MM S和V O U S15例㊂见表3㊂表2 N I P T确诊的119例S C A胎儿性染色体异常诊断结果S C A类型产前诊断例数(n)构成比(%) 45,X97.56 45,X/46,X X43.36 45,X/46,X Y32.52 45,X/47,X X X32.52 47,X X,+m a r21.68 47,X X X3126.05 47,X X Y3932.77 47,X Y Y1915.97 47,X X Y/46,X Y10.84 46,X,i(X)(q10)10.84 46,X,a d d(X)(p22.3)10.84 46,X,d e l(X)(p11.2)21.68 46,X,d e l(X)(p21.1)10.84 46,X,d e l(X)(q22.1)10.84 46,X,d e r(X)t(X;Y)(p22.31;q11.21)10.84 46,X Y,d u p(X)(p22.33;p21.2)10.84合计1191.00表3 N I P T-p l u s提示C N V经产前诊断的p C N V编号N I P T异常C N V C MA结果相关MM S11q43q44,缺失12.00M b1q43q44X1,1缺失11.99M b18p11.32p11.21,重复15.00M b18p11.32p11.21X3,重复13.83M b1q43-q44缺失综合征25P15.33P15.2,缺失12.52M b5p15.33p15.11X1,缺失17.26M b9p24.3p22.3X3,重复14.63M b猫叫综合征35q21.3q22.2,缺失3.96M b5q21.3q22.2X1,缺失4.11M b8p23.3p23,缺失7.96M b8p23.3p23.1X1,缺失6.77M b49p24.3p24.1,缺失5.12M b9p24.3p24.1X1,缺失4.59M b59p24.3p21.3,重复23.00M b9p24.3p22.1X3,重复19.44M b610q25.210q26.3,重复24.20M b10q25.1q26.3X3,重复24.11M bX p22.33p22.2,缺失12.40M b X p22.33p22.2X1,缺失14.95M b715q11.215q13.1,重复5.00M b15q11.2q13.1X3,重复5.23M b P r a d e r-W i l l i/A n g e l m a n综合征816p13.12p12.3,缺失2.10M b16p13.11X1,缺失1.54M b16p13.11微缺失综合征916q21.1q21,重复11.86M b16q11.2q21X3,重复18.65M b1022q13.31q13.33,缺失5.70M b22q13.31q13.33X1,缺失6.00M b22q13.31X3,重复888.00K b22q13.3微缺失综合征1122q11.21X1,缺失4.50M b22q11.21X1,缺失3.15M b D i G e o r g e综合征1222q11.21X1,缺失4.25M b22q11.21X1,缺失3.15M b D i G e o r g e综合征13X p22.31,缺失1.74M b X p22.31X0,缺失1.68M b鱼鳞病14X p22.33p21.2,重复27.20M b X P22.33p21.2,重复27.20M b2.6随访情况952例孕妇失访112例,随访成功率为88.24%㊂8例T21选择继续妊娠;3例T18和1例T13自然流产/死胎,其余全部选择终止妊娠;S C A 中选择继续妊娠的35例,终止妊娠的51例;确诊染㊃9801㊃检验医学与临床2024年4月第21卷第8期 L a b M e d C l i n,A p r i l2024,V o l.21,N o.8色体正常胎儿但因后期超声异常终止妊娠2例,不明原因死胎1例㊂见表4㊂随访成功401例已出生胎儿,其中自然分娩261例,剖宫产140例;足月(孕周:37~42周)生产378例,早产儿(孕周<37周)23例;体质量正常儿(2.5~ 4.0k g)363例,低体质量儿(<2.5k g)17例,巨大儿(>4.0k g)21例;出生健康胎儿396例,出生缺陷胎儿5例㊂表4随访情况(n)N I P T诊断类型n终止妊娠继续妊娠流产/死胎失访T213172868023T1864500311T131614011S C A1195135033其他染色体异常61312109正常3752337135合计95243440151123讨论3.1 N I P T常见染色体非整倍体的临床意义2011年N I P T引入临床检测胎儿常见染色体非整倍体,因其快速㊁无创㊁准确率高的特点而在全球范围内广泛应用,且对T21㊁T13㊁T18有较高的检出率和P P V㊂本研究中N I P T低年龄组与高年龄组的P P V均符合国内外报道的数据[5-6]㊂评估N I P T结果的准确性不仅取决于其检测能力,还与疾病的发生率有关,T18㊁T13的发病率均低于T21的发病率,检出的T18㊁T13例数少,差异大,可能是因为T18㊁T13的P P V明显低于T21的P P V㊂N I P T假阳性的一个重要原因是限制性胎盘嵌合㊂N I P T检测的是胎盘滋养层细胞释放到母体外周血中的游离D N A,而三体在形成的过程中会自救导致胎盘滋养层三体核型和正常核型嵌合,造成胎儿核型正常的假阳性结果[7]㊂T13更容易发生限制性胎盘嵌合,这可能是T13的P P V最低的原因㊂除失访病例,T21有8例选择继续妊娠,T13和T18除自然流产死胎全部终止妊娠㊂3.2 N I P T S C A的临床意义人类胚胎S C A主要包括特纳综合征(45,X)㊁超雌综合征(47,X X X)㊁克氏综合征(47,X X Y)㊁超雄综合征(47,X Y Y),S C A发生率约占新生儿的1/400~1/350[8]㊂N I P T应用于S C A的产前筛查仍有争议,X U等[9]认为N I P T S C A 假阳性率高㊁P P V低,黄婷婷等[10]认为N I P T提高了S C A筛查效率及产前检出率,能避免严重畸形儿的出生㊂本研究S C A总的P P V为48.77%,符合相关文献报道的30.00%~67.00%[11]㊂45,X的P P V明显低于性染色体三体的P P V,可能与母体染色体核型异常(如低比例嵌合的45,X㊁母体C N V)㊁X和Y染色体高度同源有关[12]㊂有研究表明,超雌综合征和超雄综合征对胎儿的影响较小[13-14],这决定了其不同的妊娠结局㊂本研究认为N I P T可以作为筛查胎儿性染色体异常的一线方法,但45,X的P P V较低,应结合超声检查及产前诊断结果指导孕妇决定妊娠结局㊂3.3 N I P T其他染色体异常诊断结果的临床意义随着N I P T技术的发展,N I P T-p l u s可检测罕见染色体非整倍体和C N V㊂Q I等[15]对35例N I P T7-三体高风险孕妇进行验证,证实多数为限制性胎盘嵌合,胎儿核型通常正常,但本研究因条件限制未取得胎盘验证,只确诊5例嵌合型的罕见常染色体非整倍体㊂有研究表明胎儿的每条染色体均可随机发生数目异常,但除T13㊁T18㊁T21以外的其他常染色体数目异常往往引起胎儿早期流产,导致在孕中期能确诊的其他常染色体非整倍体例数极少[16]㊂本研究结果显示, 5例嵌合型罕见染色体非整倍体中,1例嵌合型22-三体失访,1例嵌合型2-三体在后续的超声检测中未发现异常,经慎重考虑继续妊娠,且足月顺产,在婴儿6㊁12月时回访,智力㊁生长发育均正常,原因可能为采用羊水脱落细胞检测胎儿游离D N A并不能完全代表胎儿的表型,尤其是嵌合体更应加强遗传咨询,其余3例均终止妊娠㊂以上N I P T筛查的罕见染色体非整倍体确诊例数少,不推荐用于一线筛查㊂C N V广泛存在于人类基因组中,p C N V在正常人群中的发病率为1.00%~1.70%,远高于T21的发病率(0.13%~0.17%)[17],与之相关的MM S是一重要群体,可导致不同程度的生长发育迟缓㊁智力障碍㊁颅面内脏畸形[18]㊂有文献报道MM S的P P V在不同研究间存在明显差异,范围从低(11.00%)到高(77.00%)不等[19]㊂本研究中42例N I P T-p l u s共筛查出27例C N V,P P V为64.28%㊂确诊的14例p C-N V涉及1q43-q44缺失综合征㊁猫叫综合征㊁P r a d e r-W i l l i/A n g e l m a n综合征㊁16p13.11微缺失综合征㊁22q13.3微缺失综合征等常见MM S㊂在N I P T-p l u s 提示的罕见染色体数目异常中也检测出14例p C-N V,尽管与产前诊断结果不一致,但当N I P T-p l u s提示罕见染色体数目异常时,应当建议产前诊断,避免严重畸形儿的出生,另检测出15例V O U S,结合后期超声无异常,并经遗传咨询,大多数孕妇选择继续妊娠㊂V O U S的不确定性会增加产前遗传咨询的复杂性,导致不必要的侵入性产前诊断,可能增加孕妇的焦虑[20]㊂因此,在临床实践中引入N I P T-p l u s,要结合病例㊁超声检查结果进行仔细的遗传咨询后再做出选择㊂3.4401例已出生胎儿随访的临床意义401例已㊃0901㊃检验医学与临床2024年4月第21卷第8期 L a b M e d C l i n,A p r i l2024,V o l.21,N o.8出生胎儿的随访结果因受电话随访的方式㊁随访时间㊁随访对象保护隐私及文化程度的影响,与真实出生胎儿健康状况并不完全一致㊂因此,如何及时有效㊁准确地获得产前诊断后的回访信息,进一步对出生缺陷患儿早期干预及治疗还需进行深入探讨㊂综上所述,N I P T相对于血清学筛查胎儿常见染色体非整倍体有较高的准确度,尤其对T21的P P V高,但仍是一项筛查技术,不能泛化到本该做产前诊断的人群中㊂检测S C A时还需积累相关数据尤其是提高性染色体数目减少符合率,不推荐用于罕见染色体非整倍体的筛查㊂N I P T-p l u s筛查C N V时要进行详细的遗传咨询,加深测序深度,重点筛查发病率高的MM S㊂建议对所有N I P T高风险病例进行核型分析及染色体微阵列检测以减少漏诊率㊁误诊率㊂妊娠结局随访能及时发现出生缺陷患儿,提供早期干预及治疗㊂参考文献[1]中华医学会医学遗传学分会临床遗传学组,中国医师协会医学遗传医师分会遗传病产前诊断专业委员会,中华预防医学会出生缺陷预防与控制专业委员会遗传病防控学组.低深度全基因组测序技术在产前诊断中的应用专家共识[J].中华医学遗传学杂志,2019,34(4):293-296.[2]H I N O J O S A M C,Y E R E N A D E V E G A M C,P A N Z Z I ME,e t a l.G e n e t i c a m n i o c e n t e s i s i n h i g h-r i s k p o p u l a t i o n s e x p e r i e n c e i n3081c a s e s[J].G i n e c o l O b s t e t M e x,2009, 77(4):173-182.[3]S H I P L,WA N G Y,L I A N G H B,e t a l.T h e p o t e n t i a l o fe x p a n d e d n o n i n v a s i v e p r e n a t a l s c r e e n i n gf o r d e t e c t i o n o fm i c r o d e l e t i o n a n d m i c r o d u p l i c a t i o n s y n d r o m e s[J].P r e n a tD i a g n,2021,41(10):1332-1342.[4]刘静,焦红燕,陈立霞,等.基于河北省百万孕妇的无创产前基因检测与唐氏血清学筛查项目实践的对比分析[J].中国妇幼保健,2022,37(22):4115-4118.[5]C H R I S T I A E N S L,C H I T T Y L S,L A N G L O I S S.C u r r e n tc o n t r o v e r s i e s i n p r e n a t a ld i a g n o s i s:e x p a n d e d N I P T t h a t i n c l u d e s c o n d i t i o n s o t h e r t h a n t r i s o m i e s13,18,a n d21 s h o u l d b e of f e r e d[J].P r e n a t D i ag n,2021,41(10):1316-1323.[6]曾兰,邓艺,魏萍,等.四川地区58113例无创D N A产前检测胎儿染色体非整倍体及其妊娠结局分析[J].中国优生与遗传杂志,2021,29(5):658-663.[7]张丽春,王杰,郭志远,等.胎盘嵌合对无创产前筛查假阳性影响[J].中国生育健康杂志,2022,33(4):357-361.[8]张丽娜,甄恩明,乔志坤,等.性染色体异常的产前诊断指征及妊娠结局分析[J].中国妇幼健康研究,2020,31(6): 774-777.[9]X U L,HU A N G H,L I N N,e t a l.N o n-i n v a s i v e c e l l-f r e ef e t a l D N A t e s t i ng f o r a n e u p l o i d y:m u l t i c e n t e r s t u d y o f31 515s i n g l e t o n p r e g n a n c i e s i n s o u th e a s t e r n C hi n a[J].U l-t r a s o u n d O b s t e t G y n e c o l,2020,55(2):242-247. [10]黄婷婷,卢婉,刘艳秋.无创产前基因检测在性染色体非整倍体产前筛查中的应用[J].实验与检验医学,2020,38(2):209-211.[11]张玉鑫,闫露露,刘颖文,等.无创产前检测对于筛查非目标染色体异常的价值[J].中华医学遗传学杂志,2020,37(6):621-626.[12]L E I Y,D O N G M Y.A s s o c i a t i o n o f m a t e r n a l a g e w i t h f e-t a l s e x c h r o m o s o m e a n e u p l o i d i e s[J].Z h e j i a n g D a X u e X u e B a o Y i X u e B a n,2019,48(4):409-413. [13]苏世博,李俊果,杨珣,等.无创产前基因检测对胎儿性染色体非整倍体的检测性能分析[J].中国妇幼保健,2022, 37(22):4119-4122.[14]姜春阳,江元,卢寨娥.无创产前检测与有创产前诊断技术在胎儿7号染色体异常筛查中的价值研究[J].现代实用医学,2023,35(9):1131-1134.[15]Q I Y M,Y A N G J X,HO U Y P,e t a l.T h e s i g n i f i c a n c e o f t r i s o m y7m o s a i c i s m i n n o n i n v a s i v e p r e n a t a l s c r e e n i n g [J].H u m G e n o m i c s,2019,13(1):18.[16]孙小红,冯暄,刘芙蓉,等.扩展性无创产前检测在胎儿染色体异常中的临床应用效果分析[J].生殖医学杂志, 2023,32(3):339-343.[17]C H E N S C,Z HA N G L L,G A O J,e t a l.E x p a n d i n g t h e s c o p e o f n o n-i n v a s i v e p r e n a t a l t e s t i n g t o d e t e c t f e t a l c h r o-m o s o m a l c o p y n u m b e r v a r i a t i o n s[J].F r o n t M o l B i o s c i, 2021,8:649169.[18]T I A N W F,Y U A N Y Y,Y U A N E F,e t a l.E v a l u a t i o n o f t h e c l i n i c a l u t i l i t y o f e x t e n d e d n o n-i n v a s i v e p r e n a t a l t e s-t i n g i n t h e d e t e c t i o n o f c h r o m o s o m a l a n e u p l o i d y a n d m i-c r ode l e t i o n/m i c r o d u p l i c a t i o n[J].E u r J M e d R e s,2023,28(1):304.[19]F AM I L I A R I A,B O I T O S,R E M B O U S K O S G,e t a l.C e l l-f r e e D N A a n a l y s i s o f m a t e r n a l b l o o d i n p r e n a t a l s c r e e n i ng f o r ch r o m o s o m a l mi c r o d e l e t i o n s a n d m i c r o d u p l i c a t i o n s:as y s t e m a t i c r e v i e w[J].P r e n a t D i a g n,2021,41(10):1324-1331.[20]B U R K E W,P A R E N S E,C HU N G W K,e t a l.T h e c h a l-l e n g e o f g e n e t i c v a r i a n t s o f u n c e r t a i n c l i n i c a l s i g n i f i c a n c e: a n a r r a t i v e r e v i e w[J].A n n I n t e r n M e d,2022,175(7): 994-1000.(收稿日期:2023-08-16修回日期:2023-12-31)㊃1901㊃检验医学与临床2024年4月第21卷第8期 L a b M e d C l i n,A p r i l2024,V o l.21,N o.8。
染色体核型分析联合CNV-seq技术在NIPT高危孕妇产前诊断中的临床应用研究进展
*基金项目：广西壮族自治区卫生健康委员会科研课题项目（Z20201084）①梧州市妇幼保健院 广西 梧州 543002染色体核型分析联合CNV-seq技术在NIPT高危孕妇产前诊断中的临床应用研究进展*黎永鉴① 闫丽琼① 朱昭颖① 【摘要】 染色体核型分析联合拷贝数变异测序（CNV-seq）技术对非侵入性产前检测（NIPT）高危孕妇进行产前诊断，检出胎儿的严重遗传缺陷，并在知情同意下行临床干预，是近年临床预防出生缺陷的常用手段。
NIPT 技术由于其敏感性高、特异性高、准确性高及无创性等优势，近年逐渐成为临床产前筛查的主流检测技术。
传统的染色体核型分析技术，在细胞遗传学领域一直是确诊染色体畸变的“金标准”。
长期以来，该技术是染色体病的产前诊断主要方法，染色体核型分析主要局限性是对染色体的微小结构变异和基因变异不能有效检出。
CNV-seq 技术不但能准确检出常规的染色体异常，而且能对未知来源的染色体片段提供更为精准的检测信息，特别是5 Mb 片段以下的染色体微缺失/微重复，但CNV-seq 技术缺点是不能检出平衡易位和倒位等染色体异常，因此两种产前诊断技术的优缺点可互为补充。
染色体核型分析联合CNV-seq 技术进行产前诊断，将会为NIPT 高危孕妇提供更为精确可靠的产前诊断结果，减少出生缺陷。
本文将对染色体核型分析联合CNV-seq 技术在NIPT 高危孕妇产前诊断中的临床应用做简要综述，为临床工作提供参考。
【关键词】 非侵入性产前检测 高危孕妇 染色体核型分析 拷贝数变异 二代测序技术 染色体畸变 产前诊断 doi：10.14033/ki.cfmr.2023.19.046 文献标识码 A 文章编号 1674-6805（2023）19-0180-05 Progress in Clinical Application of Chromosome Karyotype Analysis Combined with CNV-seq Technique in Prenatal Diagnosis of NIPT High-risk Pregnant Women/LI Yongjian, YAN Liqiong, ZHU Zhaoying. //Chinese and Foreign Medical Research, 2023, 21(19): 180-184 [Abstract] In recent years, chromosome karyotype analysis combined with copy number variation sequencing (CNV-seq) technology is a common means of clinical prevention of birth defects in non-invasive prenatal testing (NIPT) high-risk pregnant women for prenatal diagnosis, detection of fetal serious genetic defects, and clinical intervention after informed consent. Due to its advantages of high sensitivity, specificity, accuracy, and non-invasive, noninvasive prenatal test (NIPT) technology has gradually become the mainstream technology for clinical prenatal screening in recent years. Chromosome karyotype analysis technology has always been considered as the "gold standard" for diagnosing chromosomal aberrations, and is also a first-line method for prenatal diagnosis of chromosomal diseases. The main limitation of chromosome karyotype analysis is that it can not effectively detect the small structural and genetic variations of chromosomes. CNV-seq technology can not only detect conventional chromosome number and structural abnormalities, but also provide more accurate detection information for chromosome fragments from unknown sources. Microdeletion and microduplication of chromosome fragments above 5 Mb can also be detected. However, CNV-seq technology has limitations such as inability to detect balanced translocation and inversion of chromosomes, so the advantages and disadvantages of the two prenatal diagnostic techniques can complement each other. Traditional karyotype analysis combined with CNV-seq technology for prenatal diagnosis will provide more accurate and reliable prenatal diagnosis results for NIPT high-risk pregnant women and reduce birth defects. This article will briefly review the clinical application of chromosome karyotype analysis combined with CNV-seq technology in prenatal diagnosis of NIPT high-risk pregnant women, providing reference for clinical work. [Key words] Noninvasive prenatal test High-risk pregnant women Chromosome karyotype analysis Copy number variation Second generation sequencing technology Chromosome aberration Prenatal diagnosis First-author's address: Wuzhou Maternal and Child Health Hospital, Wuzhou 543002, China 据《中国出生缺陷防治报告》（2012年）等所示，我国的出生缺陷发生率约为5.6%，每小时就有103例缺陷儿出生[1-3]。
胎儿游离ＤＮＡ浓度的影响因素及相关产前筛查／诊断策略探讨
《中国产前诊断杂志（电子版）》 ２０２３年第１５卷第３期·专家论坛· 胎儿游离ＤＮＡ浓度的影响因素及相关产前筛查／诊断策略探讨邢铃苓１ 刘洪倩２（１．四川大学华西第二医院医学遗传科／产前诊断中心；２．四川大学华西第二医院妇产科出生缺陷与相关妇儿疾病教育部重点实验室，四川成都，６１００４１）【摘要】 自１９９７年在孕妇血浆中发现了胎儿游离ＤＮＡ后，无创产前筛查（ｎｏｎ ｉｎｖａｓｉｖｅｐｒｅｎａｔａｌｓｃｒｅｅｎ ｉｎｇ，ＮＩＰＳ）便应运而生，并迅速在全球临床开展。
ＮＩＰＳ检测失败率约１％～３％，胎儿游离ＤＮＡ浓度（ｆｅｔａｌｆｒａｃｔｉｏｎ，ＦＦ）低是其中一个重要的原因。
本文主要对影响ＦＦ的胎儿因素、母体因素、实验室因素进行探讨，并结合孕妇相关临床特征、妊娠结局等，对进一步产前检查的选择进行探讨，以期为产前遗传咨询提供参考。
【关键词】 无创产前筛查；胎儿游离ＤＮＡ浓度；检测失败；遗传咨询【中图分类号】 Ｒ７１５．５ 【文献标识码】 Ａ犇犗犐：１０．１３４７０／ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｊｐｄ．２０２３．０３．００３ 通信作者：刘洪倩，Ｅｍａｉｌ：ｈｏｎｇｑｉａｎ．ｌｉｕ＠１６３．ｃｏｍ１ 概述正常人血液及体液循环中存在来源于细胞核ＤＮＡ和线粒体ＤＮＡ的少量游离ＤＮＡ（ｃｅｌｌｆｒｅｅＤＮＡ，ｃｆＤＮＡ）。
１９９７年，Ｌｏ等人［１］在母体血浆中发现了游离的胎儿ＤＮＡ片段（ｃｅｌｌｆｒｅｅｆｅｔａｌＤＮＡ，ｃｆｆＤＮＡ）。
ｃｆｆＤＮＡ主要来自胎盘和胎儿细胞，片段较小，长度在７５ｂｐ～２０５ｂｐ左右。
胎盘滋养层细胞分泌ｃｆｆＤＮＡ进入母体血浆，在孕４周左右即可检出，孕８周建立胎盘循环后ｃｆｆＤＮＡ则以一定比例稳定存在于母体外周血血浆中（图１）。
妊娠使母体循环中ｃｆＤＮＡ的总量增加了约３％～１３％。
胎儿游离ＤＮＡ浓度（ｆｅｔａｌｆｒａｃｔｉｏｎ，ＦＦ）是ｃｆｆＤＮＡ占母体ｃｆＤＮＡ总量的百分比［ＦＦ＝ｃｆｆＤＮＡ／（ｃｆｆＤＮＡ＋母源ｃｆＤＮＡ）×１００％］。
2017年国家卫计委临检中心室间质评计划活动安排台历(分月)
21 28
血气 血型 采供血机构 血液检验
29
未命名-1 7
17-1-9 上午10:34
八月份 August
SUN
尿碘 尿液化学分析 血细胞形态学检查 新筛 (Phe、TSH) 尿液沉渣形态学检查 血铅 中孕期母血清产前筛查 新筛（G6PD） 全血五元素（铜锌钙镁铁） 新生儿耳聋基因检测 新筛 (17 羟孕酮 ) 新生儿串联质谱筛查 - 氨基酸和酰基肉碱 出入境检验检疫系统微生物学 临床微生物学 （中级）
15
疾控中心 细菌学检验
17 24 31
新筛 (Phe、TSH) 新筛（G6PD） 新筛 (17 羟孕酮 ) 新生儿串联质谱筛查 氨基酸和酰基肉碱 新生儿耳聋基因检测 血红蛋白 A2 和 血红蛋白 F
11 18 25
HLA 基因分型 HLA B27 基因检测 HLA B*5701 HLA B*5801 HLA B*1502 地中海贫血基因检测 细胞色素 P450 2C9 基因分型
5 12 19 26
采供血机构 血液检验 采供血机构 病毒核酸检测 人类嗜 T 淋巴细胞病 毒抗体监测（HTLV I/ II 抗体） 尿液化学分析
6
7
10 17 30 24
13 20 27
尿液化学分析
采供血机构血液检验 采供血机构 病毒核酸检测 人类嗜 T 淋巴细胞病毒抗体监 测（HTLV I/II 抗体） 人乳头瘤病毒基因分型
1 8
WED
2 9 16 23
THU
3 10 17 24
FRI
4 11 18 25
SAT
5 12 19 26
6 13 20 27
7 14 21 28
15 22
未命名-1 2